Undersøgelse af enzymer og isoenzymer
Enzymer er specifikke proteiner, der opfylder rollen som biologiske katalysatorer i kroppen. Enzymer er indeholdt i alle celler i kroppen, hvor deres koncentration er meget højere end i blodplasmaet. Serum
af blod, hvis enzymkomposition er relativt konstant, anvendes oftest som et objekt til forskning. Normal aktivitet af enzymer i serum afspejler forholdet mellem biosyntese og frigivelse af enzymer( med den sædvanlige cellefornyelse) samt deres clearance fra blodbanen. En stigning i fornyelsen af enzymer, forårsager skade på celler normalt en stigning i enzymernes aktivitet i serum. I blodets serum skelnes der tre grupper af enzymer: cellulær, sekretorisk og udskillelse.
cellulære enzymer afhængigt af placeringen i vævet delt i to grupper:
■ ikke-specifikke enzymer, der katalyserer fælles for alle væv udveksle reaktioner og er i de fleste organer og væv;
■ organspecifikke eller indikatorzymer, der er specifikke for en specifik vævstype.
Serumaktivitet af cellulære enzymer er lav eller ikke-eksisterende. I patologiske processer afhænger aktiviteten af enzymerne i denne gruppe i serum af frigivelseshastigheden fra cellerne, som igen bestemmes af hastigheden og graden af deres skade.
sekretoriske enzymer( ceruloplasmin, pseudocholinesterase, lipopro-lipase protein polymerer) direkte ind blodplasma og udføre specifikke funktioner deri. Disse enzymer syntetiseres i leveren og frigives konstant i plasma. Deres aktivitet i serum er højere end i celler eller væv. I klinisk praksis er de af interesse, når deres aktivitet i blodserumet bliver lavere end normalt på grund af nedsat leverfunktion.
Excretory enzymer dannes af fordøjelsessystemet( bugspytkirtlen, tarmslimhinden, leveren, endotelet af galdekanaler).Disse omfatter a-amylase, lipase, alkalisk phosphatase etc. Normalt er deres serumaktivitet lav og konstant. I patologi, når nogen af de sædvanlige udskillelsesveje er blokeret, øges aktiviteten af disse enzymer i serum signifikant.
Den målte aktivitet af enzymer kan skyldes tilstedeværelsen af meget lignende molekylære egenskaber af enzymer, der er meget ens i egenskaber, men adskiller sig fra hinanden. Disse forskellige former kaldes isoenzymer. Undersøgelse isoenzymer i klinisk praksis, er af interesse, der dannes, når individuelle isoenzymer i forskellige væv( for eksempel forskellige LDH isozymer dominerer i hjertet og leveren).
For kvantificering af enzymaktivitet anbefalede Kommissionen for enzymer fra den internationale biokemiske union en standard international enhed( IU).Aktivitetsenheden af et hvilket som helst enzym tages som dets mængde, som under optimale betingelser katalyserer omdannelsen af 1 μmol substrat pr. Minut( μmol / min).
Enzymens aktivitet vurderes ved hastigheden af katalyseret reaktion ved en bestemt temperatur og mediumets pH, substratets koncentration. Derfor skal de samme betingelser nøje overholdes, når enzymets aktivitet bestemmes.
Den enzymatiske reaktion er følsom for temperaturændringer. Det gøres normalt ved en temperatur inden for
-området på 25-40 ° C, men ved forskellige temperaturer er den optimale pH, buffer, substrat og andre parametre forskellige. Den maksimale aktivitet af de fleste enzymer i menneskekroppen observeres ved en temperatur på ca. 37 ° C.Med henblik på international standardisering udføres enzymaktivitetsmålinger ved en given temperatur. Nedenfor gives de normale værdier af enzymaktiviteten til en temperatur på 37 ° C.Undersøgelse
enzymer, der anvendes i klinisk praksis til forskellige opgaver: diagnose, differentiel diagnose, vurdering af dynamikken i sygdommen, bestemme effektiviteten af behandling, nyttiggørelse grad og prognosen. Der er tre typer af enzymer ændringer i patologi: giperfermente - MIA øgede aktivitet af enzymer end normalt, hypo-enzymindhold - dens fald disfermentemiya - i udseendet af blod enzymer, der ikke normalt findes.