Variação biológica

Os resultados dos estudos laboratoriais estão sujeitos à influência da variação biológica e analítica. Se a variação analítica depende das condições do teste, a magnitude da variação biológica é de um conjunto de fatores. A variação biológica geral dos parâmetros estudados deve-se à variação intra-individual observada na mesma pessoa como resultado da influência de ritmos biológicos( diferentes momentos do dia, ano) e variação interindividual causada por fatores endógenos e exógenos, os quais principais são apresentados na Fig.

Fatores biológicos( fatores fisiológicos, fatores ambientais, condições de amostragem, fatores tóxicos e terapêuticos) podem influenciar os resultados dos estudos laboratoriais. Alguns podem causar desvios reais de resultados de laboratório a partir de valores de referência fora da conexão com o processo patológico [Menshikov VV, 1995].Esses fatores incluem o seguinte.

■ Padrões fisiológicos( influência de raça, gênero, idade, tipo de constituição, natureza e quantidade de atividade habitual, nutrição).

■ Influência do meio ambiente( clima, fatores geomagnéticos, época do ano e dia, composição da água e solo no habitat, ambiente social e familiar).

Fig. Sequência de avaliação dos resultados de estudos laboratoriais

Fig. Sequência de avaliação de resultados laboratoriais

■ Impacto de agentes tóxicos ocupacionais e domésticos [álcool, nicotina, drogas) e efeitos iatrogênicos( procedimentos de diagnóstico e tratamento, medicamentos( AS)]

■ Condições de coleta de amostras( ingestão de alimentos, exercício físico, posição corporal, tensão durante a amostragem, etc.)

■ Técnica de amostragem de sangue( método de tomada, ferramentas e utensílios, conservantes, etc.)

■ Entrada de material incorreta( em tempo)

■ Condições( temperatura, agitação,influência da luz) e o tempo de transporte do biomaterial para pesquisa no laboratório

Figura Fatores que influenciam a variação biológica [Garanina EN, 1997]

Figuras que influenciam a variação biológica [Garanina EN, 1997].

Considere o efeito dos fatores mais importantes nos resultados dos testes laboratoriais:

Ingestão de alimentos: A dieta, a composição dos alimentos e as quebras em sua administração têm um efeito significativo em vários indicadores laboratoriais. Após 48 horas de jejum, a concentração de bilirrubina no sangue pode aumentar. O jejum de 72 horas reduz a concentração de glicose no sangue em pessoas saudáveis ​​para 2,5 mmol / L( 45 mg%), aumenta a concentração de triglicerídeos( TG)

, ácidos graxos livres sem alterações significativas na concentração de colesterol( CS) [Statland BE et al., 1973].

O uso de alimentos gordurosos pode aumentar a concentração de potássio, TG e fosfatase alcalina. A atividade da fosfatase alcalina em tais casos pode ser especialmente aumentada em pessoas com o grupo sanguíneo O ou B [Remes K. et al., 1994].As alterações fisiológicas após a ingestão de alimentos gordurosos sob a forma de hipercicomicronemia podem aumentar a turvação do soro sanguíneo( plasma) e assim influenciar os resultados da medição da densidade óptica. O aumento da concentração de lipídeos no soro pode ser após o consumo de manteiga, creme ou queijo pelo paciente, o que levará a resultados falsos e exigirá uma nova análise.

Consumir uma grande quantidade de carne, isto é, alimentos ricos em proteína, pode aumentar a concentração de ureia e amônia no soro, urato na urina. O alimento com uma proporção elevada de ácidos graxos insaturados para saturados pode causar uma diminuição da concentração de colesterol no soro e os alimentos ricos em purinas causam um aumento da concentração de urato. Bananas, abacaxis, tomates, abacates são ricos em serotonina. Quando eles são usados ​​3 dias antes da urina ser testada quanto ao ácido 5-hidroxiindoleacético, mesmo em uma pessoa saudável, sua concentração pode ser aumentada. Bebidas ricas em cafeína, aumentam a concentração de ácidos graxos livres e causam a liberação de catecolaminas das glândulas supra-renais. A ingestão de álcool aumenta a concentração de lactato, ácido úrico e TG no sangue.

A regra geral para excluir a influência da ingestão de alimentos nos resultados dos testes laboratoriais é a coleta de sangue após um jejum de 12 horas.

Exercício

.A carga física pode ter tanto um efeito transitório quanto um longo prazo em vários parâmetros da homeostase.alterações transitórias incluem primeiro diminuição e, em seguida, aumento da concentração de ácidos gordos livres no sangue, aumentando a concentração de 180% de amoníaco e 300% - lactato, o aumento da actividade da creatina quinase( CK), aspartato aminotransferase( AST), lactato de desidro-desidrogenase( LDH) [Garza D., Becan-McBride K., 1989].Exercícios físicos ativam a coagulação do sangue, fibrinólise e atividade funcional das plaquetas. As mudanças nesses indicadores estão associadas à ativação do metabolismo, geralmente retornam aos valores originais( antes da carga física) logo após a cessação da atividade física. No entanto, a atividade de certas enzimas( aldolase, CC, AST, LDH) pode permanecer elevada em 24 horas após 1 hora de atividade física intensa.exercício prolongado aumenta a concentração no sangue de hormonas sexuais, incluindo a testosterona, Andros tendion e hormona luteinizante( LH) [Henry J. B, 1996].

O estresse emocional pode causar leucocitose transitória, uma diminuição da concentração de ferro e uma alteração no nível de catecolaminas no sangue. A ansiedade grave, acompanhada de hiperventilação, causa um desequilíbrio no estado ácido-base( CBS) com um aumento na concentração de lactato e ácidos graxos no sangue.

Outros fatores. Entre outros fatores que influenciam os resultados dos estudos, são importantes os ritmos diários da homeostase, idade, sexo, gravidez, localização geográfica do terreno, altura acima do nível do mar, temperatura ambiente, tabagismo. Nos fumantes,

pode aumentar a concentração de carboximehemófbobina( HbCO), catecolaminas no plasma sanguíneo e cortisol no soro. As mudanças na concentração desses hormônios geralmente levam a uma diminuição do número de eosinófilos, enquanto o conteúdo de neutrófilos, monócitos e ácidos graxos livres aumenta. O fumo aumenta a concentração de hemoglobina( Hb), contagem de eritrócitos, o volume médio dos eritrócitos( MCV), e reduzir o número de leucócitos. Em conexão com isso, recomenda-se que os laboratórios estabeleçam seus próprios valores de referência locais para sua população.

A fim de reduzir o impacto dos fatores reduzidos nos resultados do teste, antes de tirar sangue para pesquisas são necessárias para abster-se de exercício extenuante e recepção de álcool, mudanças na dieta por 24 horas. O paciente não deve comer depois do jantar, ele precisa ir para a cama na véspera do comum paraseu tempo e levante-se o mais tardar 1 hora antes de tomar sangue [Alstorm T. et al., 1993].Recomenda-se a recolha de sangue do paciente no início da manhã, após uma noite de 12 horas rápida( linha de base), que permite uma padronização máxima das condições de estudo.

Medicamentos. Algumas drogas podem ter um impacto significativo nos resultados da pesquisa. Por exemplo, a recepção de ácido acetilsalicílico na determinação do tempo de sangramento Duke deve ser cancelada 7-10 dias antes do estudo, caso contrário você pode obter um resultado patológico. Caso a droga tomada pelo paciente possa afetar o resultado da análise, e se for impossível cancelá-la, você deve informar o laboratório sobre isso.

O efeito das drogas nos resultados dos estudos laboratoriais pode ser de dois tipos.

■ Efeito fisiológico in vivo( no corpo do paciente) de drogas e seus metabolitos.

■ Influência in vitro( na reação química usada para determinar o índice) devido às propriedades químicas e físicas dos medicamentos( interferência).

Os efeitos fisiológicos das drogas e seus metabolitos são amplamente conhecidos pelos praticantes. Considere o valor da interferência, ou seja, a interferência de um fator estranho nos resultados da análise.

A interferência pode ser causada pela presença na amostra do biomaterial de substâncias endógenas e exógenas. Os principais fatores de interferência endógena incluem o seguinte.

■ Hemólise, isto é, quebra de eritrócitos com um rendimento da parte líquida do sangue de um número de componentes intracelulares( Hb, LDH, potássio, magnésio, etc), que altera os resultados reais da determinação da concentração de / actividade de componentes do sangue, como a bilirrubina, a lipase CC, LDH, potássio, magnésio e outros.

■ Lipémia distorce os resultados de várias técnicas colorimétricas e Nephele-métricas( especialmente para o estudo de fósforo, bilirrubina total, ácido úrico, proteína total, electrólitos).

■ Paraproteinemia, que provoca alterações nos resultados da determinação de fosfato, ureia, kk, LDH, amilase por alguns métodos.

Os fatores interferentes exógenos mais freqüentes são drogas ou seus metabolitos. Assim, na determinação de catecolaminas pelo método fluorimétrico na urina, a tetraciclina aceita pelo paciente pode causar fluorescência intensa;o metabolito do propranolol 4-hidroxipropranolol interfere na determinação da bilirrubina pelos métodos de Jendrassic-Gro-fa e Evelyn-Mello.

Identificar a interferência de drogas - uma das tarefas de um médico de diagnóstico de laboratório clínico. Um passo importante para resolver esse problema é entrar em contato com o clínico para descobrir a natureza dos medicamentos que o paciente tomou.

A posição do corpo com amostragem de sangue também afeta uma variedade de registros. Assim, mudar a posição do paciente em uma posição sentada ou parada resulta na penetração hidrostática da água e filtragem de substâncias do espaço intravascular para o espaço intersticial. Substâncias com um grande peso molecular( proteínas) e células sanguíneas com substâncias associadas não passam para o tecido, portanto aumenta a concentração no sangue( enzimas, proteína total, albumina, ferro, bilirrubina, colesterol, TG, medicamentos associados a proteínas, cálcio).A concentração de Hb, Ht e o número de leucócitos podem aumentar.

A localização e a técnica de amostragem de sangue também podem ter um efeito significativo nos resultados dos testes laboratoriais( por exemplo, a aplicação de um torniquete por um período de mais de 2 minutos na coleta de sangue de uma veia pode levar à hemoconcentração e aumento da concentração de proteína do sangue, fatores de coagulação, conteúdo celular).O melhor local de amostragem de sangue para testes é a veia ulnar. Deve também notar-se que o sangue venoso é o melhor material não apenas para a determinação de parâmetros bioquímicos, hormonais, serológicos, imunológicos, mas também para pesquisa clínica geral. Isso se deve ao fato de que os analisadores hematológicos atualmente utilizados, através dos quais são realizadas análises clínicas gerais de sangue( contagem de células, determinação de Hb, Ht, etc.) são projetados para trabalhar com sangue venoso e na maioria dos países nos países onde são produzidos,eles são certificados e padronizados para trabalhar apenas com sangue venoso. Os materiais de calibração e controle produzidos pelas empresas também são projetados para a calibração do analisador de sangue para sangue venoso. Além disso, a coleta de sangue do dedo pode ser uma série de características metodológicas que são difíceis de padronizar( dedos frios, cianóticos, edematosos, necessidade de diluição do sangue em estudo, etc.), o que leva a variações significativas nos resultados obtidos e, conseqüentemente, aA necessidade de estudos repetidos para esclarecer o resultado. Para o exame clínico geral, recomenda-se que o sangue dos dedos seja tomado nos seguintes casos.

■ Para queimaduras que ocupam uma grande área do corpo do paciente.

■ Se o paciente tiver veias muito pequenas ou pouco acesso a elas.

■ Com obesidade grave do paciente.

■ Com susceptibilidade à trombose venosa.

■ Em recém-nascidos.

A punção da artéria para a amostragem de sangue raramente é utilizada( principalmente para estudar a composição do gás no sangue arterial).

O tempo e as condições para o transporte de amostras de materiais biológicos também desempenham um papel importante na garantia da qualidade dos resultados dos testes laboratoriais. Ao entregar material ao laboratório, é sempre necessário lembrar os recursos de algumas amostras. Por exemplo, ao tomar sangue arterial para examinar uma composição de gás, o reservatório de sangue deve estar bem obstruído, imerso em água gelada e entregue ao laboratório o mais rápido possível, uma vez que a glicólise nos glóbulos vermelhos e leucócitos provoca uma diminuição do pH se a amostra for de cerca de 20 minutos à temperatura ambiente. Esses requisitos também devem ser observados no estudo do sangue capilar, que é levado para os capilares heparinizados. O sangue para hormônio adrenocorticotrópico( ACTH), angiotensina I, II, renina também deve ser colocado imediatamente após a cerca do gelo e entregue ao laboratório o mais rápido possível.

Em geral, para evitar a influência do fator de tempo nos resultados das análises, a entrega do material ao laboratório deve ser feita o mais rápido possível. Quanto mais cedo o soro é separado dos glóbulos vermelhos, menos influência da glicólise( portanto, o efeito sobre a concentração de glicose, fósforo e a atividade de certas enzimas serão menores).A concentração de bilirrubina no sangue diminui sob a influência da luz( especialmente luz solar intensa).O efeito da luz também aumenta a atividade da fosfatase alcalina. O fator de tempo também é muito importante para estudos bacteriológicos( algumas bactérias morrem à temperatura ambiente).

O tempo de entrega do biomaterial ao laboratório deve caber nos intervalos apresentados na tabela. Se forem observados, é possível minimizar o efeito negativo do fator de tempo nos resultados dos testes laboratoriais.

Tabela 1-1.Prazos de entrega para o laboratório [Garza D., Becan-McBride K., 1989]

Tabela 1-1.Prazos de entrega ao laboratório [Garza D., Becan-McBride K., 1989]

Os limites de tempo especificados para entrega devem ser conhecidos de todos os clínicos. Se forem violados, é necessária uma amostragem repetida, uma vez que não é possível excluir a influência do fator de tempo em desvios nos resultados dos estudos.

Além de tudo o que precede, a quantidade de variação biológica depende da função fisiológica realizada no corpo pelo analito. A menor variação biológica é característica das substâncias mais importantes para a estabilidade da composição e volume de fluidos extracelulares e sangue( sódio, cloretos, cálcio, magnésio, albumina, proteína total, dióxido de carbono).A variação do grau médio é característica das substâncias envolvidas nos processos de anabolismo( glicose, colesterol, fósforo).Os componentes do soro, que são os produtos finais do catabolismo( ácido úrico, ureia, creatinina), bem como substâncias e enzimas [LDH, AST, alanina aminotransferase( ALT), etc.) possuem a maior variação biológica.