Reacción en cadena de la polimerasa en el diagnóstico de enfermedades infecciosas

PCR - uno de los métodos para el diagnóstico de ADN que permite aumentar el número de copias de una porción detectable del genoma( ADN) de bacterias o virus es un millón de veces usando una enzima ADN polimerasa. El segmento del ácido nucleico probado para un genoma determinado se multiplica( amplifica) muchas veces, lo que permite que se identifique. En primer lugar, una molécula de ADN de bacterias o virus por calentamiento divide en dos cadenas, a continuación, en presencia de los cebadores de ADN sintetizados( secuencia de nucleótidos específicos para la genómica definida) ellos es vinculante con tramos complementarios de ADN, sintetizado la segunda hebra del ácido nucleico después de cada cebador en presencia de una ADN polimerasa termoestable. Se obtienen dos moléculas de ADNEl proceso se repite muchas veces. Para el diagnóstico, una molécula de ADN, es decir, una bacteria o una partícula viral, es suficiente. Reacción de un paso adicional - la síntesis de ADN en la molécula de ARN utilizando la enzima transcriptasa inversa - ha permitido poner a prueba los virus de ARN tales como el virus de HCV.La PCR es un proceso de tres pasos, repetido cíclicamente: desnaturalización, recocido de cebadores, síntesis de ADN( polimerización).La cantidad sintetizada de ADN se identifica por ELISA o por electroforesis.

La PCR se puede utilizar varios materiales biológicos - suero o plasma sanguíneo, el raspado de la uretra, la biopsia, líquido pleural, líquido cefalorraquídeo, etc. La primera PCR se usó para el diagnóstico de enfermedades infecciosas, tales como HBV, HCV, HBV, infección por CMV, infección sexual infecciosa transmitida( gonorrea, diynaya basura, plasma Myco, infección ureaplasmal), la tuberculosis, el VIH y así sucesivamente.e.

PCR ventaja en el diagnóstico de las enfermedades infecciosas más de estudios de otros métodos es como sigue: agente infeccioso

■ se puede detectar en cualquier entorno biológico del organismo, incluyendo aquellos materiales obtenidos por biopsia;

■ Diagnóstico de enfermedades infecciosas en las primeras etapas de la enfermedad;

■ evaluación cuantitativa de los resultados de los estudios( cuántos virus o bacterias están contenidos en el material bajo investigación);

■ alta sensibilidad del método;por ejemplo, sensibilidad de la PCR para detectar el ADN viral del VHB en la sangre se 0,001 pg / ml( aproximadamente 4h102 copias / ml), mientras que la sensibilidad de un método de hibridación de ADN usando sondas ramificados - 2,1 pg / ml( aproximadamente 7h105 copias / ml).