Investigation des enzymes et des isoenzymes
Les enzymes sont des protéines spécifiques qui remplissent le rôle de catalyseurs biologiques dans le corps. Les enzymes sont contenues dans toutes les cellules du corps, où leur concentration est beaucoup plus élevée que dans le plasma sanguin. Le sérum
du sang, dont la composition enzymatique est relativement constante, est le plus souvent utilisé comme objet de recherche. L'activité normale des enzymes dans le sérum reflète la relation entre la biosynthèse et la libération d'enzymes( avec le renouvellement cellulaire habituel), ainsi que leur élimination de la circulation sanguine. Une augmentation du taux de renouvellement des enzymes, des dommages aux cellules conduisent généralement à une augmentation de l'activité des enzymes dans le sérum. Dans le sérum du sang, on distingue trois groupes d'enzymes: cellulaire, sécrétoire et excrétoire.
Les enzymes cellulaires sont divisées en deux groupes en fonction de la localisation dans les tissus:
■ des enzymes non spécifiques qui catalysent des réactions d'échange communes à tous les tissus et se retrouvent dans la plupart des organes et des tissus;
■ enzymes spécifiques à un organe ou indicateurs spécifiques à un type de tissu spécifique seulement.
L'activité sérique des enzymes cellulaires est faible ou inexistante. Dans les processus pathologiques, l'activité des enzymes de ce groupe dans le sérum dépend de la vitesse de libération des cellules, qui à son tour est déterminée par la vitesse et le degré de leur endommagement.
Les enzymes sécrétoires( céruloplasmine, pseudocholinestérase, lipoprotéine lipase) vont directement dans le plasma sanguin et y remplissent des fonctions spécifiques. Ces enzymes sont synthétisées dans le foie et sont constamment libérées dans le plasma. Leur activité dans le sérum est plus élevée que dans les cellules ou les tissus. En pratique clinique, ils présentent un intérêt lorsque leur activité dans le sérum sanguin devient inférieure à la normale en raison d'une altération de la fonction hépatique.
Les enzymes excrétoires sont formées par le système digestif( pancréas, muqueuse intestinale, foie, endothélium des voies biliaires).Ceux-ci comprennent l'a-amylase, la lipase, la phosphatase alcaline, etc. Normalement, leur activité sérique est faible et constante. Cependant, en pathologie, lorsque l'une quelconque des voies d'excrétion habituelles est bloquée, l'activité de ces enzymes dans le sérum augmente significativement.
L'activité mesurée des enzymes peut être due à la présence de propriétés moléculaires très similaires des enzymes, qui sont très similaires dans les propriétés, mais diffèrent les unes des autres. Ces différentes formes sont appelées isoenzymes. L'étude des isoenzymes dans la pratique clinique est intéressante lorsque des isoenzymes individuelles sont formées dans différents tissus( par exemple, dans le cœur et le foie, diverses isoenzymes LDH prédominent).
Pour la quantification de l'activité enzymatique, la Commission sur les enzymes de l'Union biochimique internationale a recommandé une unité internationale standard( UI).L'unité d'activité de n'importe quelle enzyme est prise comme sa quantité qui, dans des conditions optimales, catalyse la conversion de 1 μmol de substrat par minute( μmol / min).
L'activité de l'enzyme est jugée par le taux de réaction catalysée à une certaine température et le pH du milieu, la concentration du substrat. Par conséquent, lors de la détermination de l'activité des enzymes, les mêmes conditions doivent être strictement respectées.
La réaction enzymatique est sensible aux changements de température. Il est généralement effectué à une température comprise entre 25 et 40 ° C dans la plage
, mais à des températures différentes, le pH optimal, le tampon, le substrat et d'autres paramètres sont différents. L'activité maximale de la plupart des enzymes dans le corps humain est observée à une température d'environ 37 ° C.Par conséquent, aux fins de la normalisation internationale, les mesures de l'activité enzymatique sont effectuées à une température donnée. En dessous des valeurs normales de l'activité enzymatique sont données pour une température de 37 ° C.
L'investigation des enzymes est utilisée en pratique clinique pour résoudre divers problèmes: diagnostic, diagnostic différentiel, évaluation de l'évolution de la maladie, détermination de l'efficacité de la thérapie, du degré de récupération et du pronostic de la maladie. Trois types de changements enzymatiques sont connus dans le cas de la pathologie: hyperfréquences - mia - activité enzymatique accrue par rapport à la norme, hypo-fermentation - sa diminution, dysfermentation - l'apparition d'enzymes dans le sang, normalement non détectable.