Hemoblastooside immunofenotüpiseerimine

oluline edasiminek hematoloogilise uuringud seotud viimastel aastatel kasutada kaasaegseid immunoloogiliste meetodite ja automatiseeritud tööriistad analüüsimiseks ja sorteerimine rakud perifeerse vere ja luuüdi - voolutsütomeetrid. Traditsioonilised morfoloogilised ja tsütokemikaalseks uuring substraadile raku haiguse( veri, punane luuüdi, lümfisõlmed, põrn jne), mis paljudel juhtudel, eriti lümfoproliferatiivsest haigused, ei avalda kogu valikuvõimalusi seas morfoloogiliselt sarnased vormid ja päritolu tuvastamiseks patoloogiliseks kloon. Neid probleeme saab lahendada vaid uurides rakkude immunoloogilisi omadusi. Iga etapi eristamine hemodialüüsi poeetiline raku on oma komplekt Ar, milles kutsuti rahvusvahelise klassifikatsiooni diferentseerumise ja diferentseerumise jagunevad klastrite määratud CD.Blokis diferentseerumise kasvajaliste muutused võivad esineda mis tahes etapis normaalse raku arengu tulemusena patoloogilise rakuklooni määratledes substraati ravimiseks ja millel sama immunoloogilised( või fenotüübiline) omadus. Pärast uuringut nende markerite rakkudes võib määrata mis tahes vormis või teostuses haiguse on järjepidevad, st tuginedes immunoloogiline rakufenotüübi diferentsiaaldiagnoosimist, mis on kõige raskem lümfoproliferatiivsete häirete sest peamine rakusubstraadist patoloogiliste haigused on peaaegu sama tüüpi rakkudes morfoloogiliselt. Fenotüpiseerimine lahtrisse monoklonaalsete antikehade abil iseloomustab blastiline küpse müeloidse vererakud, mono-, lümfotsüütiline seeria juuresolekul diferentseerumist tasulise Ar( retseptoritega) rakuseina. Vere- ja punase luuümbrise membraanidel saab tuvastada järgmisi Ar( markereid).

■ CD2 on monomeerne transmembraanne glükoproteiin. See esineb kõigi ringlevate T-lümfotsüütide ja mõnede NK-lümfotsüütide pinnal. CD2 osaleb T-lümfotsüütide alternatiivse aktiveerimise protsessis. Detection via CD2 monokloonseid antikehi kasutatakse kliinilises praktikas Fenaughty pidu--äge T-raku leukeemia, lümfoom, krooniline põletikuline ja immuunpuudulikkuse tingimustel.

■ CD3 - valgukompleksiga seostatakse Ag-spetsiifilised T-raku retseptori, on peamine funktsionaalse markeri T-lümfotsüütidest. See hõlbustab aktiveerimisignaali edastamist

membraanist rakkude tsütoplasmasse. Määramine CD3 näidustatud diagnoos äge T-rakuline leukeemia, lümfoomide( CD3 ei avaldunud mitte-T-rakkude lümfoidkasvajate) ja immuunpuudulikkuse haigus-mine.

■ CD4 - transmembraanse glükoproteiini väljendatud alagrupis T abistaja( induktiivpoolid) moodustava 45% perifeerse vere lümfotsüütides. Algjärgus lümfotsüütide arengu tüümuses, Az CD4, samuti CD8 väljendatuna kõik ajukoore lümfotsüüdid. Medullaarsed tümotsüütides, mis on sarnane fenotüüp küpse CD4 + perifeerse vere T-rakud( abistaja T-rakud), ekspressiooni-ruyut olla kas CD4 või CD8 retseptoreid. Perifeerses veres märgistatakse kuni 5% rakkudest samaaegselt CD4 ja CD8-ga. Mõnel monotsüütide rakul on võimalik CD4-i kerge ekspressioon. CD4 väljendatakse enamasti T-rakuline lümfoom, sealhulgas seentõve ja HTLV-seotud T-raku leukeemia( HTLV - inimese T-lümfotroopse viirusega - T lim-fotropny inimese viirus).

■ CD5 - üheahelaline glükoproteiin, mis esineb kõigis küps T-lümfotsüütide ja enamus tümotsüütides, on nõrgalt väljendatud B-lümfotsüüdid. CD5 tuvastasime neoplastsetel B rakud liimiga täpsustamiseks krooniline lümfoidne leukeemia ja lümfoom tsentrotsitarnoy. Teistes tüüpi pahaloomuliste lümfoidse haigused - follikulaarse lümfoomi karvarakkleukeemia, suurrakklümpfoom - CD5 ei väljendata.

■ CD7 on üheahelaline valk, mis on varem T-rakkude diferentseerumise marker. Seda ekspresseeritakse pro-T-lümfotsüütide poolt enne, kui nad migreeruvad harknääre. CD7 avastatakse enamikes NK-rakkudes, monotsüütidele on täheldatud nõrka ekspressiooni. B-lümfotsüüdid ja granulotsüüdid ei sisalda seda Ag-d. CD7 määratlust kasutatakse lümfoomide, laste T-rakulise lümfoblastilise leukeemia diagnoosimiseks.

■ CD8 on proteiin, mis koosneb kahest disulfiidsildadega ühendatud polüpeptiidahelatest. Seda väljendatakse subpopulatsiooni Qi totoksicheskih ja summutajat T-lümfotsüüdid, mis moodustavad 20-35% perifeerse vere lümfotsüütides. See Ar ka NK-rakud, ajukoore tümotsüütides, 30% medullaarsed thymocyte-mine ja alampopulatsioonist luuüdi rakke. CD8-d testiti, et kvantifitseerida

T-supressorite sisu

■ CD 10 - seotud endopeptidaasi rakumembraaniga. CD10 väljendab B-lümfotsüütide ja kortikaalsete lümfotsüütide alampopulatsiooni noorvorme. CD10 ekspresseerivad kõiki ALL-i rakke.

■ rakulise membraaniga CD11c ekspressioon makrofaagid, monotsüüdid, granulotsüüdid, NK-rakud ja karvrakulise leukeemia rakud.

■ CD13 - glükoproteiin rakkudes ekspresseeritud mielomonotsitar-jala seeria( eellasrakud, neutrofiilid, basofiile, eosiiniga-hõimkond, monotsüüdid ja rakkude müeloidse leukeemia).T. B-lümfotsüütides, erütrotsüütides ja trombotsüütides puudub see.

■ CD14 - pinnamembraani glükoproteiin. Seda väljendavad peamiselt monotsüüdid ja makrofaagid. CD14 määratakse

-ga üle 95% perifeersest verest ja luuüdi monotsüütidest. Akuutse müeloblastilise leukeemiaga täheldatakse CD14 tugevat ekspressiooni.Ägeda ja kroonilise lümfoblastilise leukeemia korral ei avaldata seda Ar.

■ CD15 on oligosahhariid. Ta osaleb fagotsütoosi ja kemotaksise protsessis. See Ar asub küpsete granulotsüütide ja Berezovski-Sternbergi rakkude pinnal. Hodgkini tõvega tuvastatakse Ar CD15 ekspressioon. Mitte-Hodgkini limfoomides ei leidu CD15 enamikul juhtudel.

■ CD16 väljendub granulotsüütide, monotsüütide, makrofaagide ja NK-rakkude pinnal. Kõik selle Ar ekspresseerivad lümfotsüüdid on võimelised antikehast sõltuva raku tsütotoksilisuse tõttu. CD16 määratakse, kirjutades kroonilise müelotsüütilise leukeemia, et iseloomustada NK-rakke.

■ CD19 on glükoproteiin, mis esineb kõigil perifeersetes B-lümfotsüütides, samuti kõigil B-rakkude prekursoritel. See puudub plasmaprakkudes. See on kõige varem B-rakkude marker, mis mängib olulist rolli B-lümfotsüütide aktiveerimise ja proliferatsiooni reguleerimisel. CD19 ekspresseeritakse kõigi B-rakulise päritoluga ägeda leukeemia neoplastilistes rakkudes ja esineb ka mõnes ägeda monoblasti leukeemia vormis.

■ CD20 on mitteglükosüülitud valk. B-lümfotsüüdi ontogeny Ar CD20 CD19 ilmub pärast etappi pre-B-raku erinevus-tsirovki lümfotsüüdid. See puudub plasmarakkude plasmamembraanil. Väljendatud ALL, B-rakuline krooniline lümfoidne leukeemia, karvarakkleukeemia, Burkitt Lim fomah ja väga harvadel - äge leukeemia monoblastny.

■ CD21 - glükoproteiin, et märkimisväärsel arvul esindatud B-lümfotsüüdid lümfoidorganites ning väikestes kogustes - B-rakkudel perifeerse vere. CD21 on Epna-Stein-Barri viiruse retseptor.

■ CD22 on valk, mis koosneb kahest polüpeptiidahelast. Seda ekspresseeritakse enamiku B-lümfotsüütide, sealhulgas eellasrakkude( prolümfotsüütide) membraanis. Ar ei ekspresseeritud B-lümfotsüütidel( plasmarakud) pärast nende aktiveerimist. CD22 kõige väljendunud ekspressioon tuvastatakse rakkudele, millel on karvanääpsuga täpne leukeemia, nõrk - müeloidsete leukeemiate ja mitte-T-rakkude ALL.

■ CD23 on glükoproteiin, mida väljendatakse perifeerse vere aktiveeritud B-lümfotsüütidega palju suuremas ulatuses. CD23 vahendab IgE-sõltuvat tsütotoksilisust ja fagotsütoosi makrofaagide ja eosinofiilide poolt.

■ CD25 on üheahelaline glükoproteiin, mis identifitseeritakse kui IL-2 madala afiinsusega retseptor. Seda retseptorit ekspresseeritakse aktiveeritud T-lümfotsüütidel ja väiksema tihedusega aktiveeritud B-rakkudel. Terved inimeste perifeerses veres on Ar enam kui 5% lümfoidrakkudest.

■ CD29 - fibronektiini retseptor. Kudedes on see laialt levinud, seda väljendab leukotsüüte. Määramine CD29 rakkude peri

fericheskoy vere kasutatakse kirjutades alagrupis T-liimiga praeguse millel fenotüübile CD4 + CD29 +, nimetatakse abistaja 2. tüüpi( Th2).Need rakud lümfokiinide tootmise kaudu osalevad humoraalse immuunvastuse realiseerimises.

■ CD33 - transmembraanne glükoproteiin. See esineb müeloidsete ja monotsüütide seeriate rakkude pinnal. Seda leitakse monotsüütide pinnal ja vähemal määral perifeerse vere granulotsüütidel. Ligikaudu 30% punastest luuüdi rakkudest ekspresseerivad CD33-d, sealhulgas müeloblaste, promüelotsüüte ja müelotsüüte. Ar pole polüpotentsete tüvirakkude membraanidel. CD33-d kasutatakse rakkude iseloomustamiseks müeloidsete leukeemiate korral. Lümfoidse ja erütroidi päritoluga leukeemia rakud ei ekspresseeri CD33-d.

■ CD34 - phosphoglycoprotein väljendatuna vereloome eellasrakkude, sealhulgas tüvirakkude monopotentnye. Esimeste eellasrakkude puhul esineb kõige arenenumat Ar avaldust;kui rakud küpsevad, langeb markeri ekspressioon. CD34 leidub ka endoteelirakkudes. CD34-d kasutatakse akuutse müelogeense ja lümfotsütaarse leukeemia rakkude iseloomustamiseks. Kroonilise lümfotsütaarse leukeemia ja limfoma ekspressiooniga ei leita Ar CD34.

■ CD41a väljendub trombotsüütide ja megakarüotsüütide poolt. Megakarüoblastiliste leukeemiate diagnoosimiseks kasutatakse monoklonaalseid antikehi CD41a tuvastamiseks. Glązmanni trombasthenia korral puudub selle Ar ekspressioon või see on oluliselt summutatud.

■ CD42b on membraani glükoproteiin, mis koosneb kahest polüpeptiidahelast. Marker paikneb trombotsüütide ja megakarüotsüütide pinnal. Kliinilises praktikas CD42b avastamis- diagnostiliseks kasutamiseks thrombocytopathy - sündroom, Bernard-Soulierin.

■ CD45RA kuulub transmembraansete glükoproteiinide klassi. See on tavaline leukotsüütide Ag. Väljendatud rakumembraani B-lümfotsüüdid vähemal määral T-lümfotsüütide ja küpse medullaarsed tümotsüütides. Markerit ei ekspresseeri granulotsüüdid.

■ CD45RО - madala molekulmassiga isovorm CD45RA - leukotsüütide üldine Ag. Kindlaks T-rakkude( mälu T-rakud) alampopulatsioonidele B lümfotsüüdid, monotsüüdid ja makrofaagid. Monokloonsed antikehad suhelda Kõige CD45RO thymocyte subpopulatsiooni puhkavate CD4 + ja CD8 + T-lümfotsüütide ja küps aktiveeritud T-rakud. Sellel Agil on ka müelomonotsüütide päritolu rakud, granulotsüüdid ja monotsüüdid. See avastati prenataalsete ja immunoblastlike lümfoomidega.

■ CD46 - O-glükosüülitud dimeer. See on laialt levinud kudedes ja väljendati T- ja B-lümfotsüüdid, monotsüüdid, gra-nulotsitami NK-rakud, vereliistakud, endoteelirakkude, fibroblastid, kuid puudub pinnal erütrotsüütidega. CD46 pakub koe kaitset täiendava toime eest.

■ CD61 - trombotsüütide Ag. Seda väljendatakse trombotsüütidel, perifeerse vere ja luuüdi, samuti Euroopa megakarüotsüüthü hetke ja megakaryoblasts. Selle definitsiooni kasutatakse

ra märgiks ägeda megakarüoblastilise leukeemia tekkeks. Glanzmanni trombastaniast tingitud patsientidel ei esine Ar-ekspressiooni.

■ CD95, mida tuntakse ka Fas või APO-1; - Gly-transmembraanse koprotein, perekonnaliige tuumorinekroosifaktori retseptoreid. Seda väljendatakse märkimisväärses koguses T-lümfotsüüte( CD4 + ja CD8 +) perifeerses veres ning vähemal määral ka B-lümfotsüüdid ja NK-rakud. See Ar on ekspresseeritud ka granulotsüütidel, monotsüütidel, koerakkudel ja neoplastilistes rakkudes. CD95 seondumine Fas-ligandiga( CD95L) indutseerib rakkudes apoptoosi.

■ CD95L või Fas-ligand, membraanivalk sugukonnast tuumorinekroositeguri retseptoreid. Seda Ag ekspresseerivad tsüto-toksilised T-lümfotsüüdid, NK-rakud ja väga sageli kasvajarakud;rakkude apoptoosi peamine indutseerija.

■ HLA-DR - monomorfseid II klassi määraja molekulide MHC meest( HLA).Etsya marker ekspresseerub Langerhansi rakud, dendriitrakud ja lümfoidelundites, ja teatud tüüpi makrofaagid, B-lümfotsüüdid, aktiveeritud T-rakud ja harknääre epiteelirakke. Uuring aktiivse marker kasutatud kvantifitseerida aktiveeritud T-lümfotsüüdid fenotüüpi CD3 + HLA-DR +.

kasutades erinevaid monoklonaalsed antikehad Selektsioonimarkeriks saab luua portree raku fenotüübilise tunnuse käesoleva leukeemia vorm( tabel A-7-30).

Pealegi lehe immunofenotüüpimine tehnikaid diagnoosiks ja eristusdiagnoosiks hematoloogiliste pahaloomuliste kasvajate, eriti tähtis välja nende kasutamist raviprotsessi hinnata seisundi paranemise ja järelejäänud populatsioon leukeemiarakkudesse. Teades fenotüübilise "portrait" kohta blastrakud ajavahemikul diagnoosi, et nende markerite ta suudab leida raku leukomeelisi kloonist vähendamine ning sellest, et suureneb nende arv - arenemise ennustamiseks retsidiivide pikk( 1-4 kuud), kuni selle kliiniliste ja morfoloogilised tunnused.

Tabel immunofenotüpiseerimise iseloomustamine leukeemia [Myers A. R., 1996]

Tabel immunofenotüpiseerimise iseloomustamine leukeemia [Myers A. R., 1996]

Tabel immuunfenotüübi ALL [Rich R. R., 2001]

Tabel immuunfenotüübi ALL [Rich R. R., 2001]

End Tabel.

tabeli lõpp.

Märkus: cig q - tsütoplasmaalne Ig c ahel;sig q on pind Ig ja ahel.