Bakterioskopija sputuma
Pravočasno prepoznavanje povzročitelja je zelo pomembno za pravilno izbiro antibakterijskih zdravil, da bi preprečili razvoj bakterijske odpornosti med empirično uporabo antibiotika. Barvanje grama je najpogostejša metoda za barvanje vseh vrst materiala, pridobljenih pri pacientu( sputum, bronkoholoveolarni izpiranje, itd.) Za hitro in indikativno vzpostavitev infekcije.
Moč sputuma, obarvan z madežem Gram, se uporablja za izvedbo predhodne ocene morebitnega etiološkega sredstva. Preskusi, ki se obarvajo z gramom, se preučijo pred setvijo na hranilnih medijih tudi za oceno primernosti za gojenje in določitev verjetnega patogena. Sputum se šteje za primernega, če mast, ki jo obarva Gram z majhnim povečanjem mikroskopa, razkrije več kot 25 levkocitov in manj kot 10 epitelnih celic na vidnem polju. Znaki kakovostnega vzorca sputuma, ki se lahko uporabljajo za gojenje, so prevalenca levkocitov nad epitelnimi celicami v njej, pa tudi prisotnost bakterij ene vrste, ki se nahajajo znotraj ali okoli levkocitov. Gram-pozitivne bakterije v pripravku imajo temno modro barvo, gram-negativno - v roza barvi. Raziskovalce netipične pljučnice( mikoplazma, legionella, rickettsia in klamidija) ne obarvajo Gram, zato se za odkrivanje uporabljajo tudi serološke metode.
Raztopine za sputum po Tsiol-Nielsenu se uporabljajo za identifikacijo kislinastih bacilijev, predvsem mikobakterije tuberkuloze. Pripravek pripravimo iz gnojnih delcev izpljunka, ki so izbrani iz 4-6 različnih mest. Izbrane delce skrbno trituriramo med dvema tobakoma do homogene mase, posušimo na zraku, pritrjenim preko plamena gorilnika. Mycobacterium tuberculosis je obarvana rdeče, vse druge sputum in bakterije v modri barvi. Mycobacterium tuberculosis ima videz tanke, nekoliko ukrivljene palice različnih dolžin, z zgoščevanjem na koncih ali v sredini, so razporejene v skupine in posamično. Odkrivanje Mycobacterium tuberculosis je najbolj zanesljiv znak tuberkuloznih lezij pljuč.Metoda obarjanja brisov po Tsiol-Nielsenu z aktivnimi oblikami pljučne tuberkuloze ima občutljivost 50% in specifičnost 80-85%.