Immunophénotypage des hémoblastoses
Des progrès significatifs dans les études hématologiques associées au cours des dernières années avec l'utilisation des méthodes immunologiques modernes et des outils automatisés pour l'analyse et le tri des cellules de sang périphérique et de moelle osseuse - cytomètre de flux.morphologique et étude cytochimique traditionnelle de la maladie cellulaire du substrat( sang, moelle osseuse, les ganglions lymphatiques, la rate, etc.), dans de nombreux cas, en particulier dans les maladies lymphoprolifératifs, ne révèlent pas toute la variété d'options parmi les formes semblables morphologiquement et d'identifier l'origine du clone pathologique. Ces problèmes ne peuvent être résolus qu'en étudiant les caractéristiques immunologiques des cellules. Chaque stade de différenciation des cellules hémo-poétiques correspond à son propre ensemble d'Ar, qui, selon la classification internationale, s'appelle différenciation et est divisé en grappes de différenciation, notées CD.A la différenciation des blocs de modifications néoplasiques peut se produire à tout stade du développement normal des cellules, résultant en un clone de cellule pathologique définissant la maladie de substrat et ayant la même immunologique( ou phénotypique) caractéristique. Après une étude de ces marqueurs dans les cellules peut être déterminé par toute forme ou mode de réalisation de la maladie sont compatibles, à savoir sur la base du diagnostic différentiel de phénotype cellulaire immunologique, ce qui est le plus difficile dans les troubles lymphoprolifératifs, parce que les principales maladies pathologiques de substrat cellulaire sont presque le même type de cellules morphologiquement. Le phénotypage permet d'utiliser des anticorps monoclonaux caractérisés cellules sanguines myéloïdes matures et blastiques, les mono-, série lymphoïde en présence de différenciation-payé-Ar( récepteurs) dans la paroi cellulaire. Sur les membranes des cellules sanguines et de la moelle osseuse rouge, les Ar( marqueurs) suivants peuvent être identifiés.
■ CD2 est une glycoprotéine transmembranaire monomère. Il est présent à la surface de tous les lymphocytes T circulants et de certains lymphocytes NK.Le CD2 participe au processus d'activation alternative des lymphocytes T.La détection de CD2 en utilisant des anticorps monoclonaux dans la pratique clinique est utilisée pour le phénotype des leucémies à cellules T aiguës, des lymphomes, des états inflammatoires chroniques et immunodéficients.
■ CD3 - un complexe protéique associé au récepteur des lymphocytes T spécifique à Ar, c'est le principal marqueur fonctionnel des lymphocytes T.Il facilite la transmission du signal d'activation de la membrane
au cytoplasme de la cellule. La détection de CD3 est indiquée pour le diagnostic de la leucémie aiguë à lymphocytes T, du lymphome( CD3 n'est pas exprimé dans les tumeurs lymphoïdes non-T) et des maladies d'immunodéficience.
■ Le CD4 est une glycoprotéine transmembranaire exprimée par une sous-population de lymphocytes T auxiliaires( inducteurs) constituant 45% des lymphocytes du sang périphérique. Dans les premiers stades du développement lymphocytaire dans le thymus, Ar CD4, ainsi que CD8, est exprimé par tous les lymphocytes corticaux. Les thymocytes médullaires, dont le phénotype est similaire aux cellules T CD4 + matures du sang périphérique( T-helpers), expriment les récepteurs CD4 ou CD8.Dans le sang périphérique, jusqu'à 5% des cellules sont marquées simultanément CD4 et CD8.Une légère expression de CD4 est possible sur certaines cellules monocytes. CD4 est exprimé dans la plupart des cas, le lymphome des lymphocytes T, y compris mycose fongoïde, et dans la leucémie des lymphocytes T associée HTLV( HTLV - virus T-lymphotrope humain - T virus humain lim-fotropny).
■ CD5 - une glycoprotéine monocaténaire présente sur tous les lymphocytes T matures et la plupart des thymocytes, est faiblement exprimée par les lymphocytes B.CD5 est détecté sur les cellules néoplasiques de la leucémie lymphocytaire chronique à cellules B et du lymphome centrocytaire. Dans d'autres types de maladies lymphoïdes malignes - lymphome folliculaire, leucémie à tricholeucocytes, lymphome à grandes cellules - CD5 n'est pas exprimé.
■ CD7 est une protéine monocaténaire, le marqueur le plus précoce de la différenciation des lymphocytes T.Il est exprimé par les lymphocytes pro-T avant même qu'ils migrent vers le thymus. CD7 est détecté sur la plupart des cellules NK, une faible expression est notée sur les monocytes. Les lymphocytes B et les granulocytes ne contiennent pas cet Ag. La définition de CD7 est utilisée pour le diagnostic des lymphomes, la leucémie lymphoblastique à cellules T chez l'enfant.
■ CD8 est une protéine constituée de deux chaînes polypeptidiques reliées par des ponts disulfure. Elle est exprimée par une sous-population de lymphocytes T cytotoxiques et suppresseurs, qui comprennent 20 à 35% de lymphocytes du sang périphérique. Cet Ar possède également des lymphocytes NK, des thymocytes corticaux, 30% des thymocytes médullaires et une sous-population de cellules de moelle osseuse rouge. CD8 a été testé pour quantifier le contenu des suppresseurs de T
■ CD 10 - associé à la membrane cellulaire de l'endopeptidase. CD10 exprime de jeunes formes de lymphocytes B et une sous-population de lymphocytes corticaux. CD10 exprime toutes les cellules de ALL.
■ CD11c exprime les macrophages, les monocytes, les granulocytes, les cellules NK et les cellules de la leucémie à tricholeucocytes sur la membrane cellulaire.
■ CD13 - glycoprotéine exprimé par les cellules en série jambe mielomonotsitar( cellules progénitrices, les neutrophiles, les basophiles, l'éosine-phylum, les monocytes et les cellules de leucémie myéloïde).Il est absent des lymphocytes B, des érythrocytes et des plaquettes.
■ CD14 - glycoprotéine membranaire de surface. Il est exprimé principalement par les monocytes et les macrophages. CD14 est déterminé par plus de 95% des monocytes du sang périphérique et de la moelle osseuse sur
.Une forte expression de CD14 est observée dans la leucémie myéloblastique aiguë.Dans la leucémie lymphoblastique aiguë et chronique, cet Ar n'est pas exprimé.
■ CD15 est un oligosaccharide. Il participe aux processus de phagocytose et de chimiotaxie. Cet Ar est présent à la surface des granulocytes matures et des cellules de Berezovsky-Sternberg. L'expression de Ar CD15 est détectée dans la maladie de Hodgkin. Dans les limfomes non hodgkiniens, le CD15 n'est pas détecté dans la plupart des cas.
■ CD16 est exprimé à la surface des granulocytes, des monocytes, des macrophages et des cellules NK.Tous les lymphocytes exprimant cet Ar sont capables de cytotoxicité cellulaire dépendante des anticorps. CD16 est déterminée lors de la typage des leucémies myélocytaires chroniques, pour caractériser les cellules NK.
■ CD 19 est une glycoprotéine présente sur tous les lymphocytes B périphériques, ainsi que sur tous les précurseurs des cellules B.Il est absent sur les cellules plasmatiques. C'est le premier marqueur des cellules B, joue un rôle important dans la régulation de l'activation et de la prolifération des lymphocytes B.CD19 est exprimé sur toutes les cellules néoplasiques de leucémie aiguë d'origine B, et est également présent dans certaines formes de leucémie aiguë monoblaste.
■ CD20 est une protéine non glycosylée. Dans l'ontogenèse des lymphocytes B, Ar CD20 apparaît après CD19 au stade de la différenciation pré-B des lymphocytes. Il est absent sur la membrane plasmique des plasmocytes. Elle est exprimée dans ALL, leucémie lymphoïde chronique à cellules B, leucémie à tricholeucocytes, lymphome de Burkitt et très rarement dans la leucémie monoblastique aiguë.
■ CD21 est une glycoprotéine, en quantité significative présente sur les lymphocytes B dans les organes lymphoïdes et en faible quantité sur les lymphocytes B du sang périphérique. CD21 est un récepteur du virus Epna-Stein-Barr.
■ CD22 est une protéine constituée de deux chaînes polypeptidiques. Il est exprimé sur la membrane de la plupart des lymphocytes B, y compris les cellules progénitrices( prolymphocytes).Ar n'est pas exprimé sur les lymphocytes B( plasmocytes) après leur activation. L'expression la plus prononcée de CD22 est détectée sur des cellules présentant une leucémie folliculaire pileuse, une leucémie myéloïde faible et une LAL non lymphocytaire.
■ CD23 est une glycoprotéine exprimée par des B-limfocytes activés du sang périphérique dans une mesure beaucoup plus grande. CD23 médie la cytotoxicité IgE-dépendante et la phagocytose par les macrophages et les éosinophiles.
■ CD25 est une glycoprotéine monocaténaire identifiée comme récepteur de faible affinité pour l'IL-2.Ce récepteur est exprimé sur les lymphocytes T activés et, à plus faible densité, sur les lymphocytes B activés. Dans le sang périphérique de personnes en bonne santé, Ar est présent dans plus de 5% des cellules lymphoïdes.
■ CD29 - Récepteur de la fibronectine. Il est largement distribué dans les tissus, il est exprimé par les leucocytes. La détermination de CD29 sur des cellules Perida
de sang ferrique est utilisée pour caractériser une sous-population de lymphocytes T ayant un phénotype CD4 + CD29 +, appelée type 2 auxiliaire( Th2).Ces cellules, à travers la production de lymphokines, participent à la réalisation de la réponse immunitaire humorale.
■ CD33 - glycoprotéine transmembranaire. Il est présent à la surface des cellules de la série myéloïde et monocytaire. On le trouve à la surface des monocytes et, dans une moindre mesure, des granulocytes du sang périphérique. Environ 30% des cellules de la moelle osseuse rouge expriment le CD33, y compris les myéloblastes, les promyélocytes et les myélocytes. Ar est absent sur les membranes des cellules souches pluripotentes. CD33 est utilisé pour caractériser les cellules dans les leucémies myéloïdes. Les cellules leucémiques d'origine lymphoïde et érythroïde n'expriment pas CD33.
■ CD34 - phosphoglycoprotéine, exprimé dans les cellules souches hématopoïétiques, y compris les cellules souches monopotentnye. L'expression la plus prononcée de Ar est observée chez les progéniteurs précoces;lorsque les cellules mûrissent, l'expression du marqueur tombe. CD34 est également trouvé sur les cellules endothéliales. CD34 est utilisé pour caractériser les cellules dans la leucémie aiguë myéloïde et lymphocytaire. Avec la leucémie lymphocytaire chronique et l'expression de lim-phoma, Ar CD34 n'est pas détecté.
■ CD41a est exprimé par les plaquettes et les mégacaryocytes. Les anticorps monoclonaux pour la détection de CD41a sont utilisés pour diagnostiquer la leucémie mégacaryoblastique. Avec la thrombasthénie de Glązmann, l'expression de cet Ar est absente ou significativement supprimée.
■ CD42b est une glycoprotéine membranaire constituée de deux chaînes polypeptidiques. Le marqueur se trouve à la surface des plaquettes et des mégacaryocytes. En pratique clinique, la détection de CD42b est utilisée pour diagnostiquer la thrombocytopathie - syndrome de Bernard-Soulier.
■ CD45RA appartient à la classe des glycoprotéines transmembranaires. Ceci est un leu leucocyte commun. Exprimé sur la membrane cellulaire des lymphocytes B dans une moindre mesure les lymphocytes T et les thymocytes médullaires matures. Le marqueur n'est pas exprimé par les granulocytes.
■ CD45RO - isoforme de faible poids moléculaire de CD45RA - leucocytaire totale Ag. Identifier la cellule T( cellules T mémoires) des sous-populations de lymphocytes B, les monocytes et les macrophages. Les anticorps monoclonaux d'interagir avec la plupart CD45RO sous-population thymocytes de repos CD4 + et CD8 + lymphocytes T matures et cellules T activées. Les cellules d'origine myélomonocytaire, les granulocytes et les monocytes portent également cet Ag. Il est détecté avec des lymphomes prénataux et immunoblastiques.
■ CD46 - Dimère O-glycosylé.Il est largement distribué dans les tissus et exprimé T- et lymphocytes B, les monocytes, GRA-nulotsitami cellules NK, les plaquettes, les cellules endothéliales, les fibroblastes, mais est absent sur la surface des globules rouges. CD46 assure la protection des tissus contre l'action du complément.
■ CD61 - plaquette Ag. Il est exprimé sur les plaquettes, le sang périphérique et de moelle osseuse, ainsi que sur la mégacaryocytes minutes et mégacaryoblastes. Sa définition est utilisée comme une marque de
ra pour la leucémie aiguë mégacaryoblastique. L'expression de Ar est absente ou supprimée chez les patients atteints de thrombasténie de Glanzmann.
■ CD95, également connu sous le nom de Fas ou APO-1, - koprotein Gly-transmembranaire, membre de la famille des récepteurs du facteur de nécrose tumorale. Il est exprimé en des quantités significatives dans les lymphocytes T( CD4 + et CD8 + du sang périphérique) et, dans une moindre mesure, les lymphocytes B et les cellules NK.Cet Ar est également exprimé sur les granulocytes, les monocytes, les cellules tissulaires et les cellules néoplasiques. La liaison de CD95 au ligand Fas( CD95L) induit une apoptose dans les cellules.
■ CD95L ou le ligand Fas, une protéine membranaire appartenant à la famille des récepteurs du facteur de nécrose tumorale. Cet Ag est exprimé par des lymphocytes T cytotoxiques, des cellules NK et très souvent des cellules tumorales;l'inducteur principal de l'apoptose dans les cellules.■
HLA-DR - molécules de classe II déterminant monomorphe homme du CMH( HLA).Etsya marqueur est exprimé sur les cellules de Langerhans, les cellules dendritiques des organes lymphoïdes, et certains types de macrophages, les lymphocytes B, les cellules T activées et les cellules épithéliales thymiques.Étudier marqueur actif utilisé pour quantifier les lymphocytes T activés avec un phénotype CD3 + HLA-DR +.
en utilisant différents anticorps monoclonaux dirigés contre le marqueur de sélection peut créer caractéristique phénotypique de cellules de portrait de cette forme de leucémie( tableau A-30.07).
Outre l'utilisation des techniques d'immunophénotypage pour le diagnostic et le diagnostic différentiel des tumeurs malignes hématologiques, se particulièrement important de leur utilisation dans le processus de traitement pour évaluer l'état de rémission et la population résiduelle de cellules leucémiques. Connaissant le « portrait » phénotypiques des cellules blastiques dans la période de diagnostic, à ces marqueurs, il peut trouver clone leucémique de cellules en rémission, et de l'augmentation de leur nombre - de prédire le développement de la rechute à long( pour 1-4 mois) jusqu'à ce que ses traits cliniques et morphologiques.
Tableau Caractérisation immunophénotypique de la leucémie [Myers A. R., 1996]
Tableau Caractérisation immunophénotypique de la leucémie [Myers A. R., 1996]
Tableau immunophénotypage ALL [Rich R. R., 2001]
Tableau immunophénotypage ALL [Rich R. R., 2001]
End Table.
Fin de la table.
Note: cig q - chaîne cytoplasmique Ig c;sig q est une Ig de surface et une chaîne.