Bioloģiskās variācijas
Laboratorijas pētījumu rezultāti ir atkarīgi no bioloģiskās un analītiskās variācijas. Ja analītiskā variācija ir atkarīga no testa apstākļiem, bioloģisko variāciju lielums ir no veselu faktoru kopas. Kopējais bioloģiskā pētīto parametru dēļ intraindividual variācijas un tai pašai personai novērota rezultātā ietekmē bioloģisko ritmu( dažādos diennakts laikos, gadā), un starpindivīdu izmaiņas, ko izraisa gan endogēnās un ārēji faktori, no kuriem galvenais ir parādīts attēlā.
Bioloģiskie faktori( fizioloģiskie faktori, vides faktori, paraugu ņemšanas apstākļi, toksiskie un terapeitiskie faktori) var ietekmēt laboratorijas pētījumu rezultātus. Daži no tiem var izraisīt faktiskas laboratorisko rezultātu novirzes no atsauces vērtībām ārpus savienojuma ar patoloģisko procesu [Menshikov VV, 1995].Šie faktori ietver sekojošo.
■ Fizioloģiskie modeļus( ietekme no rases, dzimuma, vecuma, saskaitīšanas veidu, raksturu un apjomu parastās darbības, uzturs).
■ vides ietekme( klimata, geomagnetic faktori, dienas laiku un gadu, sastāvu ūdens un augsnes šajā labvēlīgajā zonā, sociālo un vietējā vide).
Att. Laboratorijas pētījumu rezultātu novērtēšanas secība
Att. Par izvērtēšanas rezultātiem
laboratorijas pētījumu secība ■ Impact profesionālo un sadzīves toksiskās vielas [alkohols, nikotīns, narkotikas) un jatrogēnu efektu( diagnostikas un terapijas procedūras Medikamenti( PM)].
■ stāvoklis izlases( pārtikas uzņemšana, fiziskā aktivitāte, ķermeņa stāvoklistress laikā paraugu ņemšanas, un citi.).
■ paraugu ņemšanas metode asins( metode uzņemšanos, instrumentiem un piederumiem, konservantus, utt).
■ nepareizs( laika) no žoga materiāls.
■ apstākļi( temperatūra, trīce,efekts gaismas) un transportēšana uz bioloģisko materiālu pētniecības laboratorijā.
att. Faktori, kas ietekmē bioloģiskā daudzveidība [Garanina EN 1997].
att. Faktori, kas ietekmē bioloģiskā daudzveidība [Garanina LV, 1997].
apsvērt ietekmi svarīgākajiem faktoriem, par laboratorijas testu rezultātiem.
ēdieni. diētu sastāvu pārtikas devu, pārtraukumus viņas uzņemšanu, ir būtiska ietekme uz vairākiem rādītājiem laboratorijas testiem. Pēc 48 stundām tukšā dūšā bilirubīna koncentrācija asinīs var palielināties. Badošanās par 72 h samazina glikozes koncentrāciju asinīs veseliem cilvēkiem un 2,5 mmol / l( 45 mg%), palielina
koncentrāciju triglicerīdu( TG), brīvās taukskābes, bez būtiskām izmaiņām holesterīna koncentrācijas( ZBL) [Statland BE et al., 1973].
Taukskābju pārtikas lietošana var palielināt kālija, TG un sārmainās fosfatāzes koncentrāciju. Sārmainās fosfatāzes aktivitāte šādos gadījumos var īpaši palielināties cilvēkiem ar O vai B asins grupu [Remes K. et al., 1994].Fizioloģiskās izmaiņas pēc ēšanas treknu pārtiku, jo giperhilomikronemii var palielināt( plazmas) asinis duļķainība serumu un tādējādi ietekmēt mērījuma optisko blīvumu rezultātus.lipīdu koncentrāciju Palielinot asins serumā, var būt pacietīgi pēc ieņemšanas eļļu, krējumu vai sieru, kas būs radīt kļūdainus rezultātus un būs nepieciešams atkārtotā analīzē.
Patērē lielu daudzumu gaļas, tas ir, pārtikas produktus ar augstu olbaltumvielu, var palielināt koncentrāciju amonjaka un urīnvielas asins seruma urīnskābes urīnā.Pārtika ar augstu attiecību nepiesātinātie uz piesātināto taukskābju, var izraisīt samazinājumu holesterīna koncentrācijas serumā, un pārtikas produkti bagāti ar purīnu, izraisa koncentrācijas urīnskābe pieaugumu. Banāni, ananasi, tomāti, avokado ir bagāti ar serotonīnu. Ja tos lieto 3 dienas pirms 5-hidroksijindoleetiķskābes pārbaudes urīnā, pat veselam cilvēkam, tā koncentrācija var palielināties. Dzērieni ir bagāti ar kofeīnu, palielina brīvo taukskābju koncentrāciju un izraisa kateholamīnu atbrīvošanos no virsnieru dziedzera. Alkohola lietošana palielina laktāta, urīnskābes un TG koncentrāciju asinīs.
Vispārējais noteikums pārtikas devas ietekmes izslēgšanai no laboratorijas testu rezultātiem ir asiņu savākšana pēc 12 stundu ilgas tukšā dūšā.
vingrinājums. Fiziskajai slodzei var būt gan pārejoša, gan ilglaicīga ietekme uz dažādiem homeostāzes parametriem. Pārejošas izmaiņas ietver pirmo kritumu, un pēc tam palielinās koncentrācijas brīvo taukskābju līmeni asinīs, palielinot par 180% amonjaka koncentrācija un 300% - laktātu, palielināts kreatīnkināzes darbība( CK), aspartāta aminotransferāzes( AST), laktātu dehidro-(LDH) [Garza D., Becan-McBride K., 1989].Fiziskie vingrinājumi aktivizē asins recēšanu, fibrinolīzi un trombocītu funkcionālo aktivitāti. Izmaiņas šiem rādītājiem ir saistīta ar aktivizēšanu metabolismu, viņi parasti atgriežas sākotnējā( pirms izmantošanas) vērtībām, drīz pēc pārtraukšanas fiziskās aktivitātes. Tomēr dažu enzīmu( aldolāzes CK, AST, LDH), var saglabājas paaugstināts 24 stundas pēc 1 stundas treniņa. Ilgstošas izmantot palielina asins koncentrāciju dzimumhormonu, ieskaitot testosteronu, Andros tendion un Luteinizējošā hormona( LH) [Henry J. B, 1996].
Emocionāls stress var izraisīt pārejošu leikocitozi, samazinājās dzelzs koncentrāciju un izmaiņas līmenī kateholamīnu asinīs. Strong bažas seko hiperventilācija, izraisa nelīdzsvarotība skābes bāzes stāvokli( CBS), ar pieaugošu koncentrāciju laktāta un taukskābju līmeni asinīs.
Citi faktori. Starp citiem faktoriem, kas ietekmē pētījuma rezultātus faktori ir svarīgi, diennakts ritmi homeostāze, vecums, dzimums, grūtniecība, ģeogrāfisko atrašanās vietu reljefu, augstums, apkārtējās vides temperatūra, smēķēšana. Smokers var
palielināt koncentrāciju carboxyhemoglobin( HbCO) katehol-jauns plazmas kortizola un serumu. Izmaiņas koncentrācijas hormonu bieži noved pie samazināšanos vairākās eozinofilu, bet satura neitrofilu monocītu un brīvo taukskābju līmeni palielinās. Smēķēšana palielina hemoglobīna( Hb), eritrocītu skaita, vidējais eritrocītu tilpums( MCV), un samazināt skaitu leikocītu. Saistībā ar to ir ieteicams, lai laboratorijas savām iedzīvotāju grupām izveidotu savas vietējās atsauces vērtības.
Lai samazinātu ietekmi samazināto faktoru testa rezultātus, pirms zīmēšanas asinis pētījumiem ir nepieciešams atturēties no treniņa un saņemšanu alkohola, izmaiņas uzturā 24 stundas. Pacients nedrīkst ēst pēc vakariņām, viņam ir jāiet gulēt priekšvakarā parasts parviņa laiku un celties ne vēlāk kā 1 stundu pirms asiņu ņemšanas [Alstorm T. et al., 1993].Ieteicams, lai savāktu asinis no pacienta, kas agri no rīta pēc 12 stundu nakti ātri( sākumā), kas ļauj maksimālu standartizētus pētniecības apstākļus.
Zāles. Dažas zāles var būtiski ietekmēt pētījumu rezultātus. Piemēram, acetilsalicilskābi nosakot uzņemšanas laika ilgumu asiņošanu Duque vajadzētu anulēt 7-10 dienas pirms pētījuma, citādi patoloģisks rezultātu var iegūt. Ja saņemtās pacientu zāles var ietekmēt analīzes rezultātu, un, ja tā nevar atcelt jāinformē laboratoriju.
Zāļu ietekme uz laboratorijas pētījumu rezultātiem var būt divu veidu.
■ Fizioloģiskā ietekme uz zāļu un to metabolītu in vivo( pacienta organismā).
■ Effect in vitro( uz ķīmisko reakciju izmanto, lai noteiktu indeksu) dēļ ķīmisko un fizikālo īpašību narkotikām( iejaukšanās).
Zāļu un to metabolītu fizioloģiskie efekti lielā mērā ir zināmi praktizējošiem cilvēkiem. Apsveriet iejaukšanās vērtību, tas ir, ārēju faktoru iejaukšanos analīzes rezultātos.
Traucējumu var radīt gan endogēno, gan eksogēno vielu biomateriāla klātbūtne paraugā.Galvenie endogēnie traucējošie faktori ir šādi.
■ Hemolīzi, t.i. sadalījums eritrocītiem kura iznākums ir šķidruma daļu no asinīm vairākiem intracelulāras komponentiem( Hb, LDH, kālija, magnija, uc), kas maina reālos rezultātus koncentrācijas noteikšanai / aktivitāti asins komponentu, piemēram, bilirubīnu, lipāzes CC, LDH, kālijs, magnijs un citi.
■ Lipemia kropļo vairāku kolometriskās un Nephele-metriskās paņēmienu rezultātus( it īpaši attiecībā uz pētījumu par fosfora, kopējo bilirubīnu, urīnskābi, kopējo olbaltumvielu, elektrolītu).
■ paraproteinemia izraisot izmaiņas noteikšanas rezultātiem pa dažām metodēm fosfātus, Ureas, KK, LDH, amilāze.
Biežākie exogenous interfering faktori ir zāles vai to metabolīti. Tādējādi pacienta atzītais tetraciklīns kateholamīnu noteikšanai ar fluorimetrisku metodi urīnā var izraisīt intensīvu fluorescenci;propranolola metabolīts 4-gidroksipropranolol traucēt ar bilirubīna noteikšanas metodēm Yendrassika Grau F un Evelyn-trekns.
Lai identificētu narkotiku iejaukšanos - viens no klīniskās laboratoriskās diagnostikas ārsta uzdevumiem. Svarīgs solis šīs problēmas risināšanā ir sazināties ar klīnicistu, lai noskaidrotu pacienta lietotās zāles.
Ķermeņa stāvoklis ar asiņu paraugu ņemšanu ietekmē arī dažādus ierakstus. Tādējādi, mainot pacienta stāvokli, kas atrodas sēžot vai stāvot, rodas ūdens un filtrējošo vielu hidrostatētiska iespiešanās no intravaskulārās vietas intersticiālajā telpā.Vielām, kam piemīt augsta molekulmasa( olbaltumvielas), un sarkano asins šūnu ar saistīto vielu nenotiek audos, lai to koncentrācija asinīs palielinās( enzīmu, kopējo olbaltumvielu, albumīna, dzelzs, bilirubīna, holesterīna, triglicerīdu, PM saistītie proteīni, kalcijs).Hb, Ht koncentrācija un leikocītu skaits var palielināties.
vieta un asins paraugu ņemšanas metode var būt arī būtiska ietekme uz laboratorijas analīžu rezultātiem( piemēram, pārklājuma iejūgs uz laiku, kas pārsniedz 2 minūtes, kad, ņemot asinis no vēnas var izraisīt hemoconcentration un palielinātu koncentrāciju asinīs, olbaltumvielu, asinsreces faktorus, uzturēšanu šūnu elementiem).Vislabākā asiņu paraugu ņemšanas vieta testiem ir ķirurga vēna. Jāatzīmē, ka venozās asinis ir labākais materiāls ne tikai bioķīmisko, hormonālo, seroloģisko, imunoloģisko parametru noteikšanai, bet arī vispārējai klīniskajai izpētei. Tas ir saistīts ar faktu, ka pašlaik lietošana hematoloģiskiem analizatoru, ar kuru piedzīvoja klīnisko asins analīzes( skaitīšana šūnu, kas nosaka Hb, Ht, utt), kas paredzētas lietošanai ar venozo asiņu, un lielākā daļa no tām valstīm, kur tie tiek ražoti,tie ir sertificēti un standartizēti darbā tikai ar venozām asinīm. Uzņēmuma izstrādātie kalibrēšanas un kontroles materiāli ir paredzēti arī venozo asiņu asins analīzes ierīces kalibrēšanai. Turklāt, ja asinis zīmēšanas no pirkstu iespējamu vairāku metodisko funkcijas, kas standartizēt ļoti grūti( aukstā, ciāngrupas cal, tūskas pirkstiem, nepieciešamība atšķaidīšanai asinis tiek pārbaudīts un al.), Kas rada ievērojamu izmaiņas iegūtajiem rezultātiem, un kā sekas - inAtkārtotu pētījumu nepieciešamība, lai noskaidrotu rezultātu. Vispārējai klīniskajai pārbaudei pirkstu asinīs ieteicams lietot šādos gadījumos.
■ Apdegumiem, kas aizņem lielu pacienta ķermeņa daļu.
■ Ja pacientam ir ļoti mazas vēnas vai viņiem ir maz iespēju piekļūt.
■ Ar smagu pacienta aptaukošanos.
■ ar uzņēmību pret venozo trombozi.
■ jaundzimušajiem.
Asins paraugu ņemšanas arteri tiek novērota reti( galvenokārt, lai pētītu arteriālo asiņu gāzes sastāvu).
Bioloģisko materiālu paraugu transportēšanas grafikam un nosacījumiem ir svarīga nozīme arī laboratorijas testu rezultātu kvalitātes nodrošināšanā.Piegādājot materiālu laboratorijā, vienmēr ir jāatceras dažu paraugu īpašības. Piemēram, kad vācot arteriālā asinis izmeklēšanai gāzes sastāva konteiners ar asinīm jābūt labi noslēgta, iegremdē ledus ūdenī, un pēc iespējas ātrāk nogādā laboratorijā, jo glikolīzi eritrocītos un leikocītu izraisa pH samazināšanos, kad paraugs būs apmēram 20 minūtes istabas temperatūrā.Šīs prasības ir jāievēro arī kapilāro asiņu pētījumos, kurus pārnes uz heparinizētiem kapilāriem. Asinis par pētījumiem par adrenokortikotropo hormonu( AKTH), angiotenzīna I, II, renīna jābūt arī uzreiz pēc žogu un ievieto ledu, cik drīz vien iespējams, nogādā laboratorijā.
Kopumā, lai novērstu ietekmi pagaidu faktora testa rezultātus, piegādes materiāls jāveic laboratorijā, cik drīz vien iespējams. Jo agrāk serums ir atdalīts no sarkano asins šūnu, jo mazāk ietekmē glikolīzi( līdz ar to ietekme uz glikozes, fosfora koncentrāciju un dažu enzīmu aktivitāti būs mazāka).Bilirubīna koncentrācija asinīs samazinās gaismas ietekmē( īpaši spilgtā saules gaismā).Gaismas ietekme palielina arī sārmainās fosfatāzes aktivitāti. Laika faktors ir ļoti svarīgs arī bakterioloģiskiem pētījumiem( dažas baktērijas mirst istabas temperatūrā).
Piegāde biomateriālu laboratorijā vajadzētu ietilpt rādīto intervālu tabulā. . Vērojot tos izdodas, lai samazinātu negatīvo ietekmi pagaidu faktoru par laboratorijas rezultātiem.
1.-1. Tabula. Piegādes laiki paraugu uz laboratoriju [Garza D., Becan-McBride K., 1989]
Tabula 1-1.Piegādes laiki paraugu uz laboratoriju [Garza D., Becan-McBride K., 1989]
šiem standartiem piegādes laiks ir jāzina katram klīnicists. Ar to pārkāpšana prasa atkārtotu paraugu ņemšanu, lai izslēgtu ietekmi laika faktora par izmaiņas pētījumu rezultātiem, nav iespējams.
Bez visa iepriekš minētā, vērtība bioloģiskās atšķirības ir atkarīga no fizioloģisko funkciju, kas veikta ķermeņa vielu. Mazākā variācija raksturīgs bioloģisko vielu, svarīgākā stabilitātei sastāva un daudzuma ekstracelulāro šķidrumu un asinis( nātrija, hlorīdu, kalcija, magnija, albumīnu, kopējo olbaltumvielu, oglekļa dioksīdu).Variācija vidēji raksturīgs iesaistītajiem procesos anabolisko( glikoze, holesterīns, fosfora) vielām. Piemīt vislielāko bioloģiskos variantus komponentus asins serumā, kas ir gala produktu katabolismu( urīnskābes, urīnviela, kreatinīna), kā arī vielas un fermentus, kas izdalīti no audu [LDH, AST, alanīna aminotransferāzes( ALT), etc.].