Immunofenotyping af hæmoblastoser

betydelige fremskridt med hæmatologiske undersøgelser forbundet i de seneste år med anvendelsen af ​​moderne immunologiske metoder og automatiserede værktøjer til analyse og sortering celler fra perifert blod og knoglemarv - flowcytometre. Traditionelle morfologiske og cytokemiske undersøgelse af substratet celle sygdom( blod, røde knoglemarv, lymfeknuder, milt, etc.), i mange tilfælde, især i lymfoproliferative sygdomme, ikke afslører hele række indstillinger blandt morfologisk lignende former og identificere oprindelsen af ​​den patologiske klon. Disse problemer kan kun løses ved at studere de immunologiske egenskaber ved celler. Hver fase af differentiering hemo-poetisk celle har sit eget sæt af Ar, der opfordrede det internationale klassifikation af differentiering og differentiering er opdelt i klynger, der er udpeget cd. Ved blok differentiering af neoplastiske forandringer kan forekomme på ethvert stadium af normal celleudvikling, hvilket resulterer i en patologisk celleklon afgrænser substrat sygdom, og som har den samme immunologiske( eller fænotypisk) karakteristik. Efter en undersøgelse af disse markører i celler kan bestemmes ved enhver form eller udformning af sygdommen er konsistente, dvs. på grundlag af immunologisk cellefænotype differentialdiagnose, som er den mest vanskelige i lymfoproliferative lidelser, fordi de vigtigste celle substrat patologiske sygdomme er næsten den samme type celler morfologisk. Fænotypebestemmelse tillader anvendelse af monoklonale antistoffer præget blastiske og modne myeloide blodlegemer, mono-, lymfocytisk serie i nærvær af differentieringsspecifikke betalt-Ar( receptorer) i cellevæggen. På membranerne af blodlegemer og rød knoglemarv kan følgende Ar( markører) identificeres.

■ CD2 er et monomert transmembran glycoprotein. Det er til stede på overfladen af ​​alle cirkulerende T-lymfocytter og nogle NK-lymfocytter. CD2 deltager i processen med alternativ aktivering af T-lymfocytter. Detektion via CD2 monoklonale antistoffer anvendt i klinisk praksis til Fenaughty fest-akut T-celle leukæmi, lymfom, kronisk inflammatoriske og immundefekt tilstande.

■ CD3 - proteinkompleks associeret med Ag-specifik T-celle-receptor, er den vigtigste funktionelle markør for T-lymfocytter. Det letter transmissionen af ​​aktiveringssignalet fra

-membranen til cytoplasmaet i cellen. Bestemmelse af CD3 indiceret til diagnosticering af akut T-celle leukæmi, lymfomer( CD3 ikke udtrykkes i ikke-T-celle lymfoidneoplasmer) og immundefektsygdom-tion.

■ CD4 - transmembrane glycoprotein udtrykkes af en undergruppe af T-hjælper( spoler) udgør 45% af perifere blodlymfocytter. I de tidlige stadier af lymfocytudvikling i thymus, Az af CD4, samt af CD8, udtrykt alle kortikale lymfocytter. Medullære thymocytter, der svarer til fænotypen af ​​modne CD4 + perifere blod T-celler( hjælper-T-celler), ekspression-ruyut har enten CD4 eller CD8 receptorer. I perifert blod mærkes op til 5% af cellerne samtidigt CD4 og CD8.Lille ekspression af CD4 er mulig på nogle monocytceller. CD4 udtrykkes i de fleste tilfælde, T-cellelymfom, herunder mycosis fungoides, og i HTLV-associeret T-celle-leukæmi( HTLV - human T-lymfotropisk virus - T lim-fotropny human virus).

■ CD5 - enkeltkædet glycoprotein, som er til stede på alle modne T-lymfocytter og hovedparten af ​​thymocyter, er svagt udtrykt af B-lymfocytter. CD5 påvist på neoplastiske B-celler selvklæbende forfine kronisk lymfatisk leukæmi og lymfom tsentrotsitarnoy. I andre typer af maligne lymfesygdomme - follikulært lymfom, hårcelleleukæmi, storcellet lymfom - CD5 ikke udtrykkes.

■ CD7 er et enkeltstrenget protein, den tidligste markør for T-celledifferentiering. Det udtrykkes af pro-T-lymfocytter, selv før de migrerer til thymus. CD7 detekteres på de fleste NK-celler, svag ekspression er noteret på monocytter. B-lymfocytter og granulocytter indeholder ikke denne Ag. Definitionen af ​​CD7 anvendes til diagnose af lymfomer, børns T-celle lymfoblastisk leukæmi.

■ CD8 er et protein bestående af to polypeptidkæder bundet af disulfidbroer. Det udtrykkes subpopulation Qi totoksicheskih og suppressor-T-lymfocytter, som udgør 20-35% af perifere blodlymfocytter. Denne Ar har også NK-celler, corticale thymocytter, 30% medullært thymocyt-ing og subpopulation af knoglemarvsceller. CD8 blev testet for at kvantificere indholdet af

T-suppressorer

■ CD 10 - associeret med cellemembranen af ​​endopeptidase. CD10 udtrykker unge former for B-lymfocytter og en subpopulation af cortical lymfocytter. CD10 udtrykker alle celler af ALL.

■ CD11c-ekspressionsmakrofager, monocytter, granulocytter, NK-celler og celler af hårcelled leukæmi på cellemembranen.

■ CD13 er et glycoprotein udtrykt af myelomonocytiske celler( stamceller, neutrofiler, basofiler, eosinofiler, monocytter og myeloid leukæmiceller).Det er fraværende i T. B-lymfocytter, erythrocytter og blodplader.

■ CD14 - overflade membran glycoprotein. Det udtrykkes hovedsageligt af monocytter og makrofager. CD14 bestemmes af mere end 95% af perifert blod og knoglemarvmonocytter på

.Stærkt ekspression af CD14 observeres ved akut myeloblastisk leukæmi. Ved akut og kronisk lymfoblastisk leukæmi er denne Ar ikke udtrykt.

■ CD15 er et oligosaccharid. Han deltager i phagocytose og kemotaksis processer. Denne Ar er til stede på overfladen af ​​modne granulocytter og Berezovsky-Sternberg-celler. Ekspression af Ar CD15 detekteres i Hodgkins sygdom. I ikke-Hodgkins limfomier er CD15 ikke påvist i de fleste tilfælde.

■ CD16 udtrykkes på overfladen af ​​granulocytter, monocytter, makrofager og NK-celler. Alle lymfocytter, der udtrykker dette Ar, er i stand til antistofafhængig cellulær cytotoksicitet. CD16 bestemmes ved indtastning af kroniske myelocytiske leukæmier for at karakterisere NK-celler.

■ CD 19 er et glycoprotein til stede på alle perifere B-lymfocytter såvel som på alle B-celleprecursorer. Det er fraværende på plasmaceller. Dette er den tidligste markør for B-celler, spiller en vigtig rolle i regulering af aktivering og proliferation af B-lymfocytter. CD19 udtrykkes på alle neoplastiske celler af akut leukæmi af B-celle oprindelse, og er også til stede i nogle former for akut monoblast leukæmi.

■ CD20 er et ikke-glycosyleret protein. I ontogenese af B-lymfocytter forekommer Ar CD20 efter CD19 i scenen af ​​præ-B-celledifferentiering af lymfocytter. Det er fraværende på plasmamembranen af ​​plasmaceller. Det er udtrykt i ALLE, B-celle kronisk lymfocytisk leukæmi, hårig celle leukæmi, Burkitt lymfom og meget sjældent i akut monoblastisk leukæmi.

■ CD21 er et glycoprotein, i en betydelig mængde er til stede på B-lymfocytter i lymfoide organer og i en lille mængde på B-celler i perifert blod. CD21 er en receptor til Epna-Stein-Barr-virus.

■ CD22 er et protein bestående af to polypeptidkæder. Det udtrykkes på membranen af ​​de fleste B-lymfocytter, herunder progenitorceller( prolymphocytter).Ar udtrykkes ikke på B-lymfocytter( plasmaceller) efter deres aktivering. Det mest udtalte udtryk for CD22 detekteres på celler med hårfollikel-nøjagtig leukæmi, svag - i myeloid leukæmier og ikke-T-celle ALL.

■ CD23 er et glycoprotein udtrykt af aktiverede B-limfocytter af perifert blod i langt større grad. CD23 medierer IgE-afhængig cytotoksicitet og fagocytose af makrofager og eosinofiler.

■ CD25 er et enkeltkædet glycoprotein identificeret som en lav affinitetsreceptor for IL-2.Denne receptor udtrykkes på aktiverede T-lymfocytter og ved en lavere densitet på aktiverede B-celler. I det perifere blod hos raske mennesker er Ar til stede i mere end 5% af lymfoide celler.

■ CD29 - Fibronectin receptor. Det er bredt fordelt i væv, det udtrykkes af leukocytter. Bestemmelsen af ​​CD29 på Perida

-celler af ferrisk blod anvendes til at typificere en T-celle-subpopulation med en CD4 + CD29 + -fænotype, kaldet hjælper type 2( Th2).Disse celler, gennem produktion af lymfokiner, deltager i realiseringen af ​​det humorale immunrespons.

■ CD33 - transmembran glycoprotein. Det er til stede på overfladen af ​​celler i den myeloid og monocytiske serie. Det findes på overfladen af ​​monocytter og i mindre grad granulocytter af perifert blod. Ca. 30% af røde knoglemarvsceller udtrykker CD33, herunder myeloblaster, promyelocytter og myelocytter. Ar er fraværende på membraner af polypotente stamceller. CD33 bruges til at karakterisere celler i myeloid leukæmier. Leukæmiceller af lymfoid og erythroid oprindelse udtrykker ikke CD33.

■ CD34 - phosphoglycoprotein, udtrykt i hæmatopoietiske progenitorceller, herunder stamceller monopotentnye. Det mest udtalte udtryk for Ar ses i tidlige forfædre;når cellerne modnes, falder markørens udtryk. CD34 findes også på endotelceller. CD34 bruges til at karakterisere celler i akut myelogen og lymfocytisk leukæmi. Kronisk lymfatisk leukæmi og Lim-fomah Ag CD34-ekspression ikke detekteres.

■ CD41a udtrykkes af blodplader og megakaryocytter. Monokel-funktionelle-CD41a-antistoffer til påvisning til diagnostisk anvendelse Me-gakarioblastnogo leukæmi. I dette udtryk thrombasthenia Glyantsmanna Ag fraværende eller stærkt undertrykt.

■ CD42b - en membran glycoprotein sammensat af to polypeptidkæder. Markøren findes på overfladen af ​​blodplader og megakaryocytter. I klinisk praksis CD42b påvisning til diagnostisk anvendelse thrombocytopathy - syndrom, Bernard-Soulier.

■ CD45RA tilhører klassen af ​​transmembran glycoproteiner. Dette er en almindelig leukocyt Ag. Udtrykt på cellemembranen af ​​B-lymfocytter i mindre grad T-lymfocytter og modne medullær thymocytter. Markøren udtrykkes ikke af granulocytter.

■ CD45RO - lavmolekylær isoform af CD45RA - samlede leukocyt Ag. Identificere T-cellen( memory-T-celler) subpopulationer af B-lymfocytter, monocytter og makrofager. Monoklonale antistoffer til at interagere med de fleste CD45RO thymocyt subpopulation af hvilende CD4 + og CD8 + T-lymfocytter og modne aktiverede T-celler. Myelomonocytleukæmi celler oprindelsescertifikater, granulocytter og monocytter også bære Ag. Det detekteres med prænatale og immunoblastiske lymfomer.

■ CD46-O-glycosyleret dimer. Det er vidt udbredt i væv og udtrykt T- og B-lymfocytter, monocytter, gra-nulotsitami NK-celler, blodplader, endotelceller, fibroblaster, men er fraværende på overfladen af ​​erytrocytter. CD46 giver vævsbeskyttelse mod komplement-virkning.

■ CD61 - blodplade Ag. Det er udtrykt på blodplader, perifert blod og knoglemarv, samt på megakaryocyt minutters og megakaryoblaster. Dens definition anvendes som marko

ra med akut megakaryoblastisk leukæmi. Udtryk af Ar er fraværende eller undertrykt hos patienter med Glanzmann thrombastenia.

■ CD95, også kendt som Fas eller APO-1, - Gly-transmembran koprotein, et familiemedlem af tumornekrosefaktor-receptorer. Det udtrykkes i signifikante mængder i T-lymfocytter( CD4 + og CD8 +) perifert blod og, i mindre grad, B-lymfocytter og NK-celler. Denne Ar udtrykkes også på granulocytter, monocytter, vævsceller og neoplastiske celler. CD95 binding til Fas-ligand( CD95L), inducerer apoptose i celler.

■ CD95L, eller Fas-ligand, en membran protein, som tilhører familien af ​​tumornekrosefaktor-receptorer. Dette udtrykkes Ar cyto-toksiske T-lymfocytter, NK-celler og tumorceller meget ofte;den vigtigste inducer for apoptose i celler.

■ HLA-DR - monomorfe klasse II determinant molekyler MHC mand( HLA).Etsya markør udtrykkes på Langerhanske celler, dendritiske celler fra lymfeorganer, og visse typer makrofager, B-lymfocytter, aktiverede T-celler og thymus epitelceller. Undersøgelse aktiv markør til kvantificering af aktiverede T-lymfocytter med en fænotype CD3 + HLA-DR +.

anvendelse af forskellige monoklonale antistoffer til selektionsmarkøren kan skabe portræt celle fænotypisk karakteristisk for denne form for leukæmi( tabel A-7-30).

Udover at bruge immunofænotypebestemmelse teknikker til diagnose og differentialdiagnose af hæmatologiske maligniteter, særligt vigtigt vendte deres anvendelse i behandlingsprocessen at vurdere tilstanden af ​​remission og resterende population af leukæmiceller. Kendskab til den fænotypiske "portræt" af blastceller i perioden diagnose, til disse markører den kan finde celle leukæmiske klon i remission, og af stigningen i deres antal - at forudsige udviklingen af ​​tilbagefald lang( for 1-4 måneder), indtil dens kliniske og morfologiske træk.

Tabel immunfænotypisk karakterisering af leukæmi [Myers A. R., 1996]

Table immunfænotypisk karakterisering af leukæmi [Myers A. R., 1996]

Table immunfænotype ALL [Rich R. R. 2001]

Table immunfænotype ALL [Rich R. R. 2001]

End Table.

Slutningen af ​​tabellen.

Bemærk: cig q - cytoplasmisk Ig c kæde;sig q er en overflade Ig og en kæde.