womensecr.com
  • Reaksi berantai polimer

    click fraud protection

    PCR adalah pencapaian baru dalam genetika molekuler, yang digunakan untuk amplifikasi DNA dan memungkinkan perluasan cepat wilayah DNA

    spesifik( yaitu gen yang diminati) secara in vitro lebih dari 200.000 kali. Untuk melakukan reaksinya, cukup untuk memiliki bahan DNA satu sel;jumlah DNA yang diperkuat oleh PCR begitu besar sehingga DNA ini hanya dapat diwarnai( menggunakan probe radioaktif setelah elektroforesis tidak diperlukan).Prasyarat untuk melakukan PCR adalah pengetahuan tentang urutan nukleotida dari daerah DNA yang diperkuat untuk pemilihan primer artifisial yang benar.

    Saat ini, PCR adalah proses yang berlangsung dalam satu tabung dan terdiri dari siklus pengulangan amplifikasi( duplikasi, penyalinan) dari urutan molekul DNA yang terdahulu untuk mendapatkan sejumlah salinan yang cukup besar yang dapat diidentifikasi dengan elektroforesis. Salah satu komponen kunci dari reaksinya adalah "primer" - oligonukleotida sintetis, yang terdiri dari 20-30 basa, saling melengkapi "situs"( bagian) anil( lampiran) pada lokasi DNA template yang teridentifikasi.

    instagram viewer

    PCR berjalan secara otomatis dalam termostat yang dapat diprogram - thermocycler( thermocycler).Siklus tiga langkah, yang menghasilkan replika bagian DNA template yang dapat diidentifikasi, diulang 30-50 kali sesuai dengan program preset pengendara termal. Pada siklus pertama, oligopramer melakukan hibridisasi dengan DNA template asli, dan kemudian( dalam siklus berikutnya) dan molekul DNA yang baru disintesis saat mereka menumpuk dalam campuran reaksi. Dalam kasus terakhir, sintesis DNA berakhir bukan karena perubahan pada rezim suhu, namun setelah mencapai batas DNA polimerase dari daerah yang diperkuat, yang menentukan ukuran daerah DNA yang baru disintesis menjadi satu nukleotida.

    Sebagai metode untuk mendeteksi molekul DNA yang diperoleh, elektroforesis digunakan, dengan cara bahan amplifikasi dibagi sesuai dengan ukuran amplikon( produk amplifikasi).

    Dengan bantuan PCR, adalah mungkin untuk secara langsung menyelidiki situs lokalisasi dugaan mutasi atau situs polimorfik, dan juga untuk mempelajari adanya fitur spesifik DNA lainnya.