Analisis cairan cerebrospinal( cairan Cerebrospinal) - Penyebab, gejala dan pengobatan. MF.

Liquor( serebrospinal atau serebrospinal fluid, CSF) adalah cairan biologis yang diperlukan untuk berfungsinya sistem saraf pusat. Penelitiannya adalah salah satu jenis penelitian laboratorium yang paling penting. Ini terdiri dari tahap pra-analitik( persiapan subjek, pengumpulan materi dan pengirimannya ke laboratorium), analitis( pelaksanaan penelitian yang sebenarnya) dan analisis pasca( decoding hasil).Hanya eksekusi semua manipulasi yang benar pada masing-masing tahapan ini menentukan kualitas analisis.

Cairan serebrospinal( cairan serebrospinal) terbentuk di pleksus vaskular ventrikel otak. Pada manusia dewasa, 110-160 ml CSF beredar bersamaan di ruang subarchnoid dan di ventrikel otak, 50-70 ml di kanal tulang belakang. Minuman keras terbentuk terus menerus pada tingkat 0,2-0,8 ml / menit, yang tergantung pada tekanan intrakranial. Sehari pada orang sehat, 350-1150 ml cairan serebrospinal terbentuk.

Minuman keras diperoleh melalui tusukan kanal tulang belakang, lebih sering - lumbal - sesuai dengan prosedur, ahli neuropatologi dan ahli bedah saraf yang terkenal. Tetesan pertama dikeluarkan( darah "perjalanan").Kemudian cairan cerebrospinal dikumpulkan dalam setidaknya 2 tabung: dalam tabung reaksi konvensional( kimiawi, sentrifugal) untuk analisis klinis dan kimia secara umum, dan steril untuk pengujian bakteriologis. Dalam bentuk rujukan untuk studi CSF, dokter harus menunjukkan tidak hanya nama pasien, tetapi juga diagnosis klinis dan tujuan penelitian.

Harus diingat bahwa sampel minuman keras yang dikirim ke laboratorium harus dilindungi dari pemanasan berlebih atau pendinginan, dan sampel yang dirancang untuk mendeteksi polisakarida bakteri dalam tes serologis harus dipanaskan dalam bak air selama 3 menit.

Pemeriksaan laboratorium laboratorium terhadap cairan cerebrospinal( tahap analitis) dilakukan sesuai dengan semua peraturan yang diadopsi dalam diagnostik laboratorium klinis dalam analisis cairan biologis dan mencakup langkah-langkah berikut: Analisis makroskopik

- penilaian sifat fisik dan kimia( volume, warna, sifat),
- menghitung jumlah sel,
- mikroskop dari sediaan asli dan studi sitologi dari persiapan berwarna;
- studi biokimia,
- pemeriksaan mikrobiologi( sesuai indikasi).

Kami merasa perlu dan informatif dalam beberapa kasus untuk melengkapi studi CSF dengan tes kekebalan dan mungkin tes lainnya, yang penting yang dibahas dalam literatur khusus.

Decoding indikator CSF

Normal CSF tidak berwarna dan berpori( seperti air suling, jika dibandingkan dengan sifat fisik cairan biasanya dijelaskan).

Warna abu-abu atau abu-abu hijau dari minuman keras biasanya disebabkan oleh campuran mikroba dan leukosit. Warna merah CSF dengan intensitas yang berbeda( eritrochromia) disebabkan oleh campuran eritrosit, yang terjadi dengan perdarahan segar atau trauma otak. Secara visual kehadiran sel darah merah terdeteksi saat kandungannya lebih dari 500-600 μl.

Dalam proses patologis, cairan bisa berwarna xanthochromic berwarna kuning atau kuning-coklat oleh produk penguraian hemoglobin. Hal ini juga perlu untuk mengingat xanthrochromy palsu, warna minuman keras yang disebabkan oleh obat-obatan. Kurang sering kita bertemu dengan warna hijau kehijauan CSF( purulen meningitis, abses otak).Dalam literatur, warna kerak cairan cerebrospinal juga dijelaskan - dengan terobosan kista kraniofaringemia pada cairan serebrospinal.

Kekeruhan cairan serebrospinal bisa terjadi karena pengotor sel darah atau mikroorganisme. Dalam kasus terakhir, kekeruhan dapat dihilangkan dengan sentrifugasi. Bila CSF mengandung peningkatan jumlah protein yang terdispersi kasar, maka akan menjadi opalescent.

Kerapatan relatif cairan serebrospinal yang didapat dengan tusukan lumbal, 1,006-1.007.Dengan pembengkakan meninges, trauma otak, kepadatan relatif cairan serebrospinal meningkat menjadi 1,015.Ini menurun dengan hiperproduksi cairan serebrospinal( hidrosefalus).

Dengan kandungan fibrinogen tinggi di CSF, sebuah film fibrinous atau bekuan berkembang, yang lebih sering terjadi pada meningitis tuberkulosis. Kadang tabung uji dengan cairan dibiarkan pada suhu kamar selama 24 jam( jika perlu ditentukan dengan tepat - apakah bentuk filmnya?).Dengan adanya film fibrinous, ditransfer oleh jarum bedah ke slide dan diwarnai oleh Tsil-Nielsen atau metode lain untuk mendeteksi mikobakteri. CSF normal adalah 98-99% air.

Namun demikian, studi tentang komposisi kimianya merupakan tugas penting. Ini termasuk penentuan kadar protein, glukosa dan klorida, dan dalam beberapa kasus dilengkapi dengan indikator lainnya.

Protein dalam minuman keras

Lebih dari 80% protein CSF berasal dari plasma dengan ultrafiltrasi. Kandungan protein normal dalam porsi yang berbeda: pada ventrikel - 0,05-0,15 g / l, tangki 0,15-0,25 g / l, luminal 0,15-0,35 g / l. Salah satu metode standar( dengan asam sulfosalicylic dan ammonium sulfate, dll.) Dapat digunakan untuk menentukan konsentrasi protein dalam minuman keras. Peningkatan kandungan protein pada cairan serebrospinal( hiperproteinarchy) mungkin disebabkan oleh berbagai faktor patogenetik( Tabel 1).

Penelitian tentang protein CSF memungkinkan kita tidak hanya untuk mengklarifikasi sifat proses patologis, tetapi juga untuk menilai keadaan penghalang hemato-encephalic. Indikator untuk tujuan ini dapat berfungsi sebagai albumin asalkan tingkatnya di CSF ditentukan oleh metode imunokimia. Penentuan albumin dilakukan sehubungan dengan fakta bahwa protein protein tidak disintesis secara lokal dan oleh karena itu dapat menjadi "penanda" imunoglobulin yang telah menembus dari aliran darah karena gangguan permeabilitas. Penentuan albumin secara simultan dalam serum( plasma) darah dan CSF memungkinkan untuk menghitung indeks albumin:

Dengan penghalang hemato-encephalic utuh, indeks ini kurang dari 9, dengan kerusakan sedang adalah 9-14, dengan 14-30 terlihat, jika terjadi kerusakan parah, 30-100, dan peningkatan lebih dari 100 menunjukkan kerusakan yang lengkap pada penghalang.

Dalam beberapa tahun terakhir, minat pada protein CSF spesifik CNS - enolase spesifik neuron, protein S-100, protein dasar myelin( MBM) dan beberapa lainnya telah meningkat. Salah satu yang menjanjikan di antara mereka untuk tujuan klinis adalah OBM.Dalam minuman keras normal itu praktis absen( konsentrasinya tidak melebihi 4 mg / l) dan hanya muncul dalam kondisi patologi. Atribut laboratorium ini tidak spesifik untuk bentuk nosologis tertentu, namun mencerminkan tingkat lesi( terutama terkait dengan penghancuran materi putih).Beberapa penulis menganggap menjanjikan definisi MBP pada cairan serebrospinal untuk pemantauan neurospida. Sayangnya, saat ini masih ada permasalahan terkait langsungnya penentuan konsentrasi protein ini.

Glukosa dalam cairan

Glukosa terkandung dalam cairan normal dalam konsentrasi 2,00-4,18 mmol / l. Nilai ini tunduk pada fluktuasi yang signifikan, bahkan pada orang sehat, tergantung pada diet, olahraga, faktor lainnya. Untuk penilaian yang benar terhadap kadar glukosa pada cairan serebrospinal, dianjurkan untuk secara simultan menentukan kadar darahnya, biasanya biasanya 2 kali lebih tinggi. Peningkatan kadar glukosa darah( hyperglycosurgy) terjadi pada diabetes melitus, ensefalitis akut, gangguan peredaran iskemik dan penyakit lainnya. Arkhositosis hipoglikotik dicatat dengan meningitis dari etiologi atau peradangan aseptik yang berbeda, kerusakan tumor pada otak dan selaput, kurang sering - dengan infeksi herpetik, perdarahan subarachnoid.

Beberapa kelebihan glukosa sebagai penanda diagnostik adalah laktat( asam laktat), karena konsentrasinya di CSF( 1,2-2,1 mmol / l) tidak bergantung pada hal itu dalam darah. Tingkatnya meningkat secara signifikan pada berbagai kondisi yang terkait dengan pelanggaran metabolisme energi - terutama meningitis - disebabkan oleh flora gram positif, hipoksia otak dan beberapa lainnya.

Klorida dalam minuman keras

Klorida - kandungan dalam cairan normal - 118-132 mmol / l. Konsentrasi yang meningkat di CSF diamati saat ada pelanggaran ekskresi mereka dari tubuh( penyakit ginjal, penyakit jantung), dengan penyakit degeneratif dan tumor pada sistem saraf pusat. Pengurangan kadar klorida diamati dengan ensefalitis dan meningitis. Enzim

dalam minuman keras

Liquor ditandai dengan aktivitas enzim yang rendah yang terkandung di dalamnya. Perubahan aktivitas enzim di CSF untuk berbagai penyakit sebagian besar tidak spesifik dan sejajar dengan pergeseran darah yang dijelaskan dalam penyakit ini( Tabel 2).Penafsiran lain layak mendapat interpretasi perubahan aktivitas creatine phosphokinase( CKF).Enzim ini dalam jaringan dari tiga faksi, yang ditandai tidak hanya oleh perbedaan molekuler, tetapi juga sifat dari distribusi di jaringan: CK-MB( miokardium), CK-MM( otot), CK-BB( otak).Jika aktivitas total CK di CSF tidak memiliki nilai diagnostik dasar( mungkin akan meningkat ketika tumor, infark serebral, epilepsi dan penyakit lainnya), fraksi CK-BB adalah penanda yang relatif spesifik jaringan otak rusak dan aktivitas di CSF berkorelasi dengan skala Glasgow. Jumlah

sel dan cytogram

minuman keras Dalam studi cairan biologis dan CSF termasuk biasanya menghitung jumlah sel-sel di cytogram dan pap azureozinom bernoda( Romanovsky-Giemsa Nocht, Pappenheim).Menghitung elemen sel dalam cairan serebrospinal( penentuan cytosis) diproduksi menggunakan ruang Fuchs-Rosenthal, pra-pemuliaan itu Samson reagen 10 kali. Penggunaan pewarna khusus ini, tidak ada yang lain.memungkinkan sel-sel untuk noda selama 15 menit dan menjaga sel-sel tidak berubah hingga 2 jam.

Jumlah sel di seluruh ruangan dibagi 3, jadi sitosis diperoleh dalam 1 μl. Untuk akurasi yang lebih besar, sitosis dipertimbangkan dalam tiga ruang. Ketika Fuchs-Rosenthal ruang tidak adanya Goryaeva dapat menggunakan kamera, dengan menghitung sel-sel di seluruh grid seperti pada tiga ruang, hasilnya dikalikan dengan 0,4.Sampai saat ini, ada perbedaan dalam unit pengukuran sitosis - jumlah sel dalam ruangan, dalam 1 μl atau 1 liter. Mungkin disarankan untuk tetap mengekspresikan sitosis dengan jumlah sel dalam μL.Untuk menghitung jumlah leukosit dan eritrosit di CSF, sistem otomatis juga bisa digunakan. Peningkatan sel

konten dalam CSF( pleositosis) sering muncul dalam penyakit inflamasi, untuk tingkat yang lebih rendah - dengan iritasi meningeal. Pleocytosis yang paling menonjol dicatat dengan infeksi bakteri, kerusakan otak jamur dan meningitis tuberkulosis. Dalam epilepsi, arachnoiditis, hidrosefalus, proses degeneratif, dan beberapa penyakit lain dari jumlah sel sistem saraf pusat tetap normal.

Pewarnaan sel dari persiapan asli dengan reagen Samson memungkinkan untuk membedakan sel secara cukup. Tapi karakteristik morfologi mereka lebih akurat setelah fiksasi dan pewarnaan sediaan sitologi yang disiapkan. Pendekatan modern untuk persiapan obat-obatan tersebut melibatkan penggunaan sitosfer. Namun, bahkan di AS mereka hanya dilengkapi dengan 55% laboratorium. Oleh karena itu, dalam praktiknya, metode yang lebih sederhana digunakan - pengendapan sel pada slide. Obat harus dikeringkan dengan baik di udara, lalu dicat.

Dalam persiapan berwarna, jumlah sel dihitung. Mereka terutama diwakili oleh sel-sel darah( biasanya - limfosit dan neutrofil, setidaknya - monosit, eosinofil, basofil) dapat memenuhi plasma dan tiang sel, makrofag, bola kasar( bentuk degeneratif jenis khusus dari makrofag - lipofagov mampu degenerasi lemak), sel-sel arahnoendoteliya, epindimy. Morfologi elemen sel ini umumnya dikenal dokter dan diagnosis laboratorium dijelaskan secara rinci dalam banyak buku teks. Tingkat dan sifat dari CSF cytogram pleositosis memungkinkan untuk menentukan sifat dari proses patologis( Tabel 3).

Leukositosis neutrofil sering menyertai infeksi akut( meningitis lokal dan menyebar).Eosinofilia CSF diamati cukup jarang - dengan echinococcosis otak, meningitis eosinofilik. Eosinofilia CSF tidak berkorelasi, sebagai aturan, dengan jumlah eosinofil dalam darah. Limfosit pleositosis cairan serebrospinal terjadi pada meningitis virus, multiple sclerosis, pada fase kronis meningitis tuberkulosis, setelah operasi pada membran otak. Dengan proses patologis dari sisi sistem saraf pusat, ada polimorfisme limfosit, di antaranya ada yang aktif. Mereka ditandai dengan adanya sitoplasma pucat yang melimpah dengan butiran azurofilik individual, beberapa sel memiliki ligatur atau fragmentasi sitoplasma( clasmatosis).Sel plasma muncul dalam sitogram untuk meningitis virus atau bakteri, proses inflamasi lambat, selama pemulihan dengan neurosifilis. Monosit yang terpapar CSF di CSF lebih cepat dari limfosit, diamati dengan multiple sclerosis, panencephalitis progresif, proses peradangan intensitas rendah kronis. Minuman makrofag - "sanitari", muncul dengan perdarahan, infeksi, nekrosis traumatik dan iskemik.

Terkadang di CSF ada sel atipikal - elemen, yang dalam ciri morfologi mereka tidak dapat dikaitkan dengan bentuk seluler tertentu. Sel atipikal ditemukan pada proses peradangan kronis( meningitis tuberkulosis, multiple sclerosis, dll.), Dan seringkali mereka adalah sel tumor. Probabilitas menemukan sel tumor pada cairan serebrospinal adalah kecil( tidak lebih dari 1,5%).Deteksi sel blast di CSF dalam hemoblastosis memungkinkan kita untuk berbicara tentang neuroleukemia.

Saat menganalisis komposisi CSF, penting untuk mengevaluasi rasio protein dan elemen sel( disosiasi).Dalam disosiasi protein-sel, pleositosis yang diucapkan diamati dengan kandungan protein normal atau sedikit meningkat. Ini adalah karakteristik meningitis. Diferensiasi Belkovokletochnaya ditandai dengan hyperproteinarchy pada sitosis normal. Kondisi ini khas untuk proses stagnan pada cairan serebrospinal( tumor, arachnoiditis, dll.).

Situasi klinis terkadang memerlukan penghitungan jumlah eritrosit pada cairan cerebrospinal berdarah( untuk menilai volume perdarahan).Menghitung sel darah merah sama dengan darah. Seperti yang ditunjukkan di atas, warna CSF bervariasi, jika 1 μl mengandung lebih dari 500-600 sel darah merah, pewarnaan yang nyata terjadi bila ada sekitar 2000, dan menjadi hemoragik bila tingkat eritrosit lebih dari 4000 / μl.

Investigasi mikrobiologi CSF

Salah satu penyakit SSP yang sering terjadi adalah penyakit meningitis purulen. Dalam kasus tersebut, penelitian mikorobiologi menjadi sangat relevan. Ini termasuk tes orientasi - bakterioskopi obat-obatan dan teknik kultur klasik. Bakterioskopi cairan serebrospinal memiliki nilai diagnostik terbatas, terutama saat mendapatkan CSF yang jelas. Bibir yang dibuat dari endapan minuman keras yang diperoleh dengan sentrifugasi dibarengi dengan metilen biru atau Gram, walaupun beberapa pengarang percaya bahwa varian terakhir pewarnaan "traumatis" unsur seragam dan menciptakan artefak. Dengan meningitis dan abses, beragam flora ditemukan yang sesuai dengan sifat penyakitnya. Terlepas dari hasil mikroskopi, diagnosis meningitis bakteri tentu harus dikonfirmasi dengan tes kultur, yang menjadi penentu dalam diagnosis kelompok penyakit ini dan pilihan terapi yang memadai. Hal ini dilakukan sesuai dengan Pesanan No. 375 dari Kementerian Kesehatan Federasi Rusia 23.12.98 "Pada langkah-langkah untuk memperkuat pengawasan epidemiologi dan pencegahan infeksi meningokokus dan meningitis bakteri purulen."Penyebab meningitis bakteri yang paling umum adalah Gram-negative diplococcus Neisseria meningitidis, yang pada 80% kasus dapat dideteksi dengan antibiotika.

CSF liquor

Biasanya, hanya limfosit dan monosit yang ada di CSF. Dengan berbagai penyakit dan kondisi patologis pada cairan serebrospinal, jenis sel lainnya mungkin muncul.

Limfosit dalam ukurannya mirip dengan sel darah merah. Limfosit memiliki inti yang besar dan pelek sitoplasma yang tipis dan tidak dicat. Biasanya, minuman keras mengandung 8-10 sel limfosit. Jumlahnya meningkat dengan tumor pada sistem saraf pusat. Limfosit ditemukan pada proses peradangan kronis pada selaput( meningitis tuberkulosis, aritnoiditis cysticercosis).

Sel plasmat dalam minuman keras. Sel lebih besar dari limfosit, nukleusnya besar, terletak secara eksentrik, sejumlah besar sitoplasma dengan ukuran nukleus yang relatif kecil( ukuran sel - 6-12 mikron).Sel plasmatik di CSF hanya ditemukan pada kasus patologis dengan proses peradangan jangka panjang di otak dan membran, dengan ensefalitis, meningitis tuberkulosis, sistolikosis arachnoiditis dan penyakit lainnya, pada periode pasca operasi, dengan penyembuhan luka yang lambat. Monosit Tissue

dalam minuman keras. Ukuran sel adalah 7 sampai 10 μm. Dalam cairan normal, terkadang bisa terjadi dalam bentuk spesimen tunggal. Monosit terdeteksi pada cairan serebrospinal setelah intervensi bedah pada sistem saraf pusat, dengan proses peradangan jangka panjang di membran. Kehadiran monosit jaringan menunjukkan reaksi jaringan aktif dan penyembuhan luka normal. Makrofag

dalam minuman keras. Dapat memiliki nukleus dari berbagai bentuk, lebih sering nukleus terletak di pinggiran sel, sitoplasma mengandung inklusi dan vakuola. Dalam cairan normal, makrofag tidak ditemukan. Kehadiran makrofag dengan jumlah sel normal pada cairan serebrospinal diamati setelah perdarahan atau dalam proses inflamasi. Sebagai aturan, mereka terjadi pada periode pasca operasi, yang memiliki nilai prognostik dan berbicara tentang pemurnian aktif CSF.

Bola grainy dalam minuman keras. Sel dengan infiltrasi lemak - makrofag dengan adanya tetesan lemak di sitoplasma. Dalam persiapan cairan berwarna, sel-sel memiliki nukleus kecil yang terletak di pinggir dan sitoplasma sel besar. Ukuran sel berbeda dan tergantung pada tetesan lemak yang disertakan. Bola granular ditemukan dalam cairan patologis yang diperoleh dari kista otak di fokus kerusakan pada jaringan otak, dengan tumor.

Neutrofil dalam minuman keras. Di dalam ruangan, neutrofil darah perifer identik dalam penampilan. Adanya neutrofil pada cairan serebrospinal, meski dalam jumlah minimal, mengindikasikan adanya reaksi inflamasi sebelumnya atau yang sudah ada. Adanya neutrofil yang berubah mengindikasikan redaman proses inflamasi.

Eosinofil dalam minuman keras. Tentukan dalam cairan serebrospinal oleh perincian yang seragam dan mengkilap. Eosinofil ditemukan pada perdarahan subarachnoid, meningitis, tuberkulosis dan tumor otak sifilis. Sel epitel

di CSF.Sel epitel, yang membatasi ruang subarachnoid, ditemukan di cairan serebrospinal cukup jarang. Ini adalah sel bulat besar dengan inti bulat atau oval kecil. Ditemukan oleh neoplasma, terkadang disertai proses inflamasi.

Sel tumor dan kompleks pada cairan serebrospinal. Mereka ditemukan di sel dan cairan sulingan berwarna. Sel ganas dapat merujuk pada jenis tumor berikut: medondoblastoma

• ;Spongioblastoma
• ;Astrocytoma
• ;
• kanker. Kristal

dalam minuman keras. Terjadi pada cairan serebrospinal jarang, dalam kasus pembusukan tumor.

Unsur Echinococcus pada cairan serebrospinal, kait, scolex, potongan membran chitinous - jarang ditemukan pada cairan serebrospinal.

PCR diagnostik minuman keras

Dalam beberapa tahun terakhir, prospek tertentu dalam diagnosis etiologi neuroinfeksi telah dikaitkan dengan pengembangan mekanisme genetik molekuler untuk mendeteksi agen penyebab penyakit menular dalam cairan serebrospinal( diagnostik PCR).

Dengan demikian, cairan serebrospinal adalah lingkungan yang bereaksi dengan jelas terhadap proses patologis pada sistem saraf pusat. Kedalaman dan sifat perubahannya disebabkan oleh kedalaman gangguan patofisiologis. Evaluasi yang benar atas gejala cairan laboratorium memungkinkan untuk mengklarifikasi diagnosis dan mengevaluasi keefektifan pengobatan.

V.V.Bazarian profesor UGMA, wakil kepala dokter OKB nomor 1