Restriktsioonifragmendi pikkuse polümorfismi analüüs
Erinevate restriktsiooni endonukleaaside laiaulatuslik kasutamine kromosomaalse DNA analüüsimisel näitas inimese genoomi tohutut varieeruvust. Isegi väikesed muutused kodeerimine ja regulatoorsed regioonid struktuursete geenide võib viia lõpetamise spetsiifilise valgu sünteesi või kaotusele oma funktsiooni inimorganismis mis tavaliselt mõjutab fenotüüpi patsiendile. Kuid umbes 90% inimese genoom koosneb mittekodeerivas järjestusi, mis on muutlikud ning pakuvad hulga niinimetatud neutraalsed mutatsioonid või polümorfismi ja pole fenotüübi avaldumist. Selliseid polümorfseid saite( loci) kasutatakse geneetiliste markeritena pärilike haiguste diagnoosimiseks. Polümorfsed lookused esinevad kõigis kromosoomides ja on seotud
geeni spetsiifilise saidiga. Olles kindlaks teinud polümorfse lookuse lokaliseerimise, on võimalik kindlaks teha, millise genoomi suhtes on seostatud mutatsioon, mis põhjustas haiguse patsiendil.
isoleerimiseks DNA polümorfismi kasutatakse bakteriaalsete ensüümide - restriktaasi, mille saadus on restriktsioonisaite. Polümorfsetes kohtades esinevad spontaansed mutatsioonid muudavad need resistentseks või vastupidi spetsiifilise restriktsiooniensüümi toimel tundlikuks.
Mutatsioonuuringud varieeruvus restriktsioonisaite saab tuvastada pikkuse muutumise restriktsirovannyh DNA fragmentidest nende eraldamine elektroforeesi abil, millele järgneb hübridisatsiooni spetsiifiliste DNA sondide. Kui puudub piiramisest polümorfismi piirkonnas elektroforeesi ühest suuremast fragment ja väiksem fragment on kohal selle olemasolu. Olemasolu või puudumine restriktsioonisaidid identsed lo kusah homoloogilised kromosoomid võimaldab piisavalt usaldusväärselt märgistada mutandi ja normaalse geeni ja jälgida selle edastamise järglastele. Seega, kui DNA patsientide uuringus nii kromosoomidega on restriktsioonikoha polümorfset piirkonda elektrofore-grammine selgitab lühike DNA fragmente. Patsiendid homosügootsed mutatsioon, mis muudab polümorfset restriktsioonisait tehakse kindlaks fragmendid pikemalt ja heterosügootsete - lühikesed ja pikad killud.