Imunogenizmo analizė( PAV) - priežastys, simptomai ir gydymas. MF.
imunosorbento analizės( IFA) - modernūs laboratorijos tyrimo, kurio metu atliekama paieška specifinius antikūnus arba antigenus kraujo konkrečių ligų, kurios turi nustatyti ne tik etiologijos bet taip pat ir ligos stadiją.ELISA rezultatus galima gauti kokybiškai ir kiekybiškai.
Šiuo metu PAV taikomas šiais atvejais:
1) Ieškoti specifinių antikūnų į infekcinės ligos;
2) paieškos antigenai bet ligų( infekcinės ligos, venerinės ligos);
3) paciento hormoninio būklės tyrimas;
4) onkomarkerių tyrimas;
5) egzistavimas dėl autoimuninių ligų.Privalumai
ELISA metodas:
1) aukštos specifiškumą ir IFA jautrumas( daugiau nei 90%).
2) Gebėjimas nustatyti ir stebėti ligos proceso dinamika, t.y. lyginant antikūnų kiekį skirtingų laiko intervalų.
3) ELISA diagnostikos galimybė bet kurioje medicinos įstaigoje. Santykinis trūksta
:
1) aptikimas imuninio atsako( antikūnų), bet ne patogeno.
koncepcijos
Prieš paaiškinti ELISA metodo esmė, trumpai tai suprasti kai sąvokas.
Antikūnai( arba imunoglobulinai - Ig)
limfocitai( imuninių ląstelių) reaguojant į atvykimo į infekcinės ligos sukėlėjo( viruso, bakterijų, grybelių, ir tt) kūno. Išskirti imunoglobulino A( IgA), imunoglobulino E( IgE), imunoglobulino M( IgM), imunoglobulino G( IgG), imunoglobulino D( IgD).Jie skiriasi vienas nuo kito ir sudaro molekulinė masė Pusamžis dalyvavimo / nonparticipation į infekcinių procesų, aptikti laiką nuo infekcijos metu. Jei mes manome, molekulinė masė, labiausiai jis IgM - yra pentamero( 950,000 da), priešingai nei iš Ig poilsio( nuo 150 iki 200 000 Da), todėl IgM tiesiog negali praeiti pro placentos barjerą.Todėl IgM nustatymas į vaikų 1 metų gyvenimo visada yra infekcinės ligos požymis ir vaisiui. Serumo imunoglobulinų didžioji dalis yra atstovaujama IgG( 75-85%), o mažiausias - IgE( 0003%).Infekcinių procesas tiesiogiai dalyvauja atsižvelgiant tik IgA, M, G. IgE yra alerginių reakcijų ir sąlygomis ženklas ir IgD - galima aptikti tik limfmazgiuose ir tonzilių audinio, vaidina svarbų vaidmenį vietos imuniteto susidarymą.
imunoglobulinų klasėms
Antigenai - didelės molekulinės masės organinių medžiagų, ypač infekcinių patogenų ir kitų ligų, taip pat skirtingų medžiagų modifikuotos ląstelės, pagaminti tam tikra liga, autoimuninė( liga, vėžys).
imuninio komplekso - antigenas-antikūnų dalyvauja imuninės proceso. Koks yra IFA metodas?
kad keletas skirtingų ELISA veislių( tiesioginis, netiesioginis, blokuoja metodas konkurentu), tačiau praktikoje dažniausiai naudojamas heterogeninę fermentinis imunologinis arba ELISA( IMUNOFERMENTINĖS)
pagrindas imunoanalizės imuninį atsaką antigeno ir antikūno, kad sudarytų imuninio komplekso: antigenądvispecifiniai antikūnai, ir dėl to nuo fermentinio aktyvumo konkrečių ženklų ant antikūno paviršiaus kaita. Metodas
IFA
Trumpai tariant, šis procesas gali būti suskirstyti į keletą etapų:
1) Remiantis tuo, gydytojas duobučių plokštelės paviršiaus, ekspertas yra išgrynintas antigenas specifinio patogeno. Kai pridedant biologinę medžiagą( kraujo serume), skirto paciento, specifinei reakcijai įvyksta tarp antigeno ir antikūno norimą( imunoglobulino).Šis junginys veiks kaip "specialus antigenas" kitame etape.
2) Šiuo formavimo etape yra IR( imuninės kompleksai) - tarp "specifinio antigeno" ir konjugato reakcija( tai imunoglobulino pažymėtas peroksidazės fermento).Įtrauktas specialus chromogenas.Šio fermentinės reakcijos rezultatas yra spalvotų medžiagų formavimąsi plokštelės, spalva intensyvumas, kuris priklauso nuo pacientų imunoglobulinų( antikūnų), sudarančius medžiagos skaičius gręžinių.
3) Toliau iš eilės aiškinimą: fotometrija naudojant spektrofotometrą daugiakanalį lyginant optinį tankį bandomosios medžiagos, turinčios optinį tankį kontrolinių pavyzdžių, matematinių apdorojimo rezultatų.Antikūno kiekis paciente priklauso nuo optinio tankio šulinių aukščio.
įprasta naudoti 96 duobučių plokštelėse. Antikūnų
suma( arba koncentracija) tam tikroje tūrio vienetui, kai matuojant optinį tankį,( OT) mėginio tirpalo, yra apskaičiuojamas. Rezultatas palyginamas su kontroliniu pavyzdžiu.
reikia prisiminti: kiekvieno bandymo sistema, sukurta siekiant atsižvelgti į atskirų veiklos rezultatų, veiklos standartus ir patologijos( ty "pamatinei vertei").Tai turėtų būti laikoma, kai vertinant kiekvieno atvejo tyrimo rezultatai. Teisingai interpretuoti laboratorinių "referencines vertes" kitos laboratorijos rezultatus. Taip pat neteisinga lyginti rezultatus skirtingose laboratorijose kartu. Nustatant
ELISA reakcijas ir turi vertę, pvz koncepciją kaip antikūnų trauka.Łapczywość
antikūnas - tai antikūną antigeną surišantis jo stiprumas ir antigeno, esančio tarpusavio su immnoglobulinami( antikūnų) suma. Trauka yra labai svarbi vertinant tariamą infekcijos termino, kuris yra labai svarbus pirminės infekcijos diagnozę nėščioms moterims.
pagrindas antikūnas Łapczywość Bandymas susideda iš gydymo imuninio komplekso( antigeno-antikūno) karbamido tirpalu, siekiant suardyti baltymą.Vysokoavidnye nuorodos lieka nepaliesti, ir mažai Łapczywość sunaikinta. Rezultatas yra pateikiamas kaip surišimo gebą indeksą, išreikštas procentais( %).
Kokios ligos yra aptinkamas ELISA diagnostika?
1. infekcinės ligos
1,1 Virusinis hepatitas A( IgM, G), B antigenų -HBsAg, HBeAg, antikūnų - IgM HBcorAg, Ig bendrą HBcorAg, IgG HBeAg), C( antikūnų Ig M, G HCV), D( IgM,G), LT( Ig M, G), ir kt.
1,2 ŽIV infekcija( IgG)
1,3 citomegalovirusinė infekcija( antikūnai IgM, G)
1,4 Epstein-Barr infekcija arba mononkleoz( antikūnas IgM, G, kad EA, VCA, NA baltymai viruso)
1,5 Herpetic infekcijos( antikūnas IgM, G)
1,6 toksoplazmozė( antikūnas IgM, G)
1,7 raudonukės( IgM, G)
1,8 Tymų( IgM, G), Brucella( IgM, G), pseudotuberculosis( IgM, G), SALMONELIOZĖ( IgM, G), šigeliozės arba dizenterija(IgM, G), aspergiliozės( IgM, G), Erkinis encefalitas, boreliozė, ir daugelis kitų.
1,9 parasitosis( lambliozė, toxocariasis, Trychinoza, opistorhoz, echinokokozė, alveococcosis ir kiti), kurioje aptikta IgG
1.10 STD( lytiniu keliu plintančių ligų per) - mikoplazmozė( IgM, G), Ureaplasmosis( IgM, G), Chlamydia( IgA, M, G), sifilio( IgG)
1.11 Helicobacter infekcija( IgG)
2. žymenys autoimuninės ligos ir žmogaus imuniteto indeksų ( bendrojo IgE, kad bendras IgG, kad bendras IgA, kad bendras IgM, kad bendras IgD, sekrecijos IgA, IgG 2, IgG4, CRC cirkuliuojančių imuninių kompleksų, IgA ir IgG antikūnų prieš gliadinų ir kiti)
3. Onkologichsekie žymekliai ( FNApie - naviko nekrozės faktoriaus, CEA - karcinoembrioninius antigeno PSA - prostatos specifinio antigeno, žCG - žmogaus chorioninio gonadotropino, CA 125, alveomutsin ir daugelis kitų)
4. Reprodukcinės sistemos sutrikimai aš( estradiolis, progesteronas, prolaktinas, testosteronas, AFP AFP-FSH - folikulus stimuliuojančio hormono ir kiti)
5. ligos skydliaukės( laisvą ir surištą T3, T4, tiroglobulinas, skydliaukės peroksidaze - TPO, skydliaukę stimuliuojančio hormono - TTG).
Šis sąrašas dar ne visos ligos yra diagnozuotos ELISA.
medžiaga IFA analizė ir taisyklė tvora
Dažniausiai medžiaga ELISA reakcija - tai paciento serume, esant tuščiam skrandžiui. Medžiaga taip pat gali tarnauti kaip galvos ir stuburo smegenų skysčio, amniono, stiklakūnio turinį, gleivių iš gimdos kaklelio kanalą ir šlaplės tamponų.
paruošimas pacientai dėl medžiagos pristatymo IFA
Kraujas imamas ant tuščio skrandžio. Prieš pristatant kraujo nereikia imtis jokių narkotikų.Specialus gydymas( antibakterinis, antivirusinis, parazitų ir tt) turi būti sustabdytas ne mažiau kaip 2 savaitėms iki tyrimo.
gamybos IFA Datos
Fermentinis imuninis tyrimas atliekamas greitai, per dieną.Dėl tam tikrų serumų kiekio kaupimosi gali atsirasti vėlavimas skirtingose laboratorijose. Galimas rezultatai
IFA diagnostikos
Vertinant rezultatus dėl konkretaus infekcijos svarbu klasės antikūnai aptinkami ir jų skaičių.Jis veikia ne tik infekcijos etiologija klausimą( ty jis ar ne), bet apskaičiuota ligos stadijoje( ūminis ir lėtinis), taip pat aktyvaus infekcijos buvimą( ūminis arba paūmėjęs lėtinis) prie tyrimo metu.
Kokie yra apytiksliai antikūnų( imunoglobulinų-Ig) atsiradimo terminai?
Ankstyvieji antikūnai yra IgM .Nustatyti jų gali būti 1-3 savaites po galimo užkrėtimo, kuris būdingas ūminei infekcinio proceso fazei. Antroji situacija su IgM antikūnų atsiradimu yra lėtinio proceso aktyvinimas( arba paūmėjimas).IgM antikūnai cirkuliuoja vidutiniškai apie 3 mėnesius, tada jų skaičius palaipsniui išnyksta. Tačiau kai kuriems pacientams IgM pėdsakai gali būti nustatomi per 1-2 metus nuo infekcijos.
Šiuolaikinės bandymų sistemos yra labai jautrios, todėl gaunami nespecifiniai klaidingai teigiami rezultatai( dažnai nėščioms moterims).Todėl šioje pacientų grupėje reikia iš naujo patikrinti teigiamą IgM!
IgA antikūnai pasirodo 2-4 savaites po infekcijos, bet kiekį, pakankamą nustatyti, per mėnesį.Serumo IgA sintetinamas plazmos ląstelių blužnies, limfmazgių ir gleivinės sekrecijos IgA koncentruotos su gleivine atlikti savo apsauginę funkciją - dalyvauti vietos imunitetą.
Nuo 4-os savaitės po infekcijos pradeda atsirasti antikūnai IgG .Daugumoje infekcijų jų titras palaipsniui didėja didžiausią laiką skirtingais laikais( vidutiniškai po 1,5-2 mėn.), Tada titeris išlieka žemas ir rodo imunitetą.Be kai kurių ligų( mikoplazmozė, chlamidijos, trichomonozė) IgG lygis nėra aukštas, yra gerokai sumažintas dėl imuniteto šių infekcijų trūkumo.Įgyvendinimo variantai
Antikūnų skirtingų klasių:
- atskiri IgM antikūnų aptikimo reiškia
pirminę infekciją.
- vienu metu aptikti kraujo IgM ir IgG būdingą
pirminės infekcijos ankstesnių 2-3 mėnesius, taip pat paūmėjimas lėtinės ligos. Todėl nėštumo metu IgM buvimas ne visada yra pirminės infekcijos požymis.
. Išskirto IgG nustatymas gali rodyti ir imunitetą ligai,
ir lėtinę infekciją.Antrojoje situacijoje taip pat svarbus antikūnų skaičius( titeris), o šio titro pokytis yra dinamikoje. Paprastai tyrimai atliekami 2-4-6 savaičių intervalais.
. IgA išskyrimas ar IgM nustatymas rodo pirminę infekciją.Su
manoma, kad IgA ir IgG pasirodys lėtinėmis infekcijomis( vidutiniškai po 2 savaičių nuo paūmėjimo).
apibrėžimas polinkį IgG antikūnai yra puikus priedas prie diagnostikos etape pirminės infekcijos nuo seniai infekcija, kuri turi savo klinikinę reikšmę, ypač kai vertinant gimdos infekcija vaisiui riziką.Žemo lygio IgG nustatymas rodo pirminę infekciją ir nustatomas vidutiniškai 4-6 mėnesius po infekcijos, rečiau - ilgiau. Mažos dozės IgG reikalauja kitų laboratorinių pirminės infekcijos( IgM) įrodymų.Aukšti antikūnai yra arba lėtinės ligos požymis, ir jo sustiprėjimas, arba susidaręs imunitetas.
ypač kūdikiams: vaikams iki vienerių metų, o kartais net 1,5 metų kraujyje cirkuliuojančių motinos IgG antikūnų įvairių infekcijų( ty, ten buvo jų skvarba per placentą iš motinos vaisiui gimdoje).Tai savaime nėra infekcijos ženklas dabartyje. Jei ne takjm amžiaus aptikti IgM( Primenu, kad motinos IgM placentą negali), tai yra infekcijos ar vaisiaus infekcijos įgytą po gimimo ženklas.
kiekybinis ELISA metodas
ELISA diagnostikos rezultatai( naudojant imunofermentiaim analizatorių) išduodamas konkrečiais vienetais:
- optinis tankis( OT) mėginio - į specifinį antikūną kiekis tūrio vienetui koncentraciją.Kuo didesnė OP mėginys, tuo didesnė antikūnų koncentracija. Kai kurie rezultatai nurodo teigiamumo koeficientą( KP) - taip pat yra ir optinis tankio dydis.
- antikūnų koncentracijos vienetai( nanogramai / mililitre arba ng / ml).
- į titras serume: 01:20, 01:40, 1: 100, 1: 200, 1: 400, 1: 800, 1: 1200 ir taip toliau. Skirtingos ligos diagnostiniai titrai( kai diagnozuojama liga, o ne infekcijos faktas) skiriasi.
- į simbolių forma - "+", "-"( +, ++, +++ ++++) "?".
- Be kokybinio vertinimo kriterijaus vertės( teigiamų arba neigiamų).
teisingai įvertinti antikūnų variantas imunoglobulinų klasių identifikavimo sumą, ir, atitinkamai, atskleisti ligos stadiją ir dėl Tik gydytojas gali gydyti reikia.
Negalima pamiršti, kad bet kokioje bandymų sistemoje yra sukurtos jų "pamatinės vertės"( normos variantai), kai viršijama, kuri diagnozuojama viena ar kita liga( patologijos variantai).Skirtingų bandymų sistemų "pamatinės vertės" yra skirtingos.
Teisingas lyginant ELISA rezultatus, atsižvelgiama laikui bėgant, galima tik tuo atveju, jų gamybai toje pačioje laboratorijoje.
gydytojas infekcionistas Bykova N.I.