Fermentų ir izofermentų tyrimas

Fermentai yra specifiniai baltymai, kurie atlieka biologinių katalizatorių vaidmenį organizme. Fermentai yra visuose kūno ląstelėse, kur jų koncentracija yra daug didesnė nei kraujo plazmoje. Dažniausiai tyrimo objekte dažniausiai naudojamas serumo

kraujas, kurio fermento sudėtis yra santykinai pastovi. Normalus fermento aktyvumas serume atspindi tarp gamyba ir išskyrimas fermentų( įprastinio ląstelių atnaujinimu) ir jų apmokėjimo iš kraujotakos santykis. Dėl fermentų atnaujinimo, ląstelių pažeidimo padidėjimo dažniausiai padidėja fermentų aktyvumas serume. Kraujo serume išskiriamos trys fermentų grupės: ląstelinės, sekretorinės ir išskirtinės.

ląstelių fermentų priklausomai nuo audinio suskirstyti į dvi grupes vieta:

■ nespecifinių fermentų, kurie katalizuoja bendri visiems audiniams keistis reakcijas ir yra daugelyje organų ir audinių;

■ organui specifiniai arba indikatoriniai fermentai, skirti tik tam tikram audinių tipui.

Ląstelių fermentų aktyvumas kraujyje yra mažas arba nėra. Patologinių procesų metu šios grupės fermentų aktyvumas serume priklauso nuo ląstelių išsiskyrimo greičio, kuris, savo ruožtu, priklauso nuo jų žalos laipsnio ir laipsnio.

sekrecinių fermentai( ceruloplazminu, pseudocholinesterase, lipopro-lipazės baltymų polimerus) patekti tiesiai į kraujo plazmoje ir atlikti jame specifines funkcijas.Šie fermentai sintezuojami kepenyse ir nuolat patenka į plazmą.Jų aktyvumas serume yra didesnis negu ląstelėse ar audiniuose. Klinikinėje praktikoje jie yra įdomūs, kai jų aktyvumas kraujo serume sumažėja, nes įprasta dėl kepenų funkcijos sutrikimo.Šlapimo suformuotas

fermentai virškinimo organų( kasos, žarnyno gleivinę, kepenų, tulžies takų endotelio).Tai apima a-amilazę, lipazę, šarminę fosfatazę ir tt Paprastai jų aktyvumas serume yra mažas ir pastovus. Tačiau patologijoje, kai užblokuojamas bet kuris iš įprastų ekskrecijos būdų, šių fermentų aktyvumas serume žymiai padidėja.

Išmatuotas fermentų aktyvumas gali būti dėl labai greito savybių, bet šiek tiek skirtingų fermentų molekulių formų.Šios įvairios formos vadinamos izofermentais. Tyrimo izofermentų klinikinių praktikoje yra naudinga, susidaro tada, kai atskiri izofermentų skirtingų audinių( pvz, įvairių LDH izofermentų vyrauja širdies ir kepenų).

Fermentų aktyvumo kiekybiniam nustatymui Tarptautinės biocheminės sąjungos fermentų komisija rekomendavo standartinį tarptautinį vienetą( TV).Vienas aktyvumo vienetas bet fermento pakeisdamas sumą, kad optimaliomis sąlygomis katalizuoja 1 mikromolių substrato konversiją per vieną minutę( pmol / min).

Fermento aktyvumas vertinamas pagal katalizuotos reakcijos greitį tam tikroje temperatūroje ir terpės pH, substrato koncentracijos. Todėl, nustatant fermentų aktyvumą, turi būti griežtai laikomasi tų pačių sąlygų.

Fermentinė reakcija jautri temperatūros pokyčiams. Tai yra įprasta atlikti jį temperatūrų intervale per

25-40 ° C, bet esant skirtingoms temperatūroms optimalus pH, buferio koncentracija, substratas ir kitų parametrų, yra skirtingi. Didžiausias aktyvumas dauguma fermentų žmogaus organizme buvo stebimas esant maždaug 37 ° C temperatūrojeTodėl tarptautinės standartizacijos tikslais fermento aktyvumo matavimai atliekami tam tikroje temperatūroje.Žemiau įprasto vertės fermentinio aktyvumo yra suteikiamas 37 ° C temperatūrojeTyrimas

fermentai naudojami klinikinėje praktikoje dėl įvairių užduočių: diagnostika, diferencinė diagnostika, vertinimas ligos dinamiką, nustatyti gydymo, regeneravimo laipsnį ir prognozės efektyvumą.Yra trijų tipų fermentų pokyčiai patologijos: giperfermente Mia - padidėjęs fermentų aktyvumo nei įprastai, hipo-fermento kiekis - jos mažėjimas disfermentemiya - dėl kraujo fermentų išvaizdą, kad paprastai nerastas.