Wariacja analityczna

Odmiana analityczna zastosowanej metody badawczej ma duży wpływ na wyniki badań laboratoryjnych. Główne kryteria oceny metody badania to dokładność, powtarzalność, swoistość, czułość.

■ Dokładność charakteryzuje ważność metody przy określaniu dokładnej wartości( stężenia) substancji. Na przykład systematyczna różnica między wynikami oznaczania sodu w jednej próbce powyżej 3 mmol / l jest uważana za niedopuszczalną.Z drugiej strony, bardziej znacząca różnica między stężeniami pewnych hormonów określona za pomocą ELISA z różnymi AT jest uznawana za dopuszczalną, ponieważ zastosowanie różnych leków AT daje różne efekty matrycy. Z tego powodu ustalono różne przedziały wartości referencyjnych dla poszczególnych immunoenzymatycznych metod oznaczania hormonów.

■ Odtwarzalność metody ocenia się mierząc stężenie substancji w tej samej próbce kilka razy w tym samym dniu i w tej samej serii próbek. Następnego dnia dokonują tych samych pomiarów z tą samą próbką.Zwykle odchylenia w pomiarach podlegają prawu Gaussa, które wskazuje na stabilność metody. Dla każdej serii pomiarów obliczyć średnią wartość( Xcp).Następnie znajdź różnicę między wartością każdego pomiaru a tą średnią i oblicz odchylenie standardowe( S) i współczynnik zmienności( V).Określić współczynnik zmienności w inne dni, a jeśli nie przekracza 5%, wówczas metoda badania jest uważana za wystarczającą.W przypadku enzymów V może osiągnąć 10%.Obowiązkiem każdego laboratorium jest weryfikacja odtwarzalności metod, które są szacowane na podstawie odchylenia standardowego( SD).Na przykład powtarzalność oznaczania stężenia całkowitego cholesterolu w surowicy krwi w dobrym laboratorium zwykle wynosi średnio +0,13 mmol / l. Wiadomo, że 95% przedział ufności wynosi + 2SD, co w tym przypadku odpowiada 0,26 mmol / l. Zatem każdy wynik jest uważany za prawdziwy, jeśli mieści się w tych granicach( +0,52 mmol / l).Zatem stężenie całkowitego cholesterolu w surowicy krwi wynosi 5,18 mmol / l, co oznacza, że ​​prawdziwa wartość wynosi od 4,92 do 5,44 mmol / l.

■ Specyficzność - zdolność metody pomiaru tylko komponentu, dla którego jest przeznaczona. Aby ocenić analityczną specyficzność, stosuje się zanieczyszczenia, które w oparciu o strukturę chemiczną są reprezentatywnymi przedstawicielami tych grup substancji, które, fizjologicznie, mają praktyczne znaczenie

.W większym stopniu dotyczy to leków, które mogą powodować zakłócenia chemiczne podczas analizy. Niska specyficzność i wpływ interferencji prowadzi do nieprawidłowego wyniku( nie należy go mylić ze specyfiką metody patologii).

■ Analityczna czułość metody to najmniejsza ilość substancji( najniższe stężenie), którą można wykryć za pomocą tej metody. Pojęcie to należy odróżnić od wrażliwości metody w odniesieniu do wykrycia szczególnej patologii. Przy wyborze metody badań należy zwrócić szczególną uwagę na czułość analityczną metody, ponieważ zależy od tego jakość wyników badań.Na przykład, zamówienie przez Ministerstwo Zdrowia Federacji Rosyjskiej № 282 z dnia 09.28.98 „W użyciu systemów immunologicznych enzymu wykrywa powierzchni Ag z wirusa zapalenia wątroby typu B( HBsAg) i przeciwciał przeciw wirusowi zapalenia wątroby C( anty-HCV) w ludzkiej surowicy” nie wolno za pomocą testuSystem do identyfikowania HBsAg czułość jest wyższa niż 0,5 ng / ml, i systemach testowych dla wykrycia przeciwciał anty-HCV, bez konieczności jego skład białka kodowanego obszarze NS3 HCV RNA z użyciem układów wykrywania testu wrażliwości HBsAgpowyżej 0,5 ng / ml i niezawierające białka w jego składziein, kodowane przez strefę NS3 RNA wirusa zapalenia wątroby typu C, prowadzi do tego, że wirusowe zapalenie wątroby typu B i C u wielu pacjentów nie jest diagnozowane.

Odmiana analityczna, w zależności od zastosowanych metod i warunków ich realizacji, rozszerza granice normalnych wskaźników laboratoryjnych, co ogranicza możliwość testów laboratoryjnych służących rozróżnieniu zdrowia od choroby. Dlatego specjaliści laboratoryjni powinni dążyć do zmniejszenia zmienności analitycznej. W tabeli.podano maksymalne dopuszczalne granice analitycznej zmienności( spreadu) analizowanych składników.

wartości dopuszczalnej zmienności analitycznej( V) są uważane za średnie wartości orientacyjne. Różnice te, oddanych do leukocytów i erytrocytów elementów komórkowych wprowadzić Oblicz metody ręczne za pomocą analizatorów hematologiczne analityczne współczynnik wariancji wynosił 1-3% leukocytów, erytrocyty - 1-2% płytek - 24% [Elevitch FR ial., 1987;Koepke, J. A., 1993].

Potwierdzenie, że analityczna zmienność metody może mieć znaczący wpływ na wyniki badania, przedstawiono w tabeli.dane 95% przedziału ufności przy obliczaniu wzoru krwi leukocytów, uzyskanego na podstawie analizy statystycznej.

Zatem przy ocenie wyników testów laboratoryjnych lekarz musi wziąć pod uwagę cały szereg czynników mających wpływ na wyniki wiedzieć wiarygodności analitycznych badań laboratoryjnych, to znaczy, aby mieć pewność, dokładność informacji z nimi odpowiednich składników biomateriału. Znajomość stopnia zmienności w wynikach badań i ważne jest, aby je porównać ze zmiennością biologiczną, a także w celu porównania z klinicznie istotnych zmian w parametrach laboratoryjnych. Kryteria te określa się przy opracowywaniu metod, wskazać w ich opisie, aw razie potrzeby lekarz laboratorium powinien poinformować o tym lekarza. Tabela

maksymalne dopuszczalne limity zmienności analitycznej( scatter) różnych składników( Kompendium metod laboratoryjnych g diagnostycznych. 1984 6.1. CMLD)

klinicysta na poziomie technicznym i ocena biologiczna wyników laboratoryjnych powinien rozważyć następujące fakty.

■ porównanie wyników analizy z zakresu referencyjnej odpowiadającej wartości jedynie wskazywać na prawdopodobieństwo zgodność lub niezgodność z tego wyniku jest normalne.

■ Istnieją różnice fizjologiczne w wartościach normalnych i zmianach fizjologicznych z dnia na dzień( zmiany biologiczne).

■ Występują niewielkie różnice techniczne wynikające z różnic w wynikach analiz uzyskanych w różnych dniach( analityczna zmienność metody).

■ Zakresy referencyjne mogą się różnić w zależności od różnych metod laboratoryjnych.

■ Zmiana zawartości składnika testowych mogą być niespecyficzne i nie są związane z pierwotną chorobą metaboliczną składnik( zakłócenia, hemolizy, lipemia, odbiór PM i in.).Nie

■ przypadkowe zmiany, z przyczyn, które nie są oczywiste, ale należy wziąć pod uwagę przy interpretacji wyników powtórzeniach analizuje w tej chwili;na przykład codzienne wahania stężenia żelaza we krwi są bardzo duże i mogą utrudnić identyfikację wzorców zmian w tym składniku.

■ Podczas badania osocza lub surowicy krwi uzyskuje się informację o pozakomórkowych stężeniach badanych składników. Te stężenia zależy od ilości wody w przestrzeni pozakomórkowej, w odniesieniu do wartości mierzonego składnika i nie zawsze odzwierciedlają poziom wewnątrzkomórkowego analitów.