Variazione biologica
I risultati degli studi di laboratorio sono soggetti all'influenza della variazione biologica e analitica. Se la variazione analitica dipende dalle condizioni del test, l'entità della variazione biologica è da un intero insieme di fattori. La variazione biologica totale dei parametri studiati a causa della variazione intraindividuale osservato nella stessa persona come un risultato dell'influenza dei ritmi biologici( diversi momenti del giorno, anno), e la variazione interindividuale causata da fattori sia endogeni ed esogeni, i principali dei quali sono mostrate in Fig.
I fattori biologici( fattori fisiologici, fattori ambientali, condizioni di campionamento, fattori tossici e terapeutici) possono influenzare i risultati degli studi di laboratorio. Alcuni di essi possono causare reali deviazioni dei risultati di laboratorio dai valori di riferimento al di fuori della connessione con il processo patologico [Menshikov VV, 1995].Questi fattori includono quanto segue.
■ Modelli fisiologici( influenza di razza, sesso, età, tipo di costituzione, natura e quantità di attività abituale, alimentazione).
■ Influenza dell'ambiente( clima, fattori geomagnetici, periodo dell'anno e giorno, composizione dell'acqua e del suolo nell'habitat, ambiente sociale e domestico).
Fig. Sequenza di valutazione dei risultati degli studi di laboratorio
Fig. La sequenza degli studi di laboratorio risultati della valutazione
■ Impatto agenti professionali e domestici tossici [alcol, nicotina, droghe) e effetto iatrogeno( procedure diagnostiche e terapeutiche per i medicinali( PM)].
■ Condizione campionamento( assunzione di cibo, l'attività fisica, la posizione del corpostress durante il campionamento, e altri.).
■ campionamento metodo sangue( metodo presa, attrezzi e utensili, conservanti, ecc.)
■ errato( nel tempo) del materiale recinzione.
■ condizioni( temperatura, agitazione,l'effetto della luce) e il trasporto di materiale biologico per la ricerca in un laboratorio.
Fig. Fattori che influenzano la variazione biologica [Garanina EN 1997].
Fig. Fattori che influenzano la variazione biologica [Garanina EN, 1997].
considera l'effetto dei fattori più importanti sui risultati degli esami di laboratorio.
pasti. la composizione della dieta di assunzione di cibo, rompe il suo ricovero hanno un impatto significativo su una serie di indicatori di analisi di laboratorio. Dopo 48 ore di digiuno, la concentrazione di bilirubina nel sangue può aumentare. Fame per 72 h diminuisce la concentrazione di glucosio nel sangue di persone sane e 2,5 mmol / l( 45 mg%), aumenta la concentrazione
di trigliceridi( TG), acidi grassi liberi, senza variazioni significative concentrazione di colesterolo( LDL) [Statland BE et al., 1973].
L'uso di cibi grassi può aumentare la concentrazione di potassio, TG e fosfatasi alcalina. L'attività della fosfatasi alcalina in questi casi può essere particolarmente aumentata nelle persone con il gruppo sanguigno O o B [Remes K. et al., 1994].I cambiamenti fisiologici dopo aver mangiato cibi grassi sotto forma di iperchilomicronemia possono aumentare la torbidità del siero del sangue( plasma) e quindi influenzare i risultati della misurazione della densità ottica. L'aumento della concentrazione lipidica sierica può essere dopo che il paziente ha consumato burro, crema o formaggio, il che porterà a risultati falsi e richiederà una nuova analisi.
Consumare una grande quantità di carne, cioè cibi ricchi di proteine, può aumentare la concentrazione di urea e ammoniaca nel siero, urare nelle urine. Il cibo con un elevato rapporto tra acidi grassi insaturi e saturi può causare una diminuzione della concentrazione di colesterolo nel siero e un alimento ricco di purine provoca un aumento della concentrazione di urato. Banane, ananas, pomodori, avocado sono ricchi di serotonina. Quando vengono utilizzati 3 giorni prima che l'urina venga testata per l'acido acetico 5-idrossiindolo, anche in una persona sana, la sua concentrazione può essere aumentata. Bevande ricche di caffeina, aumentano la concentrazione di acidi grassi liberi e causano il rilascio di catecolamine dalle ghiandole surrenali. L'assunzione di alcol aumenta la concentrazione di lattato, acido urico e TG nel sangue.
La regola generale per escludere l'influenza dell'assunzione di cibo sui risultati degli esami di laboratorio è la raccolta di sangue dopo un digiuno di 12 ore.
Esercizio.Il carico fisico può avere sia un effetto transitorio che a lungo termine su vari parametri dell'omeostasi.variazioni transitorie includono prima diminuzione e quindi aumento della concentrazione di acidi grassi liberi nel sangue, aumentando di concentrazione 180% ammoniaca e 300% - lattato, aumento dell'attività della creatina chinasi( CK), aspartato aminotransferasi( AST), lattato deidro-deidrogenasi( LDH[Garza D., Becan-McBride K., 1989].Esercizi fisici attivano la coagulazione del sangue, la fibrinolisi e l'attività funzionale delle piastrine. Le variazioni di questi indicatori sono associate all'attivazione del metabolismo, di solito ritornano ai valori originali( prima del carico fisico) subito dopo la cessazione dell'attività fisica. Tuttavia, l'attività di alcuni enzimi( aldolasi, CC, AST, LDH) può rimanere elevata entro 24 ore dopo 1 ora di intensa attività fisica.l'esercizio fisico prolungato aumenta la concentrazione nel sangue di ormoni sessuali, tra cui il testosterone, Andros tendion e l'ormone luteinizzante( LH) [Henry J. B, 1996].
stress emotivo può causare una leucocitosi transitoria, diminuzione della concentrazione di ferro e la variazione del livello di catecolamine nel sangue. Forte preoccupazione seguita da iperventilazione, provoca stato squilibrio acido-base( CBS) con concentrazioni crescenti di acidi grassi e di lattato nel sangue.
Altri fattori. Tra gli altri fattori che influenzano i risultati della ricerca sono importanti ritmi circadiani omeostasi, l'età, il sesso, la gravidanza, geografica del terreno posizione, altitudine, temperatura ambiente, il fumo. Fumatori possono
essere aumentata concentrazione di carbossiemoglobina( HbCO), cortisolo plasmatico catecolo-nuovo e siero. I cambiamenti nelle concentrazioni di questi ormoni, spesso portano ad una diminuzione del numero di eosinofili, mentre il contenuto di neutrofili, monociti e acidi grassi liberi aumenta. Fumo aumenta la concentrazione di emoglobina( Hb), conteggio degli eritrociti, volume medio degli eritrociti( MCV), e ridurre il numero di leucociti. In relazione a ciò, si raccomanda ai laboratori di stabilire i propri valori di riferimento locali per la propria popolazione.
Al fine di ridurre l'impatto dei fattori ridotti sui risultati dei test, prima di un prelievo di sangue per la ricerca è necessario astenersi da un intenso esercizio fisico e la ricezione di alcol, cambiamenti nella dieta per 24 ore. Il paziente non deve mangiare dopo cena, ha bisogno di andare a letto alla vigilia dal comune peril suo tempo e alzarsi non più tardi di 1 ora prima di prendere il sangue [Alstorm T. et al., 1993].Si raccomanda di raccogliere il sangue dal paziente nelle prime ore del mattino dopo un digiuno notturno di 12 ore( linea di base), che consente la massima standardizzazione delle condizioni dello studio.
Medicinali. Alcuni farmaci possono avere un impatto significativo sui risultati della ricerca. Per esempio, acido acetilsalicilico per determinare la durata tempo di ricezione di sanguinamento Duque dovrebbe cancellare 7-10 giorni prima dello studio, altrimenti risultato patologico può essere ottenuta. Nel caso in cui il farmaco assunto dal paziente possa influenzare il risultato dell'analisi e se è impossibile annullarlo, è necessario informare il laboratorio in merito.
L'effetto dei farmaci sui risultati degli studi di laboratorio può essere di due tipi.
■ Effetto fisiologico in vivo( nel corpo del paziente) dei farmaci e dei loro metaboliti.
■ Influenza in vitro( sulla reazione chimica utilizzata per determinare l'indice) dovuta alle proprietà chimiche e fisiche dei farmaci( interferenze).
Gli effetti fisiologici dei farmaci e dei loro metaboliti sono ampiamente noti ai professionisti. Considerare il valore dell'interferenza, cioè l'interferenza di un fattore estraneo nei risultati dell'analisi.
L'interferenza può essere causata dalla presenza nel campione del biomateriale di entrambe le sostanze endogene ed esogene. I principali fattori interferenti endogeni includono quanto segue.
■ emolisi, cioè ripartizione degli eritrociti in una resa della porzione liquida del sangue di un numero di componenti intracellulari( Hb, LDH, potassio, magnesio, ecc), che cambia i risultati effettivi di determinazione della concentrazione / attività dei componenti del sangue come bilirubina, lipasi CC, LDH, potassio, magnesio e altri.
■ Lipemia distorce i risultati di diverse tecniche colorimetriche e Nefele metriche( soprattutto per lo studio di fosforo, bilirubina totale, acido urico, proteine totali, elettroliti).
■ paraproteinemia causando cambiamenti nei risultati di determinazione da parte di alcuni metodi di fosfati, uree, kk, LDH, amilasi.
I più frequenti fattori interferenti esogeni sono i farmaci oi loro metaboliti. Pertanto, la determinazione delle catecolamine nelle urine metodo fluorimetrico intensa fluorescenza può causare il paziente ha ricevuto tetraciclina;propranololo metabolita 4-gidroksipropranolol interferire con metodi di determinazione della bilirubina Yendrassika Grau F e Evelyn-Mellow.
Per identificare l'interferenza dei farmaci - uno dei compiti di un medico di diagnostica clinica di laboratorio. Un passo importante nella risoluzione di questo problema è contattare il medico per scoprire la natura dei farmaci presi dal paziente.
Anche la posizione del corpo con il prelievo di sangue influisce su una serie di record. Pertanto, il cambiamento di posizione della posizione prona paziente in posizione eretta o seduta determina la penetrazione di acqua e sostanze filtrabili idrostatiche dal intravascolare allo spazio interstiziale. Sostanze ad alto peso molecolare( proteine), e le cellule rosse del sangue con sostanze correlate non avviene nei tessuti, quindi la loro concentrazione nel sangue aumenta( enzimi, proteine totali, albumina, ferro, bilirubina, colesterolo, trigliceridi, proteine PM correlati, calcio).La concentrazione di Hb, Ht e il numero di leucociti può aumentare.luogo
e tecnica di campionamento del sangue possono anche avere un effetto significativo sui risultati dei test di laboratorio( ad esempio, overlay cablaggio per un periodo di tempo superiore a 2 minuti quando prendendo sangue da una vena può causare emoconcentrazione e aumento delle concentrazioni ematiche di proteine, fattori della coagulazione, manutenzione di elementi cellulari).Il miglior luogo di prelievo di sangue per i test è la vena ulnare. Va anche notato che il sangue venoso è il materiale migliore non solo per determinare parametri biochimici, ormonali, sierologici, immunologici, ma anche per la ricerca clinica generale. Ciò è dovuto al fatto che attualmente in uso analizzatori ematologici con cui sottoposto esami del sangue clinici( conteggio delle cellule, determinando Hb, Ht, ecc), progettato per sangue venoso, e la maggior parte dei quali in paesi in cui sono prodotte,sono certificati e standardizzati per funzionare solo con sangue venoso. I materiali di calibrazione e controllo prodotti dalle aziende sono anche progettati per la calibrazione dell'analizzatore del sangue per il sangue venoso. Inoltre, nella preparazione di un certo numero dito possibile delle caratteristiche metodiche che standardizzano molto difficile sangue( freddo, ciano-cal, dita edematosi, la necessità di diluizione del sangue all'esame e al.), Che si traduce in una notevole variazione dei risultati ottenuti e di conseguenza - inLa necessità di ripetuti studi per chiarire il risultato. Per l'esame clinico generale, si raccomanda l'assunzione del sangue del dito nei seguenti casi.
■ Per ustioni che occupano una vasta area del corpo del paziente.
■ Se il paziente ha vene molto piccole o poco accesso ad esse.
■ Con grave obesità del paziente.
■ Con suscettibilità alla trombosi venosa.
■ Nei neonati.
La puntura dell'arteria per il prelievo di sangue è usata raramente( principalmente per studiare la composizione gassosa del sangue arterioso).
Anche i tempi e le condizioni per il trasporto di campioni di materiale biologico svolgono un ruolo importante nel garantire la qualità dei risultati dei test di laboratorio. Quando si consegna materiale al laboratorio, è sempre necessario ricordare le caratteristiche di alcuni campioni. Ad esempio, quando si raccolgono sangue arterioso per indagare contenitore composizione di gas di sangue deve essere ben sigillato, immerso in acqua ghiacciata, e quanto prima portato al laboratorio, poiché glicolisi nei globuli rossi e leucociti provoca una riduzione del pH quando il campione sarà circa 20 minuti a temperatura ambiente. Questi requisiti devono essere osservati nello studio del sangue capillare, che viene portato ai capillari eparinizzati. Sangue per gli studi sulla ormone adrenocorticotropo( ACTH), angiotensina I, II, renina dovrebbe essere immediatamente dopo la recinzione e poste in ghiaccio più presto portato al laboratorio.
In generale, per evitare l'influenza del fattore temporaneo sui risultati del test, il materiale consegna deve essere effettuata in laboratorio non appena possibile. Quanto prima il siero separato dai globuli rossi, minore è l'influenza della glicolisi( il che significa che il minore sarà l'effetto della concentrazione di glucosio, fosforo, e l'attività di alcuni enzimi).La concentrazione di bilirubina nel sangue diminuisce sotto l'influenza della luce( specialmente la luce del sole).L'effetto della luce aumenta anche l'attività della fosfatasi alcalina. Il fattore tempo è anche molto importante per gli studi batteriologici( alcuni batteri muoiono a temperatura ambiente).
biomateriale consegna in un laboratorio dovrebbe rientrare nell'ambito degli intervalli indicati nella tabella. . Quando li osserva riesce a ridurre al minimo l'influenza negativa del fattore temporanea sui risultati di laboratorio.
Tabella 1-1.Tempi di consegna al laboratorio [Garza D., Becan-McBride K., 1989]
Tabella 1-1.I tempi di consegna dei campioni al laboratorio [Garza D., Becan-McBride K., 1989]
Questi tempi di consegna standard deve conoscere ogni medico. Con il loro violazione richiede ricampionamento, da escludere l'influenza del fattore tempo sulla variazione dei risultati degli studi non è possibile.
Oltre a tutto quanto sopra, il valore della variazione biologica dipende dalla funzione fisiologica da eseguire nel corpo analita. La più piccola variazione caratteristica di sostanze biologiche, la più importante per la stabilità della composizione e il volume dei fluidi extracellulari e sangue( sodio, cloruro, calcio, magnesio, albumina, proteine totali, anidride carbonica).Variazione caratteristica moderata delle sostanze coinvolte nei processi di anabolismo( glucosio, colesterolo, fosforo).Possedere le maggiori componenti variabilità biologica di siero di sangue che sono i prodotti finali di catabolismo( acido urico, urea, creatinina), così come le sostanze ed enzimi isolati da tessuto [LDH, AST, alanina aminotransferasi( ALT), ecc].