Investigasi enzim dan isoenzim

adalah protein spesifik yang memenuhi peran katalis biologis dalam tubuh. Enzim terkandung di semua sel tubuh, di mana konsentrasinya jauh lebih tinggi daripada di plasma darah.

serum darah, komposisi enzim yang relatif konstan, paling sering digunakan sebagai objek penelitian. Aktivitas normal enzim dalam serum mencerminkan hubungan antara biosintesis dan pelepasan enzim( dengan pembaharuan sel yang biasa), serta pembersihannya dari aliran darah. Peningkatan laju pembaharuan enzim, kerusakan pada sel biasanya menyebabkan peningkatan aktivitas enzim dalam serum. Dalam serum darah, tiga kelompok enzim dibedakan: seluler, sekretori dan ekskretoris.

Enzim sel dibagi menjadi dua kelompok tergantung pada lokalisasi di jaringan:

■ enzim non-spesifik yang mengkatalisis reaksi pertukaran yang umum terjadi pada semua jaringan dan ditemukan di sebagian besar organ dan jaringan;

■ enzim spesifik organ atau indikator yang spesifik hanya untuk jenis jaringan tertentu.

Aktivitas serum enzim seluler rendah atau tidak ada sama sekali. Dalam proses patologis, aktivitas enzim kelompok ini dalam serum tergantung pada laju pelepasan dari sel, yang pada gilirannya ditentukan oleh tingkat dan tingkat kerusakannya. Enzim sekresi

( ceruloplasmin, pseudocholinesterase, lipoprotein lipase) langsung ke plasma darah dan lakukan fungsi spesifik di dalamnya. Enzim ini disintesis di hati dan terus dilepaskan ke dalam plasma. Aktivitas mereka dalam serum lebih tinggi daripada sel atau jaringan. Dalam praktek klinis, mereka menarik ketika aktivitas mereka dalam serum darah menjadi lebih rendah dari biasanya karena gangguan fungsi hati.

Enzim ekskretoris dibentuk oleh sistem pencernaan( pankreas, mukosa usus, hati, endothelium saluran empedu).Ini termasuk amilase, lipase, alkali fosfatase, dll. Biasanya aktivitas serum mereka rendah dan konstan. Namun, pada patologi, bila ada jalur ekskresi yang biasa diblokir, aktivitas enzim ini dalam serum meningkat secara signifikan.

Aktivitas enzim yang diukur dapat disebabkan oleh adanya sifat yang sangat dekat namun bentuk enzim molekulernya sedikit berbeda. Berbagai bentuk ini disebut isoenzim. Investigasi isoenzim dalam praktik klinis menarik saat isoenzim individu terbentuk di jaringan yang berbeda( misalnya, di hati dan hati, berbagai isoenzim LDH mendominasi).

Untuk kuantifikasi aktivitas enzim, Komisi Enzim dari Uni Biokimia Internasional merekomendasikan unit internasional standar( IU).Unit aktivitas enzim apapun diambil sebagai jumlahnya, yang dalam kondisi optimal mengkatalisis konversi 1 μmol substrat per menit( μmol / menit).

Aktivitas enzim dinilai berdasarkan laju reaksi katalis pada suhu dan pH medium tertentu, konsentrasi substrat. Oleh karena itu, saat menentukan aktivitas enzim, kondisi yang sama harus benar-benar diperhatikan.

Reaksi enzimatik peka terhadap perubahan suhu. Biasanya dilakukan pada suhu di dalam kisaran

25-40 ° C, namun pada suhu yang berbeda, pH optimum, buffer, substrat dan parameter lainnya berbeda. Aktivitas maksimum sebagian besar enzim dalam tubuh manusia diamati pada suhu sekitar 37 ° C.Oleh karena itu, untuk tujuan standardisasi internasional, pengukuran aktivitas enzim dilakukan pada suhu tertentu. Di bawah nilai normal aktivitas enzim diberikan untuk suhu 37 ° C.

Investigasi enzim digunakan dalam praktik klinis untuk mengatasi berbagai masalah: diagnosis, diagnosis banding, penilaian perjalanan penyakit, penentuan keefektifan terapi, tingkat pemulihan dan prognosis penyakit. Tiga jenis perubahan enzim diketahui dalam kasus patologi: hyperferment-mia - aktivitas enzim meningkat dibandingkan dengan norma, hypo-fermentasi - penurunannya, disfermentasi - munculnya enzim dalam darah, biasanya tidak terdeteksi.