Imunofenotiparea hemoblastozei

progrese semnificative în studiile hematologice asociate în ultimii ani, cu utilizarea metodelor imunologice moderne și instrumente automate pentru analizarea și sortarea celulelor de sânge periferic și măduvei osoase - citometrele.morfologică tradițională și studiul citochimic al bolii de celule substrat( sânge, măduva roșie osoasă, ganglionii limfatici, splina, etc.), în multe cazuri, în special în boli limfoproliferative, nu dezvăluie întreaga varietate de opțiuni, printre forme morfologic similare și de a identifica originea clonei patologice. Aceste probleme pot fi rezolvate numai prin studierea caracteristicilor imunologice ale celulelor. Fiecare etapă a celulei-hemo poetică diferențiere are propriul set de Ar, care a făcut apel la clasificarea internațională a diferențierii și diferențierea sunt împărțite în grupuri, CD-uri desemnate. La diferențierea bloc a modificărilor neoplazice pot apărea în orice stadiu de dezvoltare de celule normale, rezultând într-o clonă de celule patologice definind boala substrat și având caracteristica aceeași imunologic( sau fenotipica).După un studiu al acestor markeri în celulele pot fi determinate prin orice formă sau variantă de realizare a bolii sunt coerente, adică pe baza diagnosticului diferențial fenotipul celulei imunologică, care este cel mai dificil în tulburări limfoproliferative, deoarece substratul celular principal bolile patologice sunt aproape același tip de celule morfologic. Fenotiparea permite utilizarea anticorpilor monoclonali simbolizat celule blastice și mature sanguine mieloide, mono-, seria limfocitară în prezența plătit-diferențiere-Ar( receptori) în peretele celular. Pe membranele celulelor sanguine și ale măduvei osoase roșii, pot fi identificați următorii markeri( Ar).

■ CD2 este o glicoproteină transmembranară monomerică.Este prezent pe suprafața tuturor limfocitelor T circulante și a unor limfocite NK.CD2 participă la procesul de activare alternativă a limfocitelor T.Detectarea prin anticorpi monoclonali CD2 utilizați în practica clinică pentru Fenaughty leucemie cu celule T-cărnuri acută, limfom, afecțiuni inflamatorii și imunodeficiență cronice.

■ CD3 - complex de proteine ​​asociate cu receptor Ag-specific celulei T, este principalul marcator funcțional al limfocitelor T.Acesta facilitează transmiterea semnalului de activare de la membrana

la citoplasma celulei. Determinarea CD3 indicat pentru diagnosticul de leucemie acută cu celule T, limfoame( CD3 nu sunt exprimate în neoplasme limfoide non-celule T) și boala imunodeficienta-TION.

■ CD4 - glicoproteină transmembranară exprimată printr-un subset al T helper( inductori) constituind 45% din limfocitele din sângele periferic.În stadiile incipiente de dezvoltare a limfocitelor în timus, Az de CD4, precum și CD8, exprimat toate limfocitele cortical.timocite medulare, care este similar cu fenotipul CD4 + mature celule T din sângele periferic( celule T helper), expresia ruyut au fie receptori CD4 sau CD8.În sângele periferic, până la 5% dintre celule sunt marcate simultan CD4 și CD8.O ușoară exprimare a CD4 este posibilă pe unele celule monocitare. CD4 este exprimată în cele mai multe cazuri, limfom de celule T, inclusiv mycosis fungoides și în leucemia cu celule T asociate HTLV( HTLV - virusul uman T-limfotropic - T-lim fotropny virusul uman).

■ CD5 - glicoproteină cu un singur lanț, care este prezent pe toate maturi limfocitele T și majoritatea thymocytes, este slab exprimat de către limfocitele B.CD5 este detectat pe celule neoplazice de leucemie limfocitară cronică de celule B și limfom centrocytic. In alte tipuri de boli maligne limfoide - limfom folicular, leucemie cu celule păroase, limfom cu celule mari - CD5 nu și-a exprimat.

■ CD7 - proteină cu un singur lanț, cea mai timpurie markerul diferențierii celulelor T.Se exprimă prin limfocite pro-T chiar înainte de a migra spre timus. CD7 este detectat pe majoritatea celulelor NK, se observă o exprimare slabă pe monocite. B limfocitele și granulocitele nu conțin acest Ag. Definiția CD7 este utilizată pentru diagnosticarea limfoamelor, leucemiei limfoblastice limfoblastice pentru copii.

■ CD8 este o proteină constând din două lanțuri polipeptidice legate prin punți disulfidice. Este exprimat subpopulatii Qi totoksicheskih și supresor limfocitelor T, care constituie 20-35% din limfocitele din sângele periferic. Acest Ar trebui, de asemenea, celulelor NK, timocitelor corticale, 30% timocite-ing medulară și subpopulație de celule de măduvă osoasă.CD8 a fost testat pentru a cuantifica conținutul de supresoare T

■ CD 10 - asociat cu endopeptidaza membranei celulare. CD10 exprimă tinerele forme de limfocite B și o subpopulație de limfocite corticale. CD10 exprimă toate celulele ALL.

■ exprima CD11c pe membrana celulelor de macrofage, monocite, granulocite, NK-celule si de leucemie cu celule păroase.

■ CD13 - glicoproteina exprimată prin celule serie mielomonotsitar-picior( celule precursoare, neutrofile, bazofile, eozină-filumul, monocite și celule de leucemie mieloidă).El este absent de la limfocitele T B, celule roșii din sânge și trombocite.

■ CD14 - glicoproteină cu membrană de suprafață.Este exprimată în principal de monocite și macrofage. CD14 este determinat

mai mult de 95% din monocitele din sângele periferic și măduva osoasă.Expresia CD14 puternică a fost observată în leucemia mielocitară acută.În leucemia limfocitară acută și cronică, care Ar nu exprimă ruetsya.

■ CD15 este o oligozaharidă.El participă la procesele de fagocitoza și chemotaxia. Acest Ag este prezent pe suprafața granulocitelor mature și celule Sternberg Berezovski. Exprimarea lui Ar CD15 este detectată în boala lui Hodgkin. Când Lim non-Hodgkin fomah CD15, în cele mai multe cazuri nu arată.

■ CD16 este exprimat pe suprafața granulocite, monocite, macrofage și celule NK.Toate limfocitele exprimă Ar, sunt capabile dependente de anticorpi tsitotoksichnos-ti celulare. CD16 determinat prin tastarea leucemie cronică mielocitică, pentru caracterizarea celulelor NK.

■ CD 19 - glicoproteina prezentă pe toate limfocitele B periferice precum și în toate progenitori celulei B.Este absent la celulele plasmatice. Acesta este cel mai vechi marcator al celulelor B, joaca un rol important in reglarea activarea si proliferarea limfocitelor B.CD19 este exprimat pe celulele neoplazice de leucemie acută de origine a celulelor B, și este de asemenea prezent in unele forme de monoblastny leucemie acută.

■ CD20 - proteină non-glicozilată.B-limfocit ontogenia Ar CD20 CD19 apare după etapa de pre-B-celule limfocite diferentiale tsirovki. Este absent pe membrana plasmatică a celulelor plasmatice. Exprimate în ALL, cu celule B leucemie limfocitară cronică, leucemie cu celule păroase, Burkitt Lim fomah și foarte rare - monoblastny leucemie acută.

■ CD21 - glicoproteina, într-un număr semnificativ prezent pe limfocitele B în organele limfoide și în cantități mici - pe celulele B din sângele periferic. CD21 este un receptor pentru virusul Epna-Stein-Barr.

■ CD22 este o proteină constituită din două lanțuri polipeptidice. Expres-siruetsya pe membrana majorității celulelor B, inclusiv celule progenitoare( prolymphocytes).Ar nu este exprimat pe celulele B( celule plasmatice) după activarea lor. Expresia cea mai pronunțată a CD22 asupra celulelor detectate la leucemie-volosatokle exact, slab - cu leucemie mieloidă și non-T ALL kletoch-TION.

■ CD23 - glicoproteina exprimată prin sângele periferic B-lim-fotsitami activat mai mult. CD23 mediază citotoxicitatea IgE dependentă și fagocitoză de către macrofage și eozinofile.

■ CD25 - glicoproteină monocatenară identificat ca receptor cu afinitate mică pentru IL-2.Acest receptor este exprimat pe limfocitele T activate și o densitate mai mică pe celule B activate.În sângele periferic al persoanelor sănătoase de Ar este prezentă în mai mult de 5% din celule limfoide.

■ CD29 - Receptor de fibronectină.Este distribuită pe scară largă în țesuturi, este exprimată prin leucocite. Determinarea celulelor CD29 din peri din sânge

fericheskoy utilizate pentru tastarea unui subset al T-adeziv curent cu fenotipul CD4 + CD29 +, sunt numite helper de tip 2( Th2).Aceste celule prin producerea de limfokine implicate în punerea în aplicare a răspunsului imun umoral.

■ Glicoproteina transmembranară CD33.Prezent pe suprafața celulelor mieloide și seria monocitică.Sa detectat pe suprafața monocitelor și într-o măsură mai mică, granulocite din sângele periferic. Aproximativ 30% din celule de măduvă osoasă exprimă CD33, inclusiv mieloblasti, promielocite și mielocite. Ar lipsește pe membranele celulelor stem polipotențioase. CD33 este utilizat pentru a caracteriza celulele în leucemiile mieloide.celulelor leucemice de origine limfoidă și eritroide nu exprimă CD33.

■ CD34 - phosphoglycoprotein, exprimată în celule precursoare hematopoietice, inclusiv celulele stem monopotentnye. Expresia cea mai pronunțată a lui Ar este observată la progenitori timpurii;când celulele mature, expresia markerului cade. CD34 se găsește, de asemenea, pe celulele endoteliale. CD34 este utilizat pentru a caracteriza celulele în leucemia acută mielogenă și limfocitară.Cu leucemie limfocitară cronică și expresie limfomă, nu este detectat ARCD34.

■ CD41a este exprimată prin trombocite și megacariocite. Anticorpii-CD41a-monoclului funcțional pentru detectarea utilizării de diagnosticare Me-gakarioblastnogo leucemie. Cu trombasthenia Glązmann, expresia acestui Ar este absentă sau suprimată în mod semnificativ.

■ CD42b este o glicoproteină membranară formată din două lanțuri polipeptidice. Marcatorul se găsește pe suprafața trombocitelor și megacariocitelor. In practica clinica de detectare a CD42b pentru utilizarea thrombocytopathy diagnostic - sindromul Bernard-Soulier.

■ CD45RA aparține clasei de glicoproteine ​​transmembranare. Acesta este un leucocite comun Ag. Exprimată pe membrana celulară a limfocitelor B într-o măsură mai mică, limfocitele T și timocite medular mature. Marcatorul nu este exprimat prin granulocite.

■ CD45RO - izoforme cu greutate moleculară mică de CD45RA - totalul leucocitelor Ag. Identificați celula T( celule T de memorie) subpopulații de limfocite B, monocite și macrofage. Anticorpii monoclonali pentru a interacționa cu cele mai multe CD45RO timocite subpopulație de repaus CD4 + si CD8 + T-limfocite și matură celulele T activate. Celulele de origine mielomonocitară, granulocite și monocite poartă, de asemenea, acest Ag. Se detectează cu limfoame prenatale și imunoblaste.

■ dimerul CD46 - O-glicozilat. Acesta este larg distribuit în țesuturile și exprimate în T și B-limfocite, monocite, GRA-nulotsitami celulelor NK, plachete, celule endoteliale, fibroblaste, dar este absent de pe suprafața eritrocitelor. CD46 asigură protecția tisulară din acțiunea complementului.

■ CD61 - plachetar Ag. Acesta este exprimat pe trombocite din sângele periferic și măduvă osoasă, precum și pe megakaryocyte-minute și megakaryoblasts. Definiția acestuia este folosit ca marko

ra cu leucemie acuta megakaryoblastic. Exprimarea lui Ar este absentă sau suprimată la pacienții cu trombastenă Glanzmann.

■ CD95, de asemenea, cunoscut sub numele de Fas sau APO-1 - koprotein Gly-transmembranar, membru al familiei de receptori ai factorului de necroză tumorală.Este exprimat în cantități semnificative în limfocitele T( CD4 + și CD8 +) sângele periferic și, într-o măsură mai mică, B-limfocite și celule NK.Acest Ar este de asemenea exprimat pe granulocite, monocite, celule tisulare și celule neoplazice. Legarea CD95 la ligandul Fas( CD95L) induce apoptoza în celule.

■ CD95L sau ligand de Fas, o proteină de membrană aparținând familiei de receptori ai factorului de necroză tumorală.Acest Ag este exprimat prin limfocite T citotoxice, celule NK și foarte des celule tumorale;inductorul principal al apoptozei în celule.

■ HLA-DR - monomorfă clasa II molecule MHC determinanti om( HLA).Etsya marker exprimat pe celulele Langerhans, celulele dendritice ale organelor limfoide, și anumite tipuri de macrofage, limfocite B, celulele T activate și celule epiteliale timice. Studiați marcator activ utilizat pentru a cuantifica limfocitele T activate cu un fenotip CD3 + HLA-DR +.

folosind anticorpi monoclonali diferiți pentru marker de selecție poate crea celula portret caracteristică fenotipică a acestei forme de leucemie( tabelul A-7-30).

Pe lângă folosirea tehnicilor imunofenotipării pentru diagnostic și diagnosticul diferențial de tumori maligne hematologice, deosebit de important transformat utilizarea lor în procesul de tratament pentru a evalua starea de remisie și populația reziduală a celulelor leucemice. Cunoașterea fenotipic „portret“ de celule blastice în perioada de diagnostic, a acestor markeri poate găsi celule clona leucemice în remisie, și de creșterea numărului acestora - pentru a prezice dezvoltarea de recidivă lungă( timp de 1-4 luni), până trăsăturile sale clinice și morfologice.

Tabelul Caracterizarea imunofenotipice leucemiei [Myers A. R., 1996]

Tabelul Caracterizarea imunofenotipice leucemiei [Myers A. R., 1996]

Tabelul immunophenotype ALL [îmbogățit R. R., 2001]

Tabelul immunophenotype ALL [îmbogățit R. R., 2001]

End Table.

Sfârșitul tabelului.

Notă: lanțul cristalin q q citoplasmatic de țigară;sig q este o suprafață Ig și un lanț.