Analiza cerebrospinalne tekočine( Cerebrospinal fluid) - Vzroki, simptomi in zdravljenje. MF.

Tekočina( ali cerebrospinalne hrbtenjačni tekočini, CSF) - biološka tekočina, potrebna za delovanje CŽS.Njegova raziskava je ena izmed najpomembnejših vrst laboratorijskih testov. Sestavljen je iz pre-analitični fazi( priprava predmeta, zbiranje gradiva in njegovo dostavo v laboratorij), analitično( pravzaprav počne raziskave) in postanalytical( prepis rezultata).Le pravilna izvedba vseh manipulacij na vsakega od teh korakov določa kakovost analize.

cerebrospinalni tekočini( CSF), tvorjen v horoidnem pletežu možganov prekatov. Pri odraslem subarhnoidalnyh prostorov človeških hkrati in kroži v prekatov v možganih 110-160 ml CSF, v spinalni kanal - 50-70 ml. Tekočina tvorjen neprekinjeno pri hitrosti 0,2-0,8 ml / min, odvisno od intrakranialnega tlaka. Pri zdravem človeku dan oblikovali 350-1150 ml CSF.

Tekočina se pridobiva s punkcijo hrbtnega kanala, bolj pogosto - ledvenega - po metodah znanih nevrologi in nevrokirurgi. Njegove prve kaplje so odstranjeni( "cestni" kri).Nato tekočina zbrani vsaj dve cevi: cev v konvencionalnem( kemično centrifugirajo) za splošno klinično in kemično analizo, sterilno - bakterioloških preiskav. Na obrazcu za napotitev na zdravnika pregledu SSO je treba določiti, ne samo ime bolnika, ampak tudi klinične diagnoze in namen študije.

Upoštevajte, da dostavi vzorcev tekočina laboratoriju je treba zaščititi pred pergrevaniya ali ohladili in vzorcev za odkrivanje bakterijskih polisaharidov serogicheskih teste je treba segrejemo v vodni kopeli 3 minute.

Pravzaprav laboratorijska študija cerebrospinalni tekočini( analitična faza) se izvede v skladu s pravili, sprejetimi v kliničnem laboratoriju v analizo vseh bioloških tekočin, ter vključuje naslednje korake:

- makroskopska analiza - zajemanje fizikalno-kemijskih lastnosti( velikost, barve, znak),
- štetje števila celic,
- mikroskopija nativno pripravo in citologijo obarvanega produkta;
- biokemičnih,
- mikrobiološka preiskava( če je navedena).

se nam zdi primerno in informativno v nekaterih primerih dopolni študijo imunološke SSO in morda - drugih testih, katerih pomen se razpravlja v literaturi. Pojasnilo kazalniki

lužnico

Normalna CSF brezbarvna in porozrachna( kot so destilirana voda, v primerjavi s katerimi fizikalne lastnosti splošno opisujejo CSF).Sivkasto

ali sivo-zelena lužnico s primesjo bakterij in levkocitov ponavadi posledica. Red CSF različno jakost( eritrohromiya) s primesjo eritrocitov, ki se pojavljajo, kadar sveže krvavitve ali poškodbe možganov pogon.zazna vizualno pristutstvuyut eritrocitov, ko je vsebnost več kot 500-600 ul. V patoloških procesov lahko

tekočina ksantohromnoy - obarvan v rumeno ali rumeno-rjave izdelkov okvare hemoglobina. Prav tako menijo, xanthosis lažen - barvni tekočine droge povzročajo. Manj pogosto srečamo zelenkasto CSF ​​(izloča gnojen izcedek meningitis, možgani abscesa).Literatura opisuje barvo in korchnevy pijačo - tudi zlom craniopharyngioma ciste v cerebrospinalni poti tekočine.

lužnico motnosti lahko posledica krvnih celic nečistot ali mikroorganizmov. V slednjem primeru lahko meglice odstrani s centrifugiranjem.Če vsebnost CSF poveča količino grobih proteinov postane motna. Relativna gostota

spinalno tekočino dobimo z lumbalno punkcijo, 1,006-1,007.Ko vnetje mening, možganske travme relativno gostoto cerebrospinalni tekočini poveča do 1.015.To zmanjšuje s prekomernim likvorja( hidrocefalusa).

Pri povišanih nivojev fibrinogena v cerebrospinalni tekočini tvorjen fibrinous film ali strdek, ki se pojavi pogosteje tuberkulozo meningitisa. Včasih se je cev s tekočino pustimo pri sobni temperaturi za en dan( če je potrebno natančno določiti -? Ali filma oblikovana).V navzočnosti fibrinous svojemu filmske seciranje iglo prenese na steklu in obarvamo z Ziehl-Neelsen ali kak drug način identifikacije mikobakterije. Običajno CSF ​​98-99% vode.

Kljub temu je študija njegove kemične sestave pomembna naloga. Vključuje določanje ravni beljakovin, glukoze in klorida, v nekaterih primerih pa jih dopolnjujejo tudi drugi kazalniki.

CSF protein, pri več kot 80% proteina CSF teče iz plazme z ultrafiltracijo. Stopnja beljakovin v različnih deležih: ventrikularna - 0,05-0,15 g / l, cisternal 0,15-0,25 g / l, ledveno 0,15-0,35 g / l. Za določitev koncentracije beljakovin v cerebrospinalni tekočini lahko uporabimo katerokoli od standardiziranih metod( s sulfosalicilno kisline in amonijevega sulfata, in drugo).Povečana vsebnost beljakovin v cerebrospinalni tekočini( hiperproteinarhija) je lahko posledica različnih patogenskih dejavnikov( tabela 1).

študija proteina CSF ne omogoča le, da se pojasni naravo patološkega procesa, temveč tudi za oceno stanja krvno-možgansko pregrado. Kazalec za te namene lahko služi kot albumin, če je njegova raven v CSF določena z imunokemijskimi metodami. Določitev albumina izvedemo v zvezi z dejstvom, da je, kot je krvni protein ne sintetizira lokalno in zato lahko "marker" imunoglobulini nadaljnje vnašanje od pretoka krvi zaradi okvarjenim permeabilnosti pregrado. Istočasna določitev albumina v serumu( plazma) krvi in ​​cerebrospinalne tekočine albumina nam omogoča, da izračun indeksa:

Ko je ta indeks je nepoškodovano krvno-možgansko pregrado manj kot 9, z zmerno poškodbami - 9-14, z opazno - 14-30, s hudimi poškodbami - 30-100 in povečanje več kot 100 pomeni popolno poškodbo pregrade.

V zadnjih letih povečala zanimanje za specifično CNS proteinov lužnice - nevrona enolazo, proteina S-100, mielinski bazični protein( MBP), in drugi. Eden od obetavnih med njimi za klinične namene je OBM.V običajnih tekočinah je praktično odsoten( njegova koncentracija ne presega 4 mg / l) in se pojavlja le v pogojih patologije. Ta laboratorijski atribut ni specifičen za določene nosolske oblike, ampak odraža obseg lezije( povezan predvsem z uničenjem bele snovi).Nekateri avtorji to obetaven opredelitev MBP v CSF za spremljanje neuroAIDS razmisliti. Na žalost, še vedno obstajajo težave, povezane z neposredno določitvijo koncentracije tega proteina.

Glukoza Glukoza

CSF iz običajnega CSF pri koncentraciji 2.00-4.18 mmol / l. Ta vrednost je podvržena znatnim nihanjem, tudi pri zdravi osebi, odvisno od prehrane, telesne aktivnosti in drugih dejavnikov. Natančno oceno ravni glukoze v likvorju hkrati določi svojo raven v krvi, kjer se običajno je to 2-krat višje. Povečane ravni glukoze v krvi( giperglikoarhiya) pojavi pri sladkorni bolezni, akutnega encefalitis, ishemičnih motenj obtočil in drugih bolezni. Gipoglikoarhiya opazili pri meningitisu različnih etiologij, ali aseptično vnetje, neoplastične lezije v možganih in membrane, vsaj - z okužbo herpes, subarahnoidna krvavitev.

nekatere prednosti pred glukoze kot je diagnostičnih označevalcev laktata( mlečna kislina), kot je njegova koncentracija v cerebrospinalni tekočini( 1,2-2,1 mmol / l), ki je neodvisen od tistega v krvi. Njegova raven se v različnih pogojih, povezanih z motnjami v presnovi energije bistveno povečala - meningitis, še posebej - po Gram-pozitivnih flore možganov hipoksije in nekaterih drugih povzročil.

kloridi v CSF

kloridi - vsebnost v normalnem cerebrospinalni tekočini - 118-132 mmol / l. povečanja koncentracije CSF opazili v nasprotju z njihovo odstranitev iz telesa( ledvic, srca), pri degenerativnih bolezni in tumorji centralnega živčnega sistema. Z encefalitisom in meningitisom opazimo zmanjšanje vsebnosti klorida.

Encimi v alkoholu

Alkohol je značilen po nizki aktivnosti encimov, ki jih vsebujejo. Spreminjanje encimske aktivnosti v CSF pri različnih boleznih so splošno nespecifična in vzporedno opisane premike v krvi v teh bolezni( Tabela 2).Druga razlaga si zasluži razlago sprememb v aktivnosti kreatin-fosfokinaze( CKF).Ta encim v tkivih treh frakcij, ki so značilni ne le z molekularnimi razlik, ampak tudi narava porazdelitve v tkivih: CK-MB( miokard), CK-MM( mišični), CK-BB( možganov).Če ima skupna aktivnost CK v cerebrospinalni tekočini ne osnovno diagnostično vrednost( se lahko poveča, če tumor, možganski infarkt, epilepsije in drugih bolezni) je frakcija CK-BB relativno specifična označevalec poškodovanega možganskega tkiva in njeno aktivnost v cerebrospinalni tekočini korelira z Glasgow lestvici.

število celic in cytogram

lužnice pri študiju bioloških tekočin in CSF vključno običajno štetje števila celic v cytogram in madeži obarvano azureozinom( Romanovsky-Giemsa Nocht, Pappenheim).Štetje celičnih elementov v cerebrospinalni tekočini( določitev cytosis), izdelane z Fuchs-Rosenthal komoro, pred vzrejo to Samson reagent 10-krat. Uporaba tega posebnega barvila, ne drugega.omogoča, da celice ostanejo 15 minut, celice pa ostanejo nespremenjene do 2 ur.

Število celic v celotni komori se deli s 3, zato se citoza pridobi v 1 μl. Za večjo natančnost se citoza obravnava v treh komorah. Kdaj lahko Fuchs-Rosenthal komora odsotnost Goryaeva uporabljate kamero, s štetjem celic v celotni mreži kot v treh zborov, ki je rezultat pomnoži s 0,4.Do sedaj, obstajajo razlike v enotah števila celic - število celic v komori, v 1 mm ali 1 liter. Verjetno je priporočljivo, da kljub temu izrazite citozo s številom celic v μL.Za izračun števila levkocitov in eritrocitov v CSF lahko uporabimo tudi avtomatske sisteme. Povečana vsebnost

celic v CSF( pleocytosis) se pogosto pojavi pri vnetnih boleznih, v manjši meri - z meningealno draženje. Najbolj izrazit pleocytosis videl z bakterijskimi okužbami, glivičnih možganskih poškodbah in tuberkulozne meningitis. V epilepsije, arahnitisa, hidrocefalusa, degenerativnih procesov in nekaterih drugih bolezni centralnega štetja živčnega sistema celic ostane normalna.

Obarvanje celic naravnega pripravka z Samsonovim reagentom omogoča dovolj razlikovanje celic. Toda njihove morfološke značilnosti so natančnejše po fiksaciji in obarvanosti pripravljenih citoloških pripravkov. Sodoben pristop k pripravi takšnih zdravil vključuje uporabo citocentrifuge. Vendar pa so tudi v ZDA opremljeni s samo 55% laboratorijev. Zato se v praksi uporablja enostavnejša metoda - depozicija celic na diapozitivu. Zdravila je treba dobro posušiti v zraku in nato naslikati.

V barvni pripravi se šteje število celic. V glavnem predstavljajo krvnih celic( ponavadi - limfocitov in nevtrofilcev vsaj - monocitov eozinofilcev, bazofilcev) more izpolniti plazmi in mastocite, makrofagi, zrnate kroglice( degenerativne tvorita posebna vrsta makrofaga - lipofagov sposoben maščobna degeneracija), celice arahnoendoteliya, epindimy. Morfologija vseh teh celičnih elementov je navadno dobro znana laboratorijskim osebam za diagnostiko in je podrobno opisana v mnogih priročnikih. Stopnja in narava cytogram pleocytosis CSF z omogoča opredelitev narave patološkega procesa( tabela 3).

Nevtrofilna levkocitoza pogosto spremlja akutno okužbo( lokalni in difuzni meningitis).Eozinofilija CSF opazujemo redko - z ehinokokozo v možganih, eozinofilnim meningitisom. Eozinofilija CSF praviloma ne ustreza številu eozinofilov v krvi. Limfocitna pleocytosis CSF pojavi pri virusni meningitis, multiple skleroze, kronične faze tuberkulozne meningitis po operacijah na možganske membrane. V patološke procese CŽS opazili polimorfizem limfocitov, med katerimi se aktivirajo. Zanje je značilno prisotnosti obilno citoplazmo z ločenima palely azurophilic granule, so nekatere celice otshnurovku ali fragmentacija citoplazmi( clasmatosis).Plazmatke vsebovane v cytogram virusnega ali bakterijskega meningitisa, subakutni vnetnih procesov, med predelavo iz nevrosifilisa. Monociti v postopku degeneracijo v cerebrospinalni tekočini hitreje limfocitov opazili pri multipli sklerozi, progresivne panencefalitisa, kronična vnetja tli. Makrofagi - "sanitari" liker, se pojavljajo s krvavitvami, okužbami, travmatično in ishemično nekrozo.

Včasih v CSF obstajajo atipične celice - elementi, ki v njihovih morfoloških značilnostih ne morejo biti pripisani določenim celičnim oblikam. Atipične celice najdemo pri kroničnih vnetnih procesih( tuberkulozne meningitis, multipla skleroza, itd), in so pogosto tumorske celice. Verjetnost najdbe tumorskih celic v cerebrospinalni tekočini je majhna( ne več kot 1,5%).Odkrivanje eksplozivnih celic v CSF pri hemoblastozi nam omogoča govoriti o nevroleukemiji.

Pri analizi sestave CSF je pomembno oceniti razmerje beljakovinskih in celičnih elementov( disociacija).Pri disociaciji celičnih proteinov se izrazita pleocitoza opazi z normalno ali nekoliko povečano vsebnostjo beljakovin. To je značilno za meningitis. Belkovokletochnaya disociacija je značilna hiperproteinarhija pri normalni citozi. Ta pogoj je značilen za stoječe procese v cerebrospinalni tekočini( tumor, arahnoiditis itd.).

klinično stanje včasih zahtevajo štetje števila eritrocitov v krvavem likvorja( za objektivizacijo obsega krvavitve).Štetje rdečih krvnih celic je enako kot v krvi. Kot je navedeno zgoraj, se barva lužnico spremembe, če v 1 mm vsebuje več kot 500-600 eritrocitov opazno obarvanje pojavi v prisotnosti približno 2000, ko bodo hemoragično raven eritrocitov od 4000 / L.

Mikrobiološka preiskava CSF

Ena od pogostih bolezni CNS je gnojni meningitis. V takih primerih so mkrobiološke raziskave še posebej pomembne. Vključuje orientacijski test - bakterioskopijo zdravil in klasične tehnike kulture. Bakterioskopija cerebrospinalne tekočine ima omejeno diagnostično vrednost, še posebej pri pridobivanju jasnega CSF.Bris pripravimo iz blata alkoholnih pijač, pridobljenih s centrifugiranjem okarshivayut metilen modro ali Gram madež, čeprav nekateri avtorji menijo, da je najnovejša različica barve "Delati" celične elemente in ustvarja artefakte. Z meningitisom in abscesi se ugotovi raznolika flora, ki ustreza naravi bolezni. Ne glede na rezultate mikroskopijo bakterijskega meningitisa diagnoze je potrebno potrditi s kulturo testom, ki postane odločilni faktor pri diagnosticiranju te skupine bolezni in izbiro ustreznega zdravljenja. To se izvede v skladu z Odredbo № 375 Ministrstva za zdravje Ruske federacije 23.12.98 "o ukrepih za krepitev nadzora in preprečevanja meningokoknih okužb in gnojni bakterijskega meningitisa."Najpogostejši vzrok bakterijskega meningitisa je Gram-negativna diplokok Neisseria meningitidis, ki jih je mogoče zaznati 80% primerov, tudi ko mikroskopijo.

CSF liker

Običajno so v CSF prisotni le limfociti in monociti. Pri različnih boleznih in patoloških pogojih v cerebrospinalni tekočini se lahko pojavijo druge vrste celic.

Velikosti limfocitov so podobne rdečim krvnim celicam. Limfociti imajo veliko jedro in ozek, neobarvani rob citoplazma. Običajno vsebuje alkohol 8-10 celic limfocitov.Število se povečuje s tumorji centralnega živčnega sistema. Limfociti najdemo v kroničnih vnetnih procesih v membranah( tuberkulozni meningitis, cistikeroza arahnoiditis).

Plazmatske celice v lužini. Celice so večje od limfocitov, velika jedra, ki se nahaja izsredno, veliko citoplazme z relativno majhno količino jeder( velikost celic - 6,12 mm).Plazemskih celic v cerebrospinalni tekočini najdemo le v patoloških primerih je trajanje sedanjih vnetnih procesov v možganih in membranah, pri encefalitis, tuberkulozne meningitis, arahnitisa tsistitserkoznom in drugih bolezni pri pooperativnem obdobju, kadar počasno celjenje ran.

Monociti tkiva v lužini. Velikost celic je od 7 do 10 μm. V normalni tekočini se včasih lahko pojavijo v obliki posameznih primerkov. Monocite najdemo v cerebrospinalni tekočini po operaciji na centralni živčni sistem, z dolgimi trenutnih vnetnih procesov v lupinah. Prisotnost tkivnih monocitov kaže na aktivno tkivno reakcijo in normalno celjenje rane.

Makrofagi v likuri. Lahko imajo jedra različnih oblik, ponavadi se nahaja na obrobju jedra celic citoplazmi vsebuje votlinic in vključkov. V običajnih tekočinah makrofagov ni mogoče najti. Prisotnost makrofagov z normalnim številom celic v cerebrospinalni tekočini se opazi po krvavitvi ali v vnetnem procesu. Praviloma se pojavljajo v pooperativnem obdobju, ki ima prognostično vrednost in govori o aktivnem čiščenju CSF.

Zrne kroglice v likerju. Celice z maščobno infiltracijo - makrofagi s prisotnostjo kapljic maščob v citoplazmi. V barvnih pripravkih z alkoholom imajo celice majhno periferno nameščeno jedro in veliko celično citoplazmo. Velikost celic je drugačna in je odvisna od vključenih kapljic maščobe. Granularne kroglice najdemo v patološki tekočini, pridobljeni iz možganskih cist v fokusih razpadanja možganskega tkiva s tumorji.

Nevtrofilci v alkoholu. V komori so nevtrofile periferne krvi identične po videzu. Prisotnost nevtrofilcev v cerebrospinalni tekočini, celo v minimalnih količinah, označuje bodisi prejšnjo ali obstoječo vnetno reakcijo. Prisotnost spremenjenih nevtrofilcev kaže na zmanjšanje vnetnega procesa.

Eozinofili v alkoholu. V cerebrospinalni tekočini določimo enotno, sijočo granularnost. Eozinofili se nahajajo v subarahnoidnih krvavitvah, meningitisu, tuberkulozi in sifilističnih možganskih tumorjih.

Epitelijske celice v CSF.Epitelijske celice, ki omejujejo subarahnoidni prostor, so v cerebrospinalni tekočini zelo redke. To so velike okrogle celice z majhnimi okroglimi ali ovalnimi jedri. Odkrita z novotvorbami, včasih z vnetnimi procesi.

Tumorske celice in kompleksi v cerebrospinalni tekočini. Najdemo jih v celici in barvni pripravi alkoholnih pijač.Maligne celice se lahko nanašajo na naslednje vrste tumorjev: medulloblastom

• ;
• spongioblastoma;
• astrocitoma;
• rak.

Kristali v alkoholu. Redko se pojavijo v cerebrospinalni tekočini, v primeru razpada tumorja.

elementi Echinococcus v likvore- kljuke scolexes, citin lupina delci - v cerebrospinalni tekočini so redke.

PCR diagnostika

CSF V zadnjih letih so nekateri obljubo v etiološke diagnostičnih neuroinfections povezanih z razvojem molekularnih genetskih tehnik za detektiranje nukleinskih kislin infekcij v cerebrospinalni tekočini( PCR diagnostika).

Tako je cerebrospinalna tekočina okolje, ki očitno reagira na patološke procese v osrednjem živčnem sistemu. Globina in narava njenih sprememb sta posledica globine patofizioloških motenj. Pravilna ocena laboratorijskih tekočih simptomov omogoča razjasnitev diagnoze in oceno učinkovitosti zdravljenja.

V.V.Bazarijanski profesor UGMA, namestnik glavnega zdravnika OKB številka 1