Undersøkelse av enzymer og isoenzymer

Enzymer er spesifikke proteiner som oppfyller rollen som biologiske katalysatorer i kroppen. Enzymer er inneholdt i alle celler i kroppen, hvor konsentrasjonen er mye høyere enn i blodplasmaet. Serum

av blod, hvis enzymkomposisjon er relativt konstant, brukes oftest som en gjenstand for forskning. Normal aktivitet av enzymer i serum reflekterer forholdet mellom biosyntese og frigjøring av enzymer( med den vanlige cellefornyelsen), samt deres klaring fra blodbanen. En økning i fornyelsen av enzymer, fører til skade på celler vanligvis en økning i aktiviteten av enzymer i serumet. I blodserum utmerker seg tre grupper av enzymer: cellulær, sekretorisk og ekskretorisk.

Cellenzymer er delt inn i to grupper avhengig av lokalisering i vev:

■ Ikke-spesifikke enzymer som katalyserer utvekslingsreaksjoner som er felles for alle vev og finnes i de fleste organer og vev;

■ Organ-spesifikke eller indikator enzymer som er spesifikke for en bestemt type vevstype.

Serumaktivitet av cellulære enzymer er lav eller ikke-eksisterende. I patologiske prosesser avhenger aktiviteten av enzymene i denne gruppen i serum av frigjøringshastigheten fra cellene, som igjen avgjøres av hastigheten og graden av deres skade.

Sekretoriske enzymer( ceruloplasmin, pseudokolinesterase, lipoprotein lipase) går direkte til blodplasmaet og utfører spesifikke funksjoner i den. Disse enzymer syntetiseres i leveren og utløses kontinuerlig i plasma. Deres aktivitet i serum er høyere enn i celler eller vev. I klinisk praksis er de av interesse når deres aktivitet i blodserumet blir lavere enn normalt på grunn av nedsatt leverfunksjon.

Ekskretjonsenzymer dannes ved fordøyelsessystemet( bukspyttkjertel, tarmslimhinner, lever, endotel av gallekanaler).Disse inkluderer a-amylase, lipase, alkalisk fosfatase, etc. Normalt er deres serumaktivitet lav og konstant. Men i patologi, når noen av de vanlige utskillelsesveiene er blokkert, øker aktiviteten til disse enzymene i serum betydelig.

Den målte aktiviteten til enzymer kan skyldes nærvær av svært nærliggende egenskaper, men litt forskjellige molekylære former for enzymer. Disse forskjellige former kalles isoenzymer. Undersøkelse av isoenzymer i klinisk praksis er av interesse når individuelle isoenzymer dannes i forskjellige vev( for eksempel i hjerte og lever, er forskjellige LDH-isoenzymer dominerende).

For kvantifisering av enzymaktivitet anbefalte Kommisjonen for enzymer fra International Biochemical Union en standard internasjonal enhet( IU).Aktivitetsenheten til et hvilket som helst enzym er tatt som dets mengde, som under optimale forhold katalyserer omdannelsen av 1 μmol substrat per minutt( μmol / min).

Aktiviteten til enzymet vurderes ved frekvensen av katalysert reaksjon ved en viss temperatur og pH i mediet, konsentrasjonen av substratet. Derfor, når man bestemmer aktiviteten til enzymer, må de samme forholdene følges nøye.

Den enzymatiske reaksjonen er følsom for temperaturendringer. Det gjøres vanligvis ved en temperatur innenfor

-området på 25-40 ° C, men ved forskjellige temperaturer er den optimale pH, buffer, substrat og andre parametere forskjellige. Maksimal aktivitet av de fleste enzymer i menneskekroppen observeres ved en temperatur på ca. 37 ° C.Derfor, for formålet med internasjonal standardisering, utføres enzymaktivitetsmålinger ved en gitt temperatur. Under normale verdier av enzymaktiviteten er det gitt en temperatur på 37 ° C.

Undersøkelse av enzymer brukes i klinisk praksis for å løse ulike problemer: diagnose, differensialdiagnose, vurdering av sykdomsforløpet, bestemmelse av effektiviteten av behandlingen, grad av utvinning og prognose av sykdommen. Tre typer enzymendringer er kjent i tilfelle av patologi: hyperferment-mia - økt enzymaktivitet sammenlignet med normen, hypo-fermentering - dens reduksjon, dysfermentering - utseendet av enzymer i blodet, normalt ikke detekterbart.