Variasi analitis

Variasi analitis metode penelitian yang digunakan memiliki pengaruh besar terhadap hasil penelitian laboratorium. Kriteria utama untuk mengevaluasi metode penyelidikan adalah akurasi, reproduktifitas, spesifisitas, kepekaan.

■ Akurasi mencirikan validitas metode dalam menentukan nilai pasti( konsentrasi) suatu zat. Sebagai contoh, perbedaan sistematis antara hasil penentuan natrium dalam satu sampel lebih dari 3 mmol / l dianggap tidak dapat diterima. Di sisi lain, perbedaan yang lebih signifikan antara konsentrasi hormon tertentu yang ditentukan oleh ELISA dengan AT berbeda dianggap dapat diterima, karena penggunaan obat AT yang berbeda memberikan efek matriks yang berbeda. Untuk alasan ini, berbagai interval nilai referensi ditetapkan untuk metode immuno-enzymatic individu untuk menentukan hormon.

■ Kemampuan reproduktifitas metode dievaluasi dengan mengukur konsentrasi zat dalam sampel yang sama beberapa kali dalam satu hari dan dalam satu rangkaian sampel. Keesokan harinya mereka melakukan pengukuran yang sama dengan sampel yang sama. Biasanya penyimpangan dalam pengukuran tunduk pada hukum Gaussian, yang mengindikasikan kestabilan metode. Untuk setiap rangkaian pengukuran, hitunglah nilai rata-rata( Xcp).Kemudian cari perbedaan antara nilai masing-masing pengukuran dan rata-rata ini dan hitunglah standar deviasi( S) dan koefisien variasi( V).Tentukan koefisien variasi pada hari lain, dan jika tidak melebihi 5%, maka metode penyidikan dianggap memadai. Untuk enzim, V bisa mencapai 10%.Adalah tanggung jawab masing-masing laboratorium untuk memverifikasi kemampuan reproduktifitas metode yang diperkirakan dari standar deviasi( SD).Misalnya, reproduktifitas dalam menentukan konsentrasi kolesterol total dalam serum darah di laboratorium yang baik biasanya rata-rata +0,13 mmol / l. Diketahui bahwa interval kepercayaan 95% adalah + 2SD, yang dalam hal ini sesuai dengan 0,26 mmol / l. Jadi, setiap hasil dianggap benar jika berada dalam batas ini( +0,52 mmol / l).Dengan demikian, konsentrasi total kolesterol dalam serum darah adalah 5,18 mmol / l, artinya nilai sebenarnya adalah antara 4,92 dan 5,44 mmol / l.

■ Spesifisitas - kemampuan metode untuk mengukur hanya komponen yang dimaksudkannya. Untuk menilai spesifitas analitis, penggunaan kotoran digunakan, berdasarkan struktur kimia, merupakan perwakilan perwakilan kelompok zat yang secara fisiologis memiliki signifikansi praktis

.Untuk tingkat yang lebih besar ini berlaku untuk obat-obatan yang dapat menyebabkan gangguan kimia selama analisis berlangsung. Spesifisitas rendah dan pengaruh gangguan menyebabkan hasil yang salah( jangan dikelirukan dengan kekhususan metode patologi).

■ Sensitivitas analitis metode ini adalah jumlah zat terkecil( konsentrasi terendah) yang dapat dideteksi dengan metode ini. Konsep ini harus dibedakan dari kepekaan metode sehubungan dengan pendeteksian patologi tertentu. Ketika memilih metode penelitian, perlu memperhatikan sensitivitas analitis metode ini, karena kualitas hasil penelitian bergantung pada hal ini. Misalnya, Order No. 282 dari Kementerian Kesehatan Federasi Rusia tanggal 28.09.98 "Dengan menggunakan sistem enzim kekebalan tubuh untuk mendeteksi virus hepatitis B superfisial( HBsAg) dan virus anti-HCV( anti-HCV) dalam sera manusia"sistem untuk mendeteksi HBsAg, sensitivitasnya melebihi 0,5 ng / ml, serta sistem uji untuk mendeteksi anti-HCV yang tidak mengandung protein yang dikodekan oleh wilayah RNA NS3 virus hepatitis C. Penggunaan sistem uji untuk mendeteksi HBsAg dengan sensitivitasdiatas 0,5 ng / ml dan tidak mengandung protein dalam komposisinyain, yang dikodekan oleh zona NS3 RNA virus hepatitis C, mengarah pada fakta bahwa virus hepatitis B dan C pada sejumlah pasien tidak terdiagnosis.

Variasi analitis, tergantung pada metode yang digunakan dan kondisi pelaksanaannya, memperluas batas indikator laboratorium normal dan ini membatasi kemungkinan uji laboratorium untuk membedakan antara kesehatan dan penyakit. Oleh karena itu, spesialis laboratorium harus berusaha mengurangi variasi analitis. Dalam tabelbatas maksimum variasi analitis( penyebaran) dari komponen yang dianalisis diberikan.

nilai variasi analitis yang diijinkan( V) dianggap sebagai nilai indikatif rata-rata. Variasi ini, yang diberikan untuk leukosit dan eritrosit, mengacu pada perhitungan elemen seluler dengan metode manual, dengan penggunaan analisis hematologis, koefisien variasi analitik untuk leukosit adalah 1-3%, untuk eritrosit 1-2%, trombosit 2-4% [Elevitch FR etal., 1987;Koepke, J. A., 1993].

Konfirmasi bahwa variasi analitis metode ini dapat memiliki pengaruh yang signifikan terhadap hasil penelitian yang diberikan pada Tabel.data interval kepercayaan 95% saat menghitung formula darah leukosit, diperoleh berdasarkan analisis statistik.

Dengan demikian, ketika mengevaluasi hasil penelitian laboratorium, dokter harus mempertimbangkan berbagai faktor yang mempengaruhi hasil, mengetahui keandalan analitis metode penelitian laboratorium, yaitu, memastikan keakuratan informasi yang diperoleh dengan bantuan mereka mengenai komponen biomaterial yang relevan. Pengetahuan tentang tingkat variabilitas hasil penelitian penting untuk perbandingan dengan variabilitas biologis, dan juga untuk perbandingan dengan pergeseran signifikan klinis pada indikator laboratorium. Kriteria ini ditentukan saat mengembangkan metode, menunjukkan dalam deskripsi mereka, dan jika perlu, dokter laboratorium harus memberi tahu dokter tentang hal itu. Tabel

Batas maksimum yang diizinkan untuk variasi analitis( variasi) untuk berbagai komponen( Compendium of Laboratory Diagnostic Methods, 1984 6.1. CMLD)

Klinik perlu mempertimbangkan fakta berikut di tingkat teknis dan biologi evaluasi hasil laboratorium.

■ Perbandingan hasil analisis dengan rentang referensi dari nilai yang sesuai hanya menunjukkan probabilitas kepatuhan atau ketidakpatuhan terhadap hasil ini dengan norma.

■ Ada perbedaan fisiologis pada nilai normal dan variasi fisiologis dari hari ke hari( variasi biologis).

■ Ada perbedaan teknis dan kecil dalam hasil analisis yang diperoleh pada hari yang berbeda( variasi analisis metode).

■ Rentang referensi dapat bervariasi dengan berbagai metode laboratorium.

■ Perubahan kandungan komponen uji tidak spesifik dan tidak terkait dengan gangguan metabolik primer komponen ini( gangguan, hemolisis, lipemia, penggunaan narkoba, dll.).

■ Ada variasi acak, penyebabnya saat ini tidak jelas, namun harus dipertimbangkan saat menafsirkan hasil analisis berulang;Misalnya, variasi harian dalam konsentrasi zat besi dalam darah sangat besar dan bisa menyulitkan untuk mengidentifikasi pola perubahan pada komponen ini.

■ Saat memeriksa serum plasma atau darah, informasi tentang konsentrasi ekstraselular dari komponen uji diperoleh. Konsentrasi ini bergantung pada jumlah air di ruang ekstraselular sehubungan dengan jumlah komponen yang diukur dan mungkin tidak selalu mencerminkan tingkat intraselular zat uji.