Détection du virus de l'hépatite C
HCV dans le matériel est normalement absent.
Contrairement aux méthodes de diagnostic sérologique VHC où détecter les anticorps au VHC, la PCR permet de détecter la présence d'ARN du VHC et directement quantifier sa concentration dans le materi d'essai
le. Le test a une spécificité spécifique et une sensibilité élevée: dix molécules d'ARN du VHC dans le matériel d'essai sont suffisantes pour sa détection. La détection des anticorps anti-VHC confirme que le fait de l'infection du patient, mais ne donne pas une indication d'une infection active( le virus pour la réplication) et le pronostic de la maladie. En outre, des anticorps dirigés contre le VHC détectés dans le sang des patients atteints d'hépatite aiguë et chronique, ainsi que chez les patients qui sont malades et récupéré, et souvent l'AT dans le sang apparaissent quelques mois après l'apparition de la maladie clinique, ce qui rend difficile à diagnostiquer. La détection du VHC dans le sang par PCR est une méthode diagnostique plus informative. La détection de l'ARN du VHC en PCR témoigne d'une virémie, permet de juger de la réplication du virus dans l'organisme et constitue l'un des critères d'efficacité de la thérapie antivirale. La détection de l'ARN du VHC par PCR dans les premiers stades du développement d'une infection virale dans le contexte de l'absence totale de tout marqueur sérologique peut constituer la première preuve d'infection. Cependant, la détection isolée de l'ARN du VHC dans le contexte de l'absence totale de tout autre marqueur sérologique ne peut pas complètement éliminer le résultat faux positif de la PCR.Dans de tels cas, une évaluation complète des études cliniques, biochimiques et morphologiques est nécessaire, avec une confirmation répétée et répétée de la présence d'une infection par PCR.L'algorithme pour diagnostiquer le VHC en utilisant la méthode PCR est montré sur la Fig.
L'utilisation de la méthode PCR chez les patients atteints de VHC chronique est d'une grande importance, car la majorité d'entre eux ne corrèle pas entre la présence de la réplication virale et l'activité des enzymes hépatiques. Dans de tels cas, seule la PCR permet de juger de la présence de la réplication virale, surtout si le résultat final est exprimé quantitativement. Dans la plupart des cas, la disparition de l'ARN du VHC du sérum sanguin survient plus tard que la normalisation des enzymes hépatiques, de sorte que leur normalisation ne peut pas servir de base pour l'arrêt du traitement antiviral.
Il est pratiquement important pour la détection de l'ARN du VHC d'étudier la méthode PCR non seulement avec le sérum, mais aussi avec les lymphocytes et l'hépatobiobaptam. Les virus peuvent être détectés 2-3 fois plus souvent dans le tissu hépatique que dans le sérum. Lors de l'évaluation des résultats de l'étude du sérum sanguin pour l'ARN du VHC, il faut se rappeler que la virémie peut être de nature fluctuante( comme le changement de l'activité enzymatique).Par conséquent, après des résultats positifs de l'étude PCR, un résultat négatif peut être obtenu et vice versa. Dans de tels cas, pour résoudre les doutes qui se posent, il est préférable d'enquêter sur les hépatobiobathes.
La détection de l'ARN du VHC dans un matériel utilisant la PCR est utilisée aux fins suivantes:
■ résolution des résultats discutables des études sérologiques;
■ différenciation du VHC d'autres formes d'hépatite;
■ détection du stade aigu de la maladie par rapport à l'infection ou au contact transféré;le stade de l'infection des nouveau-nés par les mères séropositives pour le VHC;
■ surveiller l'efficacité du traitement antiviral.
Toutes les caractéristiques ci-dessus de l'évaluation des résultats et des approches du diagnostic du VHC par PCR sont pertinentes pour d'autres infections.
La méthode PCR permet non seulement de détecter l'ARN du VHC dans le matériel d'essai, mais aussi d'établir son génotype. La détermination du génotype du virus est d'une grande importance pour la sélection des patients atteints de VHC chronique dans le traitement de l'interféron-alpha et de la ribavirine. Les indications de laboratoire pour le traitement de l'interféron alfa chronique du VHC sont les suivantes:
■ augmentation de l'activité des transaminases;
■ présence d'ARN du VHC dans le sang;
■ génotype 1 VHC;
■ forte virémie dans le sang( plus de 8x105 copies / ml).
Il est maintenant possible de déterminer quantitativement la teneur en ARN du VHC dans le sérum sanguin par PCR, ce qui est très important pour la prise en charge du traitement par l'interféron alpha. Le taux de virémie est évalué comme suit: pour l'ARN du VHC de 102 à 104 copies / ml - faible;de 105 à 107 copies / ml - moyen, supérieur à 108 copies / ml - élevé.Avec un traitement efficace, le niveau de virémie diminue.