Lančana reakcija polimeraze u dijagnostici zaraznih bolesti

PCR - jedan od načina za DNA dijagnostiku dopuštajući za povećanje broja kopija detektabilnim dijela genoma( DNA) bakterija ili virusa je milijun puta pomoću enzima DNK polimeraze. Test za taj određeni genomski segment nukleinske kiseline uzastopno se množi( pojačanog) koja omogućuje njegovu identifikaciju. Prvo, molekula DNA bakterija ili virusa zagrijavanjem podijeljen u dva lanca, a zatim u prisutnosti sintetizirane DNA klica( sekvencom nukleotida specifičnih definiranom genomske) ih veže s komplementarnim proteže DNA, sintetiziran je drugi lanac nukleinske kiseline, nakon svake klice u prisutnosti termostabline DNA polimeraze, Dobivene su dvije DNA molekule. Proces se ponavlja mnogo puta. Za dijagnozu je dovoljna jedna molekula DNA, tj. Jedna bakterija ili virusna čestica. Reakciju dodatni korak - sinteze DNA na RNA molekule pomoću enzima reverzne transkriptaze - je ostavljena da se testirati RNK virusa kao što je HCV virus. PCR - procesa u tri stupnja, ponavljanje ciklusa denaturacije, žarenje početnica, sinteza DNA( polimerizacije).Sintezirana količina DNA je identificirana pomoću ELISA ili elektroforezom.

PCR se može koristiti različite biološkog materijala - seruma ili krvne plazme, struganje uretre, biopsije, pleuralni tekućine, cerebrospinalna tekućina, itdPrvi PCR je korištena za dijagnosticiranje zaraznih bolesti, kao što su HBV, HCV, HBV, CMV infekcije, spolno prenosiva bolest infektivna( gonoreje, smeće diynaya, miko plazme ureaplasmal infekcije), tuberkuloza, HIV-a i tako dalje.d.

PCR prednost u dijagnostici infektivnih bolesti odnosu na druge metode ispitivanja je slijedeći: ■

infektivni agens može se otkriti u bilo kojem okruženju biološkom organizmu, uključujući one materijale dobivene biopsijom;

■ Dijagnoza zaraznih bolesti u najranijim stadijima bolesti;■

moguće kvantitativna procjena rezultata istraživanja( kao virusa ili bakterije koji se nalazi u materijalu);

■ visoka osjetljivost metode;npr osjetljivost za otkrivanje PCR HBV virusnu DNA u krvi je 0,001 pg / ml( oko 4h102 kopija / ml), dok je osjetljivost metode DNA hibridizacijom, uporabom proba razgranate - 2,1 pg / ml( oko 7h105 kopija / ml),