וריאציה ביולוגית
תוצאות מחקרי המעבדה כפופות להשפעה של וריאציה ביולוגית ואנליטית.אם השתנות האנליטית תלויה בתנאי הבדיקה, עוצמת השינוי הביולוגי היא ממכלול שלם של גורמים.וריאציה ביולוגי הכולל של הפרמטרים למד בשל וריאציה intraindividual שנצפתה אותו אדם כתוצאה ההשפעה של מקצבים ביולוגיים( בזמנים שונים של היום, שנה), ואת וריאציה interindividual נגרמת על ידי שני גורמים אנדוגני אקסוגניים, העיקרי שבהם מוצגים איור.
גורמים ביולוגיים( גורמים פיזיולוגיים, גורמים סביבתיים, תנאי דגימה, גורמים רעילים וטיפוליים) יכולים להשפיע על תוצאות מחקרי המעבדה.חלק מהם עלול לגרום לסטיות של תוצאות מעבדה מערכי ייחוס מחוץ לקשר עם התהליך הפתולוגי [Menshikov VV, 1995].גורמים אלה כוללים את הדברים הבאים.
דפוסי פיזיולוגיה( השפעה של גזע, מין, גיל, סוג החוקה, אופי וכמות הפעילות הרגילה, תזונה).
השפעת הסביבה( אקלים, גורמים גיאומגנטיים, זמן של שנה ויום, הרכב מים וקרקע בבית הגידול, סביבה חברתית וביתית).
איור.רצף של הערכה של תוצאות מעבדה מחקרים
איור.הרצף של במחקרי מעבדת ערכת תוצאות
■ לאימפקט סוכנים רעילים מקצועיים וביתיים [אלכוהול, ניקוטין, סמים) ותוצאת iatrogenic( פרוצדורות אבחון וטיפול תרופות( PM)]. מצב
■ דגימה( צריכת מזון, פעילות גופנית, תנוחת גוףלחץ במהלך דגימה, ואחרים.). דגימת שיטת דם
■( נטילת שיטה, כלים וכלי, חומרים משמרים, וכו ').
■ שגוי( בזמן) של חומר הגדר.
■ תנאים( טמפרטורה, רועד,השפעת האור) ואת התחבורה של חומר ביולוגי למטרות מחקר במעבדה.
איור. גורמים המשפיעים וריאציה ביולוגית [Garanina EN 1997].
איור. גורמים המשפיעים וריאציה ביולוגית [Garanina EN, 1997].
לשקול את ההשפעה של הגורמים החשובים ביותר על תוצאות בדיקות מעבדה.
ארוחות. רכב תזונה של צריכת מזון, שובר כתנאי לקבלתה להשפיע באופן משמעותי על מספר אינדיקטורים של בדיקות מעבדה.לאחר 48 שעות של צום, ריכוז הבילירובין בדם יכול לגדול.רעב במשך 72 h מקטין את ריכוז הגלוקוז בדם של אנשים בריאים 2.5 מילימול / ליטר( 45 מ"ג%), מגביר ריכוז
של טריגליצרידים( TG), חומצות שומן חופשיות ללא ריכוז כולסטרול שינויים משמעותיים( LDL) [Statland BE ואח., 1973).
השימוש במזונות שומניים יכול להגדיל את ריכוז אשלגן, TG ו phosphatase אלקליין.פעילות של phosphatase אלקליין במקרים כאלה יכולה להיות מוגברת במיוחד אצל אנשים עם קבוצת דם O או B [Remes K. et al., 1994].שינויים פיזיולוגיים לאחר אכילת מזונות שומניים בצורה של hyperchylomicronemia יכול להגדיל את העכירות של סרום הדם( פלזמה) ובכך להשפיע על התוצאות של מדידת צפיפות אופטי.הגידול בריכוז השומנים בדם יכול להיות לאחר שהחולה אכל חמאה, שמנת או גבינה, אשר יוביל לתוצאות שווא ו ידרוש ניתוח מחדש.
צריכת כמות גדולה של בשר, כלומר, מזונות עשירים בחלבון, יכולה להגביר את ריכוז היוריה והאמוניה בסרום, בשתן בשתן.מזון עם יחס גבוה של חומצות שומן בלתי רוויות רווי יכול לגרום לירידה בריכוז הכולסטרול בסרום, ומזון עשיר purines גורם לעלייה ריכוז urate.בננות, אננס, עגבניות, אבוקדו עשירים בסרוטונין.כאשר הם משמשים 3 ימים לפני שתן נבדק עבור חומצה 5-hydroxyindoleacetic, אפילו אדם בריא, הריכוז שלה עשוי להיות מוגברת.משקאות עשירים קפאין, להגדיל את הריכוז של חומצות שומן בחינם ולגרום לשחרור catecholamines מן האדרנל.צריכת אלכוהול מגביר את הריכוז של חומצת חלב, חומצת שתן ו TG בדם.
הכלל הכללי לאי הכללת השפעת צריכת המזון על תוצאות בדיקות המעבדה הוא איסוף הדם לאחר צום של 12 שעות.
תרגיל.עומס פיזי יכול להיות בעל השפעה זמנית וארוכת טווח על פרמטרים שונים של הומאוסטזיס.שינויים חלוף כוללים ירידה הראשונה ולאחר מכן להגדיל את ריכוז חומצות השומן החופשיות בדם, הגדלת ידי ריכוז אמוניה 180% ו 300% - לקטט, פעילות קריאטין קינאז מוגברת( CK), aminotransferase aspartate( AST), dehydro-לקטט דהידרוגנאז( LDH) [Garza D., Becan-McBride K., 1989].תרגילים פיזיים להפעיל קרישת דם, פיברינוליזה פעילות תפקודית של טסיות.שינויים אינדיקטורים אלה הקשורים ההפעלה של חילוף חומרים, הם בדרך כלל לחזור בסיס( לפני התרגיל) ערך זמן קצר לאחר הפסקת הפעילות גופנית.עם זאת, הפעילות של אנזימים מסוימים( aldolase CK, AST, LDH) יכולה תישאר גבוהה עבור 24 שעות לאחר 1 שעה של פעילות גופנית מאומצת.תרגיל ממושך מגביר את הריכוז בדם של הורמוני המין, כולל טסטוסטרון, Andros tendion ואת ההורמון luteinizing( LH) [הנרי ג'יי B, 1996].
מתח נפשי יכול לגרום leukocytosis חולף, ירד ריכוז ברזל ושינויים ברמת קטכולאמינים בדם.דאגה חזקה ואחריה היפרוונטילציה, גורמת למצב חומצה-בסיס חוסר איזון( הלמ"ס) עם ריכוז גדל והולך של חומצות שומן חומצת חלב ו בדם.
גורמים נוספים.בין גורמים, שהשפיעו על התוצאות של המחקר חשוב הומאוסטזיס מקצבי יממה, גיל, מין, הריון, שטח מיקום גיאוגרפי, גובה, טמפרטורת הסביבה, עישון.מעשנים יכולים
להיות מוגברים ריכוז carboxyhemoglobin( HbCO), קורטיזול פלזמה חדש-catechol וסרום.שינויים בריכוזים של הורמונים אלה לעתים קרובות להוביל לירידה במספר אאוזינופילים, בעוד שהתוכן של נויטרופילים, מונוציטים, ומגביר חומצות שומן חופשיות.עישון מגביר את הריכוז של ההמוגלובין( Hb), ספירה כדורית, נפח כדורי ממוצע( MCV), וכן לצמצם את המספר לויקוציטים.בהקשר זה, מומלץ כי מעבדות לקבוע ערכי הייחוס המקומי שלהם עבור האוכלוסייה שלהם.
על מנת לצמצם את ההשפעה של גורמים מופחת על תוצאות הבדיקה, לפני זוב דם על מחקר יש צורך להימנע מפעילות גופנית מאומצת וקליטה של אלכוהול, שינויים בתזונה עבור 24 שעות. החולה צריך לא לאכול אחרי ארוחת הערב, הוא צריך ללכת לישון ערב דופן עבורזמן עליה וזה לא יאוחר 1 שעה לפני לקיחת דמים [Alstorm ט ואח '., 1993].מומלץ לאסוף דם מהחולה בשעות הבוקר המוקדמות לאחר( בסיס) מהר לילה 12 שעות, המאפשרת את תנאי מחקר סטנדרטיים מקסימום.
מוצרים רפואיים.תרופות מסוימות יכולות להיות בעלות השפעה משמעותית על תוצאות המחקר.לדוגמה, חומצה אצטילסליצילית בעת קביעת משך זמן הקבלה של דימום דוקה צריך לבטל 7-10 ימים לפני המחקר, אחרת התוצאה פתולוגי ניתן להשיג.אם התרופות החולות קבלו עשויות להשפיע על תוצאת הניתוח, וכאשר זה לא ניתן לבטל חייב ליידע את המעבדה.
השפעת התרופות על תוצאות מחקרי המעבדה יכולה להיות משני סוגים.
■ השפעה פיזיולוגית in vivo( אצל המטופל) סמים מטבוליטים שלהם.
■ אפקט במבחנה( על התגובה הכימית המשמשת לקביעת המדד) בשל תכונות כימיות ופיסיקליות של התרופות( הפרעה).
השפעות פיזיולוגיות של תרופות והמטבוליטים שלהן ידועות בעיקר למתרגלים.שקול את הערך של הפרעה, כלומר, הפרעה של גורם חיצוני בתוצאות הניתוח.הפרעת
יכולה להיגרם על ידי הנוכחות במדגם של החומר הביולוגי שני חומרים אנדוגני אקסוגניים.גורמי ההפרעה האנדוגניים העיקריים כוללים את הגורמים הבאים.
■ המוליזה, התמוטטות דהיינו של אריתרוציטים ב תשואה של החלק הנוזלי של הדם של מספר מרכיבים תאיים( המוגלובין, LDH, אשלגן, מגנזיום, וכו '), אשר משנה את התוצאות בפועל של קביעת ריכוז / פעילות של מרכיבי הדם כגון בילירובין, lipase CC, LDH, אשלגן, מגנזיום ועוד.
■ Lipemia מעוות את התוצאות של טכניקות colorimetric ו Nephele-מטרי מספר( במיוחד לחקר זרחן, בילירובין הכולל, חומצת שתן, חלבון הכולל, אלקטרוליטים).
■ גורם paraproteinemia שינויים בתוצאות של נחישות ידי פוספטים שיטות מסוימות, ureas, KK, LDH, עמילאז.
הגורמים התערבותיים אקסוגניים השכיחים ביותר הם תרופות או מטבוליטים שלהם.לכן, בקביעת catecholamines על ידי השיטה fluorimetric בשתן, הטטרציקלין המקובל של המטופל עלול לגרום לקרינה אינטנסיבית;propranolol המטבוליט 4-gidroksipropranolol להפריע שיטות נחישות בילירובין Yendrassika גראו F ואוולין-Mellow.
כדי לזהות את ההפרעה של תרופות - אחת המטלות של רופא של אבחון מעבדה קלינית.צעד חשוב בפתרון בעיה זו הוא פנייה למרפאה כדי לגלות את אופי התרופות שנלקחו על ידי המטופל.
מיקום הגוף עם דגימת דם משפיע גם על טווח של רשומות.לכן, שינוי המיקום של המטופל שוכב על ישיבה או עומד עמדת תוצאות חדירה hydrostatic של מים וחומרים סינון מהחלל intravascular לתוך שטח interstitial.החומרים בעלי משקל מולקולרי גבוה( חלבונים), ותאי דם אדומים עם חומרים נלווים לא יתקיימו ברקמות, כך ריכוזם בדם עולה( אנזימים, חלבון, אלבומין, ברזל, בילירובין, סך כולסטרול, טריגליצרידים, חלבונים הקשורים PM, סידן).הריכוז של Hb, Ht, ואת מספר lukocytes עשוי להגדיל.מקום
וטכניקת דגימת דם יכולים גם להיות השפעה משמעותית על תוצאות בדיקות מעבדה( לדוגמא, רתם כיסוי עבור תקופת הזמן העולה על 2 דקות כאשר לוקחים דם מוריד עלול לגרום hemoconcentration וריכוז בדם מוגבר של חלבונים, גורמי קרישה, תחזוקה של אלמנטים הסלולר).המקום הטוב ביותר של דגימת דם לבדיקות הוא הווריד האולנארי.יש לציין גם כי דם ורידי הוא החומר הטוב ביותר לא רק לקביעת פרמטרים ביוכימיים, הורמונליים, סרולוגיים ואימונולוגיים, אלא גם למחקר קליני כללי.זאת בשל העובדה כי כיום מנתחי המטולוגיה לשימוש עם אשר עברו בדיקות דם קליני( ספירת תאים, קביעת המוגלובין, HT, וכו '), מיועד לשימוש עם דם ורידי, ורובם במדינות בהן הם מיוצרים,הם מוסמכים ו סטנדרטי לעבוד רק עם דם ורידי.הכיול וחומרי הבקרה המיוצרים על ידי החברות מיועדים גם לכיול של מנתח הדם לדם ורידי.בנוסף, כאשר דם ציור ממספר אפשרי אצבע של תכונות שיטתיות כי לתקנן מאוד קשה( הקר, cyano-קאל, אצבעות בצקות, את צורך דילול דם בבחינת al.), שתוצאתו הבדלים ניכרים בתוצאות שהתקבלו וכתוצאה מכך - בהצורך במחקרים חוזרים ונשנים כדי להבהיר את התוצאה.לצורך בדיקה קלינית כללית, מומלץ לקחת דם אצבע במקרים הבאים.
עבור כוויות אשר תופסות שטח גדול של הגוף של המטופל.
אם למטופל יש ורידים קטנים מאוד או גישה קטנה אליהם.
עם השמנת יתר חמורה של המטופל.
עם רגישות לקריש ורידי.
■ בתינוקות.
לנקב את העורק עבור דגימת דם משמש לעתים נדירות( בעיקר לחקר הרכב הגז של הדם העורקי).
העיתוי והתנאים להובלה של דגימות חומר ביולוגי גם לשחק תפקיד חשוב להבטיח את איכות תוצאות הבדיקה במעבדה.כאשר אספקת חומר למעבדה, זה תמיד צריך לזכור את התכונות של כמה דוגמאות.לדוגמה, בעת איסוף הדם העורקי לחקירת מיכל הרכב הגזים עם הדם צריך להיות אטום היטב, שקוע במי קרח, ואת בהקדם האפשרי הביא למעבדה, מאז הגליקוליזה בתאי דם אדומים לויקוציטים גורמת לירידה pH כאשר המדגם יהיה כ 20 דקות בטמפרטורת החדר.דרישות אלה חייב להיות גם שנצפו במחקר של דם נימי, אשר נלקח נימי heparinized.דם עבור adrenocorticotropic הורמון( ACTH), אנגיוטנסין אני, II, רנין גם צריך להיות ממוקם מיד לאחר הגדר בקרח ונמסר למעבדה בהקדם האפשרי.
באופן כללי, על מנת למנוע את השפעת גורם הזמן על תוצאות הניתוחים, יש להעביר את החומר למעבדה במהירות האפשרית.כמה שיותר מוקדם יותר בסרום מופרד תאים אדומים, הקטנה שפעת הגליקוליזה( כלומר הקטן תהיה ההשפעה על ריכוז גלוקוז, זרחן, ואת הפעילות של אנזימים מסוימים).ריכוז הבילירובין בדם יורד תחת השפעת האור( במיוחד אור שמש בהיר).השפעת האור גם מגבירה את הפעילות של phosphatase אלקליין.גורם הזמן הוא גם מאוד חשוב עבור מחקרים בקטריולוגיים( כמה חיידקים למות בטמפרטורת החדר).
ביולוגי משלוחבמעבדה צריך ליפול בתוך מרווחי שמוצג בטבלה. . כאשר התבוננות בהם מצליח למזער את ההשפעה השלילית של גורם זמני על תוצאות מעבדה.
טבלה 1-1.זמני אספקה למעבדה [Garza D., Becan-McBride K., 1989]
טבלה 1-1.זמני אספקה למעבדה [Garza D., Becan-McBride K., 1989]
יש לקבוע את מגבלות הזמן שנקבעו למשלוח לכל רופא.אם הם מופרים, דגימה חוזרת נדרשת, שכן לא ניתן להוציא את השפעת גורם הזמן על סטיות בתוצאות המחקרים.
בנוסף לכל האמור לעיל, כמות הווריאציה הביולוגית תלויה בתפקוד הפיזיולוגי המבוצע בגוף על ידי האנליטי.המאפיין וריאציה הקטן של חומרים ביולוגיים, החשוב ביותר עבור יציבות הרכב ונפח של נוזל חוץ-תאי ודם( נתרן, כלוריד, סידן, מגנזיום, אלבומין, חלבון הכולל, פחמן דו-חמצני).שינוי התואר הממוצע אופייני לחומרים המעורבים בתהליכים של אנאבוליזם( גלוקוז, כולסטרול, זרחן).בעלי רכיבי הווריאציה הביולוגיים הגדולים ביותר של סרום דם אשר הם מוצרי הקצה של פירוק( חומצת שתן, אוריאה, קריאטינין), כמו גם חומרים ואנזימים מבודדים מהרקמות [LDH, AST, aminotransferase אלאנין( ALT), וכו '].