Biološka varijacija
Rezultati laboratorijskih istraživanja podložni su utjecaju biološke i analitičke varijacije. Ako analitička varijacija ovisi o uvjetima ispitivanja, veličina biološke varijacije je iz čitavog niza čimbenika. Ukupna biološka varijacija istraživanih parametara, zbog intraindividualna varijacija promatrane u istoj osobi kao rezultat utjecaja bioloških ritmova( različito doba dana, godine) i interindividualne varijacije uzrokovane obje endogenih i egzogenih čimbenika, od kojih je glavna su prikazani na slici.
Biološki čimbenici( fiziološki čimbenici, okolišni čimbenici, uvjeti uzorkovanja, toksični i terapeutski čimbenici) mogu utjecati na rezultate laboratorijskih istraživanja. Neki od njih mogu uzrokovati stvarna odstupanja rezultata laboratorija od referentnih vrijednosti izvan povezanosti s patološkim procesom [Menshikov VV, 1995].Ti čimbenici uključuju sljedeće.
■ Fiziološki obrasci( utjecaj rase, spola, dobi, tipa konstitucije, prirode i količine uobičajene aktivnosti, prehrane).
■ Utjecaj okoliša( klima, geomagnetski čimbenici, doba godine i dana, sastav vode i tla u staništu, društvenom i domaćinstvu).
Sl. Slijed procjene rezultata laboratorijskih studija
Sl. Sekvenca Rezultati procjena
laboratorijskim istraživanjima ■ Utjecaj stručne i kućanske otrovne materije [alkohola, nikotina, lijekovi) i jatrogene učinak( dijagnostičke i terapijske postupke za lijekove( PM)].
■ Stanje uzorkovanja( unos hrane, tjelesna aktivnost, položaj tijelastres tijekom uzorkovanja, i dr.).
■ uzorkovanja krvi postupak( postupak uzimanja, alata i pribora, konzervansi i slično).
■ Nepravilno( u vremenu) u ograde materijala.
■ uvjetima( temperatura, miješanje,učinak svjetla) i transport biološkog materijala za istraživanje u laboratoriju.
Sl. Čimbenici koji utječu na biološku varijaciju [Garanina EN 1997.].
Sl. Čimbenici koji utječu na biološku varijaciju [Garanina EN 1997].
uzeti u obzir učinak najvažnijih čimbenika na rezultate laboratorijskih testova.
jela. Dijeta sastav unosa hrane, slomi ulaz imati značajan utjecaj na nizu pokazatelja laboratorijskih testova. Nakon 48 sati posta, koncentracija bilirubina u krvi može se povećati. Gladovanje kroz 72 sata smanjuje koncentraciju glukoze u krvi zdravih ljudi i 2,5 mmol / l( 45 mg%), povećava koncentraciju
triglicerida( TG), slobodne masne kiseline, bez značajne promjene koncentracije kolesterola( LDL) [Statland BE sur1973].
Upotreba masne hrane može povećati koncentraciju kalija, TG i alkalne fosfataze. Djelovanje alkalne fosfataze u takvim slučajevima može se posebno povećati kod osoba s O ili B krvnom skupinom [Remes K. et al., 1994].Fiziološke promjene nakon unosa masne hrane u obliku hiperkomikronemije mogu povećati zamućenost krvnog seruma( plazme) i time utjecati na rezultate mjerenja optičke gustoće. Povećanje koncentracije lipida u serumu može biti nakon što je pacijent konzumirao maslac, kremu ili sir, što će dovesti do lažnih rezultata i zahtijevat će ponovnu analizu. Potrošnja velike količine mesa, tj. Hrane bogate bjelančevinama, može povećati koncentraciju uree i amonijaka u serumu, uratu u mokraći. Hrana s visokim udjelom nezasićenih masnih kiselina do zasićenih može uzrokovati smanjenje koncentracije kolesterola u serumu, a hrana bogata purinima uzrokuje povećanje koncentracije urata. Banane, ananas, rajčica, avokado bogati su serotoninom. Kada se upotrebljavaju 3 dana prije testiranja urina za 5-hidroksiindoleoctenu kiselinu, čak i kod zdrave osobe, njegova koncentracija može biti povećana. Pića bogata kofeinom, povećavaju koncentraciju slobodnih masnih kiselina i uzrokuju oslobađanje kateholamina iz adrenalina. Unos alkohola povećava koncentraciju laktata, mokraćne kiseline i TG u krvi.
Opće pravilo za isključivanje utjecaja unosa hrane na rezultate laboratorijskih testova je prikupljanje krvi nakon 12 sati posta.
Vježba.Fizikalno opterećenje može imati prolazno i dugoročno djelovanje na različite parametre homeostaze. Prolazne promjene uključuju prvo se smanjuju i povećavaju koncentracije slobodnih masnih kiselina u krvi, čime se povećava do 180% koncentracije amonijaka i 300% - laktat, povećana aktivnost kreatin kinaze( CK), aspartat aminotransferaza( AST), laktat dehidro-dehidrogenaze( LDH) [Garza D., Becan-McBride K., 1989].Fizičke vježbe aktiviraju zgrušavanje krvi, fibrinolizu i funkcionalnu aktivnost trombocita. Promjene u tih pokazatelja su povezane s aktivacijom metabolizma, oni obično vraćaju na početne vrijednosti( prije vježbanja) vrijednosti ubrzo nakon prestanka fizičke aktivnosti. Ipak, djelovanje nekih enzima( aldolaza CK, AST, LDH) može ostati povišen za 24 sata nakon 1 sata napornog vježbanja. Produžena vježbanje povećava koncentraciju u krvi spolnih hormona, uključujući testosteron, Andros tendion i luteinizirajući hormon( LH) [Henry J. B., 1996].
Emocionalni stres može izazvati prolazno leukocitoza, smanjena koncentracija željeza i promjene u razini kateholamina u krvi. Jaka zabrinutost slijedi hiperventilacija, uzrokuje neravnoteža kiselina-baza stanje( CBS), s rastućim koncentracijama laktata i masnih kiselina u krvi.
Drugi čimbenici. Među ostalim čimbenicima koji utječu na rezultate istraživanja važni su cirkadijurni ritmovi homeostaze, dob, spol, trudnoća, zemljopisni položaj terena, nadmorska visina, temperatura okoline, pušenje. Pušači
se može povećati koncentracija karboksihemoglobina( HbCO), kateholni novi kortizola u plazmi i serumu. Promjene koncentracija tih hormona često dovode do smanjenja broja eozinofila, a sadržaj neutrofila, monocita i slobodnih masnih kiselina povećava. Pušenje povećava koncentraciju hemoglobina( Hb), count eritrocita, prosječni volumen eritrocita( MCV), te smanjiti broj leukocita. U svezi s tim, preporučuje se da laboratoriji utvrde svoje lokalne referentne vrijednosti za svoje stanovništvo.
Da bi se smanjio utjecaj smanjenih čimbenika na rezultate testa, prije vađenja krvi za istraživanje je potrebno da se suzdrže od naporne vježbe i prijem alkohola, promjene u prehrani za 24 sata. Pacijent ne smije jesti nakon večere, on treba da ide u krevet uoči neuobičajeno zavrijeme porasta i to je najkasnije 1 sat prije uzimanja uzoraka krvi [Alstorm T. et al., 1993].Preporučuje se prikupljati krv od pacijenta u ranim jutarnjim satima nakon 12 sati preko noći brzi( osnovica), što omogućava maksimalnu standardizirane uvjete istraživanja.
Lijekovi. Neki lijekovi mogu imati značajan utjecaj na rezultate istraživanja. Na primjer, acetilsalicilna kiselina pri utvrđivanju trajanja vremena prijema krvarenja Duque treba otkazati 7-10 dana prije istraživanja, inače patološki rezultat može se dobiti. Ako su primili lijekove pacijent može utjecati na rezultat analize, a kada se ne može otkazati mora obavijestiti laboratorij.
Učinak lijekova na rezultate laboratorijskih istraživanja može biti dvije vrste.■
fiziološki efekt in vivo( kod pacijenta) lijekovi i njihovi metaboliti.
■ Utjecaj in vitro( na kemijskoj reakciji se koristi za određivanje indeksa) zbog kemijskih i fizikalnih svojstava lijekova( interferencije).
fiziološke učinke lijekova i njihovih metabolita na mnoge načine poznate u praksi. Razmislite vrijednost smetnji, tj uplitanja stranih faktora u analizi. Smetnje
može biti uzrokovan prisutnošću u uzorku biološkog materijala oba endogene i egzogene tvari. Glavni endogeni faktori interferencije uključuju sljedeće.
■ hemolize, tj raspad eritrocita u prinosu od tekućeg dijela krvi niza intracelularnih komponenata( Hb, LDH, kalij, magnezij, itd), koji mijenja stvarni rezultati određivanja koncentracije / aktivnosti krvnih komponenata poput bilirubin, lipaze CC, LDH, kalij, magnezij i dr.
■ lipemija narušava rezultate nekoliko kolorimetrijskim i Nephele-milimetarski tehnike( posebno za proučavanje fosfora, ukupnog bilirubina, mokraćna kiselina, ukupnog proteina, elektrolitima).
■ paraproteinemia uzrokuje promjene u rezultatima određivanja nekim postupkom fosfati, uree kk, LDH, amilaza.
Najčešći vanjski interferirajući čimbenici su lijekovi ili njihovi metaboliti. Dakle, određivanje kateholamina u urinu Flourimetriiska metoda intenzivnog fluorescencije može uzrokovati pacijent primio tetraciklin;propranolol metabolit 4-gidroksipropranolol ometati određivanje metodama bilirubin Yendrassika Grau i F-Evelyn blag.
Identificirati miješanje lijekova - jedan od zadataka liječnika kliničke laboratorijske dijagnostike. Važan korak u rješavanju ovog problema je kontaktiranje kliničara kako bi se otkrila priroda lijekova koje je pacijent uzeo.
Položaj tijela s uzorkovanjem krvi također utječe na niz podataka. Dakle, promjena položaja bolesnika ležećeg stava stoji ili sjedi rezultate u prodor vode i hidrostatski filtrirati tvari iz intravaskularne na intersticijski prostor. Tvari koje imaju visoke molekulske mase( proteini), i crvenih krvnih stanica sa srodnim tvarima ne odvijaju u tkivima, te njihova koncentracija u krvi povećava( enzimi, ukupni protein, albumin, željezo, bilirubin, kolesterol, trigliceridi, PM srodni proteinikalcij).Koncentracija Hb, Ht i broja leukocita može se povećati.
mjesto i tehnika uzorkovanja krvi također može imati značajan utjecaj na rezultate laboratorijskih testova( na primjer, oklop overlay za razdoblje duže od 2 minute, kada uzimanje krvi iz vene mogu izazvati hemoconcentration i povećane koncentracije u krvi proteina, faktora koagulacije, održavanje staničnih elemenata).Najbolje mjesto uzimanja krvi za testiranje je ulnarna vena. Također treba napomenuti da je venska krv - najbolji materijal, ne samo za određivanje biokemijskih, hormonska, serološke, imunološke parametre, ali i za klinička ispitivanja. To je zbog činjenice da je trenutno u upotrebi hematoloških analizatora s kojima je podvrgnut kliničkim krvi( brojanje stanica određuju Hb, HT, itd), dizajniran za korištenje s venske krvi, a većina ih je u zemljama u kojima se proizvode,oni su certificirani i standardizirani da rade samo s venskom krvi. Kalibracijski i kontrolni materijali koje proizvode tvrtke su također dizajnirani za umjeravanje analizatora krvi za vensku krv. Osim toga, kada se krv crtež iz prsta mogući broj metodičkih mogućnosti koje standardizirati vrlo teško( hladna, cijana-Cal edematous prstima, potreba za razrjeđivanje krvi koji se ispituje i dr.), Što rezultira znatnim varijacijama u dobivenim rezultatima i kao posljedica - uPotreba za ponavljanim studijama kako bi se pojasnio rezultat. Za opći klinički pregled preporučuje se da se krv prsta poduzme u sljedećim slučajevima.
■ Za opekline koje zauzimaju veliki dio tijela pacijenta.
■ Ako pacijent ima vrlo male vene ili mali pristup njima.
■ Uz tešku pretilost pacijenta.
■ S osjetljivosti na vensku trombozu.
■ U novorođenčadi.
Razdvajanje arterije za uzimanje krvi rijetko se koristi( uglavnom za proučavanje sastava plina arterijske krvi).
Vrijeme i uvjeti prijenosa uzoraka biološkog materijala također imaju važnu ulogu u osiguravanju kvalitete rezultata laboratorija. Prilikom isporuke materijala u laboratorij, uvijek je potrebno zapamtiti značajke nekih uzoraka. Na primjer, prilikom prikupljanja krvi iz arterije za ispitivanje posuda sastavu plina u krvi trebaju biti dobro zapečaćena, uronjen u ledenu vodu, a što je prije moguće doveo u laboratoriju, jer glikoliza u crvenih krvnih stanica i leukocita uzrokuje smanjenje pH kada je uzorak će biti oko 20 minuta na sobnoj temperaturi, Ti se zahtjevi također moraju promatrati u proučavanju kapilarne krvi koja se primjenjuje na heparinizirane kapilare. Krv za studije na adrenocorticotropic hormona( ACTH), angiotenzin I, II, renina treba biti odmah nakon ograde i stavljen u led što prije doveo do laboratorija.
Općenito, kako bi se izbjeglo utjecaj privremenog faktora na rezultate testa, materijal isporuka bi trebala biti izvedena u laboratoriju što je prije moguće. Ranije serum odvojen iz crvenih krvnih stanica, to je manji utjecaj glikolize( što znači da će biti manji učinak na koncentraciju glukoze, fosfor, i aktivnost određenih enzima).Koncentracija bilirubina u krvi se smanjuje pod utjecajem svjetlosti( posebno jakog sunčevog svjetla).Učinak svjetlosti također povećava aktivnost alkalne fosfataze. Faktor vremena također je vrlo važan za bakteriološke studije( neke bakterije umiru na sobnoj temperaturi).
biomaterial Isporuka u laboratoriju trebaju biti unutar intervala prikazanih u tablici. . Kada se promatra ih vodi kako bi se smanjili negativan utjecaj privremenog faktora na laboratorijskim rezultatima.
Tablica 1-1.Vrijeme isporuke u laboratorij [Garza D., Becan-McBride K., 1989]
Tablica 1-1.rokovi isporuke uzoraka u laboratoriju [Garza D., Becan-McBride K., 1989]
tih vremena standardi isporuke mora znati svakog kliničara. Uz njihovo kršenje zahtijeva ponovno uzorkovanje, kao da se isključi utjecaj vremenskog faktora na razlike u rezultatima istraživanja nije moguće.
Uz sve gore navedeno, količina biološke varijacije ovisi o fiziološkoj funkciji koju tijelo provodi pomoću analita. Najmanji varijacija karakteristika biološke tvari, najvažniji za stabilnost pripravka i volumena izvanstanične tekućine i krvi( natrij klorid, kalcij, magnezij, albumin, ukupni proteini, ugljičnog dioksida).Varijacija prosječnog stupnja je karakteristična za tvari koje su uključene u procese anabolizma( glukoza, kolesterol, fosfor).Posjeduju najveći bioloških varijacija komponente serumu koje su krajnji produkti katabolizma( mokraćna kiselina, ureu, kreatinin), kao i tvari i enzimi su izolirani iz tkiva [LDH, AST, alanin aminotransferaze( ALT), itd].