תגובת שרשרת פולימראז
PCR - התפתחויות אחרונות בתחום הגנטיקה המולקולרית, משמשים כדי להגביר את ה- DNA ומאפשר לך להפיץ במהירות במבחנה
נקודתית של DNA( כלומר, כל גן של עניין) הוא יותר מ 200 000 פעמים.כדי לבצע את התגובה, זה מספיק כדי לקבל את החומר DNA של תא אחד;כמות ה- DNA מוגבר על ידי PCR הוא כל כך גדול כי ה- DNA הזה יכול פשוט להיות מוכתם( באמצעות בדיקות רדיואקטיבי לאחר אלקטרופורזה לא נדרש).תנאי מוקדם לניהול PCR הוא הידע של רצף נוקליאוטידים של האזור DNA מוגבר עבור הבחירה הנכונה של primers מסונתז באופן מלאכותי.
נכון לעכשיו, PCR הוא תהליך שמתרחש בתוך שפופרת יחיד המורכב מחזורים חוזרים של הגברה( רבייה, העתק) של רצפי DNA ספציפיים על מנת לקבל מספר גדול מספיק של עותקים כי ניתן לזהות על ידי אלקטרופורזה.אחד המרכיבים המרכזיים של התגובה - "צבעי יסוד" - הסינטטי-dy oligonukleoti מורכב 20-30 בסיסים של משלימים "אתרים"( אזורים) חישול( חיבור) אל החלק המזוהה של תבנית ה- DNA.
PCR פועל באופן אוטומטי תרמוסטט לתכנות - thermocycler( thermocycler).שלושת שלבים במחזור שבו העתקים מתקבלים חלק מזוהה של תבנית ה- DNA, חזר על עצמו 30-50 פעמים בהתאם-ra תכנית מחזור תרמי, מוגדר מראש.במחזור הראשון oligoprimer להכליא עם ה- DNA התבנית המקורית, ולאחר מכן( במחזורים הבאים) לבין מולקולות DNA מסונתז החדש כפי והצטברותם תערובת התגובה.במקרה האחרון, סינתזת DNA אינה מסתיימת עקב שינויי טמפרטורה, ו בהגיעם DNA-מוגבר פולימראז vannogo חלק גבול, אשר קובע את גודל אזור DNA המסונתז החדש כדי בתוך נוקלאוטיד אחד.
כשיטה מולקולות DNA לזיהוי שהושגו באמצעות אלקטרופורזה, שבאמצעותו ההפרדה מתבצעת amplicons בגודל amplifi-חומר-מיומנים( מוצרי הגברה).
באמצעות PCR יכול לבחון ישירות מוטצית לוקליזציה משוערת או באתר פולימורפיים, כמו גם ללמוד את הנוכחות של כל תכונות ה- DNA ספציפיות אחרות.