Detekce viru hepatitidy C

HCV v materiálu obvykle chybí.

Na rozdíl od HCV sérologické diagnostických metod, kde protilátky proti HCV, PCR může detekovat přítomnost HCV RNA a přímo kvantifikovat jeho koncentrace v testovacím materiálům

le. Test má specifickou specificitu a vysokou citlivost: deset HCV RNA molekul v testovaném materiálu je dostatečné pro jeho detekci. Detekce protilátek proti HCV jen potvrzuje skutečnost, že infekce pacienta, ale nedává indikaci aktivní infekce( vir pro replikaci) a prognózu onemocnění.Kromě toho, protilátky proti HCV detekován v krvi pacientů s akutní a chronické hepatitidy, stejně jako u těch pacientů, kteří jsou nemocní a zpět, a často AT v krvi se objeví jen několik měsíců po začátku klinického onemocnění, takže je obtížné diagnostikovat. Detekce HCV v krvi pomocí PCR je více informativní diagnostickou metodou. Identifikace HCV RNA pomocí PCR důkaz virémie, vypovídá o replikaci viru v těle a je jedním z kritérií pro účinnost antivirové terapie. Detekce HCV RNA pomocí PCR v počátečních stádiích vývoje virové infekce na pozadí úplné absence jakýchkoli sérologických markerů může sloužit jako nejdřívější důkaz infekce. Izolovaná detekce HCV RNA na pozadí úplné absence jiných sérologických markerů však nemůže zcela vyloučit falešně pozitivní výsledek PCR.V takových případech je nutné komplexní hodnocení klinických, biochemických a morfologických studií s opakovaným opakovaným potvrzením přítomnosti infekce PCR.Algoritmus pro diagnostiku HCV metodou PCR je uveden na obr.

velký význam, je použití PCR u pacientů s chronickým HCV, protože většina z nich nemá žádný vztah mezi přítomností virové replikace a aktivity jaterních enzymů.V takových případech pouze PCR umožňuje posoudit přítomnost virové replikace, zvláště pokud je konečný výsledek kvantitativně exprimován. Ve většině případů dochází ke zmizení HCV RNA z krevního séra později než normalizace jaterních enzymů, takže jejich normalizace nemůže sloužit jako základ pro zastavení antivirové léčby.

praktický význam pro detekci HCV RNA pomocí PCR zkoumat nejen krevní sérum, ale také lymfocytů, gepatobioptaty. Viry v játrech mohou být detekovány 2-3 krát častěji než v séru. Při hodnocení výsledků studie krevního séra pro HCV RNA je třeba mít na paměti, že viremie může mít fluktuaci v přírodě( jako je změna enzymatické aktivity).Proto, po pozitivních výsledcích studie PCR, lze získat negativní výsledek a naopak. V takových případech vyřešíte pochybnosti, které vznikají, je lepší vyšetřovat hepatobiobaty.

Detekce HCV RNA v materiálu pomocí PCR se používá pro následující účely:

■ řešení sporných výsledků sérologických studií;

■ diferenciace HCV od jiných forem hepatitidy;

■ detekce akutního stavu onemocnění ve srovnání s přenosem infekce nebo kontaktu;fáze infekce novorozenců ze séropozitivních matek HCV;

■ monitorování účinnosti antivirové léčby.

Všechny výše uvedené znaky hodnocení výsledků a přístupů k diagnostice HCV pomocí PCR jsou relevantní pro jiné infekce.

Metoda PCR umožňuje nejen detekci HCV RNA v testovaném materiálu, ale také stanovení genotypu. Stanovení genotypu viru je velmi důležité pro výběr pacientů s chronickým HCV při léčbě interferonu-alfa a ribavirinu. Laboratorní indikace pro léčbu chronického interferonu alfa HCV jsou následující:

■ zvýšená aktivita transamináz;

■ přítomnost HCV RNA v krvi;

■ genotyp 1 HCV;

■ vysoká viremie v krvi( více než 8x105 kopií / ml).

Nyní je možné kvantitativně stanovit obsah HCV RNA v krevním séru pomocí PCR, který má velký význam pro léčbu interferonu alfa.Úroveň viremie se hodnotí takto: u HCV RNA ze 102 do 104 kopií / ml - slabá;od 105 do 107 kopií / ml - médium, nad 108 kopií / ml - vysoké.Účinná léčba snižuje hladinu viremie.