Immunofenotipizzazione di emoblastosi
progressi significativi negli studi ematologiche associate negli ultimi anni con l'uso di metodi immunologici moderni e strumenti automatizzati per l'analisi e l'ordinamento delle cellule del sangue periferico e midollo osseo - citometri di flusso.morfologica tradizionale e lo studio citochimiche della malattia delle cellule substrato( sangue, midollo osseo rosso, linfonodi, milza, ecc), in molti casi, soprattutto nelle malattie linfoproliferative, non rivelano tutta la varietà di opzioni tra le forme morfologicamente simili e identificare l'origine del clone patologico. Questi problemi possono essere risolti solo studiando le caratteristiche immunologiche delle cellule. Ogni fase della differenziazione delle cellule Hemo-poetica ha una propria serie di Ar, che ha invitato la classificazione internazionale di differenziazione e differenziazione sono divisi in gruppi, CD designato. Nel blocco differenziazione delle alterazioni neoplastiche possono verificarsi in qualsiasi fase dello sviluppo delle cellule normali, risultando in un clone cellulare patologica definire malattia substrato ed avente la caratteristica stessa immunologica( o fenotipica).Dopo uno studio di questi marcatori in cellule può essere determinata mediante qualsiasi forma o realizzazione della malattia sono coerenti, ossia sulla base di immunologica diagnosi fenotipo cellulare differenziale, che è la più difficile in malattie linfoproliferative, perché le malattie patologiche substrato cellulare principale sono quasi lo stesso tipo di cellule morfologicamente. Fenotipizzazione permette utilizzando anticorpi monoclonali caratterizzati cellule blastiche e mature del sangue mieloide, mono-, serie linfocitica in presenza di differenziazione-pagato-Ar( recettori) nella parete cellulare. Sulle membrane dei globuli rossi e del midollo osseo rosso, è possibile identificare i seguenti archi( marcatori).
■ CD2 è una glicoproteina transmembrana monomerica.È presente sulla superficie di tutti i linfociti T circolanti e di alcuni linfociti NK.CD2 partecipa al processo di attivazione alternativa dei linfociti T.Rilevamento tramite CD2 anticorpi monoclonali utilizzati nella pratica clinica per Fenaughty festa-acuta leucemia a cellule T, linfoma, e condizioni infiammatorie croniche immunodeficienza.
■ CD3 - un complesso proteico associato al recettore delle cellule T specifico per Ar, questo è il principale marcatore funzionale dei linfociti T.Facilita la trasmissione del segnale di attivazione dalla membrana
al citoplasma della cellula. Determinazione del CD3 indicato per la diagnosi di leucemia acuta a cellule T, linfomi( CD3 non espressi in neoplasie linfoidi non-T cellulari) e immunodeficienza malattia-zione.
■ CD4 - glicoproteina transmembrana espressa da un sottoinsieme di T helper( induttori) costituisce il 45% dei linfociti del sangue periferico. Nelle prime fasi dello sviluppo dei linfociti nel timo, Ar CD4, così come CD8, è espresso da tutti i linfociti corticali.timociti midollari, che è simile al fenotipo maturo CD4 + T-cellule del sangue periferico( cellule T helper), espressione ruyut hanno o CD4, CD8 o recettori. Nel sangue periferico, fino al 5% delle cellule sono simultaneamente etichettati come CD4 e CD8.Una leggera espressione di CD4 è possibile su alcune cellule di monociti. CD4 è espresso in maggior parte dei casi, il linfoma delle cellule T, tra cui micosi fungoide, e in leucemia a cellule T HTLV-associato( HTLV - T-lymphotropic virus umano - T-lim fotropny virus umano).
■ CD5 - catena singola glicoproteina che è presente in tutti maturi linfociti T e la maggioranza dei timociti, è debolmente espressa da linfociti B.Il CD5 viene rilevato su cellule neoplastiche della leucemia linfatica cronica a cellule B e del linfoma centrocitico. In altri tipi di malattie linfoidi maligne - linfoma follicolare, leucemia a cellule capellute, linfoma a grandi cellule - CD5 non è espresso.
■ CD7 è una proteina a filamento singolo, il primo marker della differenziazione delle cellule T.È espresso dai linfociti pro-T ancora prima che migrino verso il timo. Il CD7 viene rilevato sulla maggior parte delle cellule NK, l'espressione debole viene annotata sui monociti. I linfociti B e i granulociti non contengono questo Ag. La definizione di CD7 è utilizzata per la diagnosi di linfomi, leucemia linfoblastica a cellule T da bambini.
■ CD8 è una proteina costituita da due catene polipeptidiche collegate da ponti disolfuro.È espresso da una sottopopolazione di linfociti T citotossici e soppressori, che comprendono il 20-35% dei linfociti del sangue periferico. Questo Ar hanno anche cellule NK, timociti corticali, il 30% midollare thymocyte-ING e sottopopolazione di cellule del midollo osseo. CD8 è stato testato per quantificare il contenuto dei soppressori di T
■ CD 10 - associato alla membrana cellulare dell'endopeptidasi. CD10 esprime forme giovani di linfociti B e una sottopopolazione di linfociti corticali. CD10 esprime tutte le celle di ALL.
■ esprimono CD11c sulla membrana cellulare di macrofagi, monociti, granulociti, cellule NK e leucemia a cellule capellute.
■ CD13 - glicoproteina espressa dalle cellule serie mielomonotsitar-leg( cellule progenitrici, neutrofili, basofili, eosina-phylum, monociti e cellule di leucemia mieloide).È assente nei linfociti T., negli eritrociti e nelle piastrine.
■ CD14 - glicoproteina di membrana superficiale.È espresso principalmente da monociti e macrofagi. Il CD14 è determinato da oltre il 95% dei monociti del sangue periferico e del midollo osseo su
.Forte espressione di CD14 è stata osservata nella leucemia mieloblastica acuta. Nella leucemia linfoblastica acuta e cronica, questa Ar non è espressa.
■ CD15 è un oligosaccaride. Prende parte ai processi di fagocitosi e chemiotassi. Questa Ar è presente sulla superficie dei granulociti maturi e delle cellule di Berezovsky-Sternberg. Espressione di Ar CD15 viene rilevato nella malattia di Hodgkin. Nel non-Hodgkin's lim-fomas, CD15 non viene rilevato nella maggior parte dei casi.
■ CD16 è espresso sulla superficie di granulociti, monociti, macrofagi e cellule NK.Tutti i linfociti che esprimono questa Ar sono capaci di citotossicità cellulare anticorpo-dipendente. CD16 è determinato quando si digitano leucemie mielocitiche croniche, per caratterizzare le cellule NK.
■ Il CD 19 è una glicoproteina presente su tutti i linfociti B periferici e su tutti i precursori delle cellule B.È assente nelle plasmacellule. Questo è il primo marker delle cellule B, svolge un ruolo importante nella regolazione dell'attivazione e della proliferazione dei linfociti B.Il CD19 è espresso su tutte le cellule neoplastiche della leucemia acuta di origine delle cellule B ed è presente anche in alcune forme di leucemia acuta monoblastica.
■ CD20 è una proteina non glicosilata. Nell'ontogenesi dei linfociti B, Ar CD20 appare dopo CD19 nella fase di differenziazione pre-B-cellulare dei linfociti.È assente sulla membrana plasmatica delle plasmacellule. Espresso in tutti, cellule B leucemia linfatica cronica, leucemia a cellule capellute, Burkitt Lim fomah e molto raro - monoblastny leucemia acuta.
■ CD21 - glicoproteina, in un numero significativo presente sul linfociti B in organi linfoidi e in piccole quantità - su cellule B di sangue periferico. CD21 è un recettore per il virus Epna-Stein-Barr.
■ CD22 è una proteina costituita da due catene polipeptidiche.È espresso sulla membrana della maggior parte dei linfociti B, comprese le cellule progenitrici( prolinfociti).Ar non è espresso sui linfociti B( plasmacellule) dopo la loro attivazione. L'espressione più pronunciata di CD22 sulle cellule rilevate a leucemia volosatokle-esatta, debole - con leucemia mieloide e non-T ALL kletoch-zione.
■ CD23 è una glicoproteina espressa dai linfociti B attivati del sangue periferico in misura molto maggiore. CD23 media citotossicità IgE-dipendente e fagocitosi da macrofagi ed eosinofili.
■ CD25 è una glicoproteina a catena singola identificata come recettore a bassa affinità per IL-2.Questo recettore è espresso su linfociti T attivati e, a una densità inferiore, su cellule B attivate. Nel sangue periferico di persone sane, l'Ar è presente in più del 5% delle cellule linfoidi.
■ CD29 - Recettore della fibronectina.È ampiamente distribuito nei tessuti, è espresso dai leucociti. Determinazione di cellule CD29 nel sangue peri
fericheskoy utilizzati per digitare un sottoinsieme di T-adesivo corrente avente il fenotipo di cellule CD4 + CD29 +, sono chiamati helper di tipo 2( Th2).Queste cellule, attraverso la produzione di linfochine, partecipano alla realizzazione della risposta immunitaria umorale.
■ CD33 - glicoproteina transmembrana.È presente sulla superficie delle cellule della serie mieloide e monocitica. Si trova sulla superficie dei monociti e, in misura minore, dei granulociti di sangue periferico. Circa il 30% delle cellule del midollo osseo rosso esprimono CD33, inclusi mieloblasti, promielociti e mielociti. L'ar è assente sulle membrane delle cellule staminali pluripotenti. CD33 è usato per caratterizzare le cellule nelle leucemie mieloidi. Le cellule leucemiche di origine linfoide ed eritroide non esprimono CD33.
■ CD34 - phosphoglycoprotein, espresso in cellule progenitrici ematopoietiche, comprese le cellule staminali monopotentnye. L'espressione più pronunciata di Ar è osservata nei progenitori precoci;quando le cellule maturano, l'espressione del marcatore cade. Il CD34 si trova anche sulle cellule endoteliali. CD34 è usato per caratterizzare le cellule in leucemia mieloide e linfocitica acuta. Con la leucemia linfatica cronica e l'espressione lim-phoma, Ar CD34 non viene rilevato.
■ CD41a è espresso da piastrine e megacariociti. Gli anticorpi monoclonali per la rilevazione di CD41a sono usati per diagnosticare la leucemia megacarioblastica. Con Glązmann trombastenia, l'espressione di questa Ar è assente o significativamente soppressa.
■ CD42b è una glicoproteina di membrana costituita da due catene di polipeptidi. Il marcatore si trova sulla superficie delle piastrine e dei megacariociti. Nella pratica clinica di rilevamento CD42b per uso diagnostico thrombocytopathy - sindrome di Bernard-Soulier.
■ CD45RA appartiene alla classe delle glicoproteine transmembrana. Questo è un leucocita comune. Espresso sulla membrana cellulare dei linfociti B, in misura minore, linfociti T e timociti midollari mature. Il marcatore non è espresso dai granulociti.
■ CD45RО - isoforma a basso peso molecolare CD45RA - leucocita comune Ag. Identificare la cellula T( cellule T di memoria) sottopopolazioni di linfociti B, monociti e macrofagi. Gli anticorpi monoclonali di interagire con la maggior CD45RO thymocyte sottopopolazione di riposo CD4 + e CD8 + linfociti T maturi e cellule T attivate. Cellule di origine mielomonocitica, granulociti e monociti portano anche questa Ag. Viene rilevato con linfomi prenatali e immunoblastici.
■ CD46 - Dimero O-glicosilato. E 'ampiamente distribuita nei tessuti ed espresso T e B linfociti, monociti, gra-nulotsitami cellule NK, piastrine, cellule endoteliali, fibroblasti, ma è assente sulla superficie degli eritrociti. CD46 fornisce protezione tissutale dall'azione del complemento.
■ CD61 - piastrinica Ag. E 'espresso sulle piastrine, sangue periferico e nel midollo osseo, così come sul megacariociti minuti e megacarioblasti. La sua definizione è usata come marchio di
ra per la leucemia acuta megacarioblastica. L'espressione di Ar è assente o soppressa in pazienti con trombastenia di Glanzmann.
■ CD95, noto anche come Fas o APO-1, - koprotein Gly-transmembrana, membro della famiglia dei recettori del fattore di necrosi tumorale.È espressa in quantità significative dei linfociti T( CD4 + e CD8 +) sangue periferico e, in misura minore, B-linfociti e cellule NK.Questa Ar è anche espressa su granulociti, monociti, cellule tissutali e cellule neoplastiche. Il legame del CD95 con il ligando Fas( CD95L) induce l'apoptosi nelle cellule.
■ CD95L o Fas-ligando, una proteina di membrana che appartiene alla famiglia di recettori del fattore di necrosi tumorale. Questa Ag è espressa da linfociti T citotossici, cellule NK e molto spesso cellule tumorali;l'induttore principale dell'apoptosi nelle cellule.
■ HLA-DR - monomorfa classe II molecole MHC determinanti uomo( HLA).Etsya marcatore è espresso su cellule di Langerhans, cellule dendritiche di organi linfoidi e certi tipi di macrofagi, linfociti B, cellule T attivate e cellule epiteliali timo. Studiare marker attivo utilizzato per quantificare i linfociti T attivati con un fenotipo CD3 + HLA-DR +.
utilizzando diversi anticorpi monoclonali per il marcatore di selezione può creare cella ritratto caratteristica fenotipica di questa forma di leucemia( tabella A-7-30).
Oltre a utilizzare tecniche Immunofenotipizzazione per la diagnosi e diagnosi differenziale delle neoplasie ematologiche, particolarmente importante rivolto la loro utilizzazione nel processo di trattamento per valutare lo stato di remissione e frazione residua di cellule leucemiche. Conoscendo il "ritratto" fenotipica di blasti nel periodo della diagnosi, per questi marcatori che riesce a trovare cellule clone leucemiche in remissione, e dall'aumento del loro numero - per predire lo sviluppo di ricaduta a lungo( per 1-4 mesi) fino a quando i suoi tratti clinici e morfologici.
Tabella caratterizzazione immunofenotipica di leucemia [Myers A. R., 1996]
Tabella caratterizzazione immunofenotipica di leucemia [Myers A. R., 1996]
Tabella immunofenotipo ALL [Rich R. R., 2001]
Tabella immunofenotipo ALL [Rich R. R., 2001]
Tabella di estremità.
Fine della tabella.
Nota
: catena Cig q - citoplasmatica di Ig;sig q è una superficie Ig e una catena.