Przeciwciała przeciwko wirusowi Epstein-Barr w surowicy
Z serologicznych metod diagnozy choroby najczęstszą jest reakcja Paul-Bunnel( aglutynacja), mająca na celu wykrycie heterofilowego AT w surowicy. Miano heterofilnego AT 1: 224 i wyższe w surowicy pacjenta uznaje się za istotne diagnostycznie, potwierdzając rozpoznanie mononukleozy zakaźnej. Heterofilowa aglutynacja jest dodatnia u 60% młodych ludzi po 2 tygodniach i 90% po 4 tygodniach od wystąpienia objawów klinicznych choroby. Dlatego też, aby zdiagnozować mononukleozę zakaźną, potrzeba kilku badań: w pierwszym tygodniu choroby( reakcja może być ujemna) i 1-2 tygodnie później( reakcja może stać się dodatnia).
zawartość przeciwciał heterofilne zmniejsza się po fazie ostrej infekcji, a ich miana można ustalić przez 9 miesięcy od wystąpienia symptomów klinicznych. Reakcja Paul-Bunnel może zmienić się z pozytywnej na negatywną, nawet na tle pozostałych objawów hematologicznych i klinicznych u pacjenta. Czułość metody u dorosłych wynosi 98%, swoistość wynosi 99%.U dzieci z mononukleoza zakaźna w wieku 2 lat heterofilne przeciwciała wykrywa tylko 30% pacjentów, w wieku 2-4 lat - 75% w ciągu 4 lat - ponad 90%.
Czułość metody u dzieci jest mniejsza niż 70%, specyficzność wynosi 20%.Redukcja, a następnie powtarzany wzrost miana heterofilnych przeciwciał może wystąpić w odpowiedzi na inną infekcję( najczęściej w infekcjach wirusowych górnych dróg oddechowych).Odpowiedź Paul-Bunnel nie jest specyficzna dla wirusa Epstein-Barr. Miano heterofilowych AT nie wywołuje reakcji krzyżowej i nie koreluje z konkretnymi AT z wirusem Epstein-Barr, ani nie koreluje z ciężkością przebiegu choroby. Test jest bezużyteczny w diagnozowaniu przewlekłej postaci zakaźnej mononukleozy( dodatni średnio tylko u 10% pacjentów).
Miana 1:56 lub mniej można znaleźć u zdrowych ludzi i pacjentów z innymi chorobami( reumatoidalne zapalenie stawów, różyczka).Fałszywie pozytywne wyniki testu są spotykane bardzo rzadko.
Obecnie metoda "pojedynczego plamki"( aglutynacja szkiełkowa) jest stosowana do określenia AT dla erytrocytów tryka, jest on początkowo używany jako test przesiewowy. Według czułości jest to porównywalne z reakcją Paul-Bunnel.Ślizgowe fałszywie pozytywny może wynosić od około 2% do badań( białaczka, złośliwy chłoniak, malaria, różyczki, wirusa zapalenia wątroby, rak trzustki), jak i fałszywie ujemne dorosłych - 5-7% przypadków.
Należy zauważyć, że widmo produkowane przez firmy zestawy diagnostyczne na podstawie oznaczania miana przeciwciał jest bardzo szeroki, więc konieczne jest, aby skupić się na miano diagnostycznego przeciwciał, określony w instrukcji do systemu testowego.
Jeśli heterofilne przeciwciała nie są identyfikowane, a obraz kliniczny odpowiada mononukleoza zakaźna, konieczne jest zbadanie surowicy dla konkretnych przeciwciał IgM i IgG.Do wykrywania przeciwciał swoistych dla wirusa Epsteina-Barr zastosowaniem pośrednich metod immunofluorescencyjnych( pozwalają na wykrycie przeciwciał EA i VCA AR) antialexin-immunofluorescencji( wykrycie przeciwciał EA, VCA i EBNA AR) i IFA.
AT do komponentu EA Ag D( anty-EA-D) pojawiają się nawet w ukrytym okresie pierwotnej infekcji i szybko znikają wraz z odzyskiem.
AT do składnika EA Ag( anty-EA-R) można wykryć 3-4 tygodnie po klinicznych objawach choroby. Utrzymują się w surowicy krwi przez około rok, często wykrywane z nietypowymi lub przewlekłymi prądami zakaźnej mononukleozy. Zazwyczaj te AT występują w przypadku chłoniaka Burkitta.
AT do klasy IgM klasy VCA( IgM anty-VCA) pojawiają się bardzo wcześnie, zwykle do objawów klinicznych, są wykrywane na początku choroby w 100% przypadków. Wysokie miana występują w 1-6 tygodniu od początku infekcji, zaczynają zmniejszać się od 3 tygodnia i zwykle znikają po 1-6 miesiącach. Anty-VCA IgM prawie zawsze występuje w surowicy z aktywną infekcją, więc metoda ich wykrywania jest bardzo wrażliwa i specyficzna dla ostrego epizodu zakaźnej mononukleozy.
AT na IgG klasy VCA( IgG anty-VCA) może pojawić się wcześnie( w ciągu 1-4 tygodni), ich liczba osiąga wartości szczytowe do 2 miesiąca choroby. Na początku choroby występują w 100% przypadków. Tylko 20% pacjentów wykazało 4-krotny wzrost miana w badaniu sparowanych surowic. Miano zmniejsza się po wyleczeniu, ale występuje w ciągu kilku lat po przeniesieniu zakażenia, a zatem jest bezużyteczne w diagnozowaniu zakaźnej mononukleozy. Obecność przeciwciał IgG przeciwko VCA wskazuje na stan po infekcji i odporności.
Przeciwciałado EBNA( anty-EBNA) wszystkie się później, są rzadko obecne w trakcie ostrej fazy choroby. Ich zawartość wzrasta w okresie odzysku( 3-12 miesięcy), mogą utrzymywać się we krwi przez wiele lat po chorobie. Brak anty-EBNA, w obecności anty-VCA i IgM anty-EA IgM wskazuje aktualny infekcji. Wykrywanie przeciwciał anty-EBNA po wcześniejszym negatywnej reakcji wskazuje aktualny infekcji. Stosując metodę ELISA może jednocześnie wykrywania obecności przeciwciał anty-EBNA klasy IgM i IgG.Jeśli liczba anty-EBNA IgM anty-EBNA większej IgG, należy mówić o ostrej infekcji, a odwrotna zależność - uprzednio przełożona.
za ostrego zakażenia pierwotnego wskazuje na obecność jednego lub więcej z następujących objawów:
?anty-VCA IgG( wcześnie wykryć, a następnie materiał jest zmniejszony);
?Wysokie miana( większym niż 1: 320) lub 4-krotny wzrost miana anty-VCA IgG choroby;
?przejściowy wzrost miana przeciwciał anty-D-EA( 1:10 lub więcej);
?Wczesne anty-VCA IgG bez anty-EBNA, a później - pojawienie się przeciwciał anty-EBNA.
ostra lub pierwotnej infekcji spowodowanych przez wirus Epsteina-Barr, wykluczono miana anty-VCA i IgG anty-EBNA w surowicy nie ulegają zmianie w czasie badania( w ostrej fazie i odzysku).Stała obecność wczesnego
Ar i IgG anty-VCA wysokich mian wskazuje fazy przewlekłej infekcji.
tabeli. Profile testy serologiczne na różnych etapach mononukleozy zakaźnej.
wykrywania przeciwciał przeciwko wirusowi Epsteina-Barr są stosowane do diagnozowania mononukleozy zakaźnej i przewlekłych zakażeń wywołanych przez wirusa Epsteina-Barra. Przeciwciała
wirusa Epsteina-Barr można wykryć w następujących chorób: wtórnego niedoboru odporności, w tym zakażeń HIV, raka nosowej części gardła, chłoniak Burkitta, infekcji CMV, kiła, choroba z Lyme, brucelozy itp
Ponieważ mononukleozę zakaźną -.ogólnoustrojowa choroba limfoproliferacyjny który rozwija się pod wpływem wielu czynników sprawczych jest bardzo ważne, aby budować taktykę badania takich pacjentów. Rys. Powyższy algorytm jest zastosowanie testów serologicznych pacjentów objawy ostrego mononukleoza.
fig. Algorytm badania pacjentów z podejrzeniem mononukleozy zakaźnej.