Bacterioscopia de esputo
La identificación oportuna de un agente infeccioso es muy importante para la elección correcta de un fármaco antibacteriano con el fin de prevenir el desarrollo de resistencia bacteriana durante la administración empírica de un antibiótico. La tinción de Gram es el método más común para colorear todo tipo de material obtenido de un paciente( esputo, bronxialveolar flushing, etc.), para el establecimiento rápido e indicativo de un agente infeccioso.
Un frotis de esputo teñido con tinción de Gram se utiliza para realizar una evaluación preliminar de un posible agente etiológico. El esputo de frotis teñido con Gram se examina antes de sembrarlo en medios nutritivos también con el fin de evaluar la idoneidad para el cultivo y la identificación de un patógeno probable. El esputo se considera adecuado si un frotis teñido por Gram con un pequeño aumento en el microscopio revela más de 25 leucocitos y menos de 10 células epiteliales en el campo de visión. Los signos de una muestra de esputo de calidad que se puede utilizar para el cultivo son la prevalencia de leucocitos sobre las células epiteliales en el mismo, así como la presencia de bacterias de una especie que se encuentran dentro o alrededor de los leucocitos. Las bacterias Gram-positivas en la preparación tienen un color azul oscuro, gram-negativo, en rosa. Los agentes causales de la neumonía atípica( micoplasma, legionela, rickettsia y clamidia) no son teñidos por Gram, por lo que se utilizan métodos serológicos para su detección.
Los frotis de esputo según Tsiol-Nielsen se usan para identificar bacilos ácido-alcohol resistentes, principalmente mycobacterium tuberculosis. La preparación se prepara a partir de partículas de esputo purulentas, que se seleccionan de 4 a 6 lugares diferentes. Las partículas seleccionadas se trituran cuidadosamente entre 2 portaobjetos hasta obtener una masa homogénea, se secan al aire y se fijan sobre la llama del quemador. Mycobacterium tuberculosis es de color rojo, todos los demás esputo y bacterias en azul. Mycobacterium tuberculosis tiene la apariencia de palos delgados, ligeramente curvados de diferente longitud, con engrosamiento en los extremos o en el centro, se organizan en grupos y por separado. La detección de Mycobacterium tuberculosis es el signo más confiable de lesiones de tuberculosis en los pulmones. El método de tinción de frotis según Tsiol-Nielsen con formas activas de tuberculosis pulmonar tiene una sensibilidad del 50% y una especificidad del 80-85%.