Polymerázová reťazová reakcia v diagnostike infekčných ochorení

PCR - jedna z metód pre diagnostiku DNA, ktoré umožňujú zvýšiť počet kópií detekovateľné časti genómu( DNA) baktérií alebo vírusov, je miliónkrát za použitia DNA polymerázy. Test pre tento konkrétny genomového segmentu nukleovej kyseliny opakovane násobená( zosilneného), ktorý umožňuje jeho identifikáciu. Po prvé, je molekula DNA baktérie alebo vírusy zahrievaním rozdelená do dvoch reťazcov, potom v prítomnosti syntetizovaných DNA primérov( sekvencie nukleotidov špecifických pre definované genomového) je so väzba s komplementárnym úseky DNA, syntetizuje druhé vlákno nukleovej kyseliny po každého primeru v prítomnosti termostabilné DNA polymerázy, Dve molekuly DNA sa získajú.Proces sa opakuje mnohokrát. Pre diagnózu stačí jedna molekula DNA, to znamená jedna baktéria alebo vírusová častica. Reakciou ďalší krok - syntéza DNA v molekule RNA za použitia enzýmu reverznej transkriptázy - umožnila testovať RNA vírusy, ako je vírus HCV.PCR - trojstupňový proces, opakované cykly denaturácia, nasadanie primérov, syntéza DNA( polymerizácie).Syntetizované množstvo DNA sa identifikuje ELISA alebo elektroforézou.

PCR možno použiť rôzne biologického materiálu - sérum alebo krvnej plazmy, škrabanie z močovej trubice, biopsia, pleurálnej tekutiny, cerebrospinálnej tekutiny, atď.Prvá PCR bola použitá pre diagnostiku infekčných chorôb, ako je HBV, HCV, HBV, CMV infekcie, infekčné sexuálne prenášané infekcie( kvapavka, odpadky diynaya, Myco plazmy, ureaplasmal infekcie), tuberkulóza, HIV, a tak ďalej.d.

PCR výhodou v diagnostike infekčných ochorení než ostatné metódy štúdie je nasledovné:

■ infekčné agens môže byť detekovaná v akomkoľvek biologickom prostredí organizmu, vrátane tých materiálov, získaných biopsiou;

■ diagnostika infekčných chorôb v najskorších štádiách ochorenia;

■ možné kvantitatívne vyhodnotenie výsledkov výskumu( ako je vírus alebo baktérie obsiahnuté v materiáli);

■ vysoká citlivosť metódy;napríklad citlivosť PCR pre detekciu HBV vírusovej DNA v krvi, je 0,001 pg / ml( približne 4h102 kópií / ml), zatiaľ čo citlivosť metódy DNA hybridizáciou za použitia sond rozvetvené - 2,1 pg / ml( približne 7h105 kópií / ml),