Istraživanje enzima i izoenzima
Enzimi su specifični proteini koji ispunjavaju ulogu bioloških katalizatora u tijelu. Enzimi su sadržani u svim stanicama tijela, gdje je njihova koncentracija puno veća nego u krvnoj plazmi. Serum
krvi, čiji je enzimski sastav relativno konstantan, najčešće se koristi kao objekt za istraživanje. Normalno aktivnost enzima u serumu odražava odnos između biosinteze i oslobađanje enzima( u normalnom ažuriranju stanica), te njihovo uklanjanje iz krvi. Povećanje stope obnove enzima, oštećenje stanica obično dovodi do povećanja aktivnosti enzima u serumu. U serumu krvi razlikuju se tri skupine enzima: stanični, sekretorni i ekskretori.
stanični enzimi, ovisno o lokaciji u tkivu podijeljene u dvije skupine:
■ nespecifični enzime koji kataliziraju zajedničko svim tkivima razmjenu reakcije te su u većini organa i tkiva;
■ organski specifični ili indikatorski enzimi specifični za specifičnu vrstu tkiva.
Serumska aktivnost staničnih enzima je niska ili nepostojeća. U patološkim procesima, aktivnost enzima ove skupine u serumu ovisi o brzini otpuštanja iz stanica, što se pak određuje brzinom i stupnjem njihovog oštećenja.
sekretorne enzimi( ceruloplazmin, Pseudokolinesteraza, lipoproteina-lipaze proteinske polimere) ući izravno u krvnoj plazmi i obavljanje specifičnih funkcija u njemu. Ovi enzimi se sintetiziraju u jetri i stalno se oslobađaju u plazmu. Njihova aktivnost u serumu je viša nego u stanicama ili tkivima. U kliničkoj praksi oni su od interesa kada njihova aktivnost u krvnom serumu postane niža od normalne zbog smanjene funkcije jetre. Nastali sekrecijske
enzima probavnih organa( gušterača, crijevne sluznice, jetre, endotel žučnog sustava).To uključuje a-amilazu, lipazu, alkalnu fosfatazu, itd. Uobičajeno, njihova je serumska aktivnost niska i konstantna. Međutim, u patologiji, kada je blokiran bilo koji od uobičajenih puteva izlučivanja, aktivnost ovih enzima u serumu se značajno povećava.
Mjerena aktivnost enzima može biti posljedica vrlo sličnih molekularnih svojstava enzima, koji su vrlo slični u svojstvima, ali se međusobno razlikuju. Ti se različiti oblici zovu isoenzimi. Studija izoenzimi u kliničkoj praksi je od interesa, nastaje kada pojedinačni izoenzima u različitim tkivima( npr različiti LDH izoenzima prevladavaju u srcu i jetri).
Za kvantifikaciju enzimske aktivnosti Komisija za enzime Međunarodne biokemijske unije preporučila je standardnu međunarodnu jedinicu( IU).Jedna jedinica aktivnosti enzima bilo uzimanje količina koja pod optimalnim uvjetima katalizira konverziju 1 mikromol supstrata u minuti( pmol / min).
Aktivnost enzima procjenjuje se brzinom katalitičke reakcije pri određenoj temperaturi i pH medija, koncentraciji supstrata. Stoga, pri određivanju aktivnosti enzima, moraju se strogo poštivati iste uvjete.
Enzimatska reakcija je osjetljiva na promjene temperature. Obično se radi na temperaturi unutar
raspona od 25-40 ° C, ali na različitim temperaturama, optimalni pH, pufer, supstrat i drugi parametri su različiti. Maksimalna aktivnost većine enzima u ljudskom tijelu promatrana je na temperaturi od oko 37 ° C.Stoga, kako bi međunarodnoj mjerenje standardizacije enzimske aktivnosti obavlja na toj temperaturi. Ispod normalnih vrijednosti enzimske aktivnosti dan je temperatura od 37 ° CStudija
enzimi koji se koriste u kliničkoj praksi za razne namjene: dijagnoza, diferencijalna dijagnoza, procjene dinamike bolesti, određivanje učinkovitosti terapije, oporavka stupnja i prognozu. Postoje tri vrste enzima promjena patologije: giperfermente Mia - povećana aktivnost enzima nego što je normalno, hipo-enzim sadržaja - njegov pad disfermentemiya - u izgledu krvnih enzima koji se obično nije pronađen.