Réaction en chaîne de la polymérase dans le diagnostic des maladies infectieuses

PCR - l'une des méthodes pour le diagnostic d'ADN permettant d'augmenter le nombre de copies d'une partie détectable du génome( ADN) de bactéries ou de virus est un million de fois en utilisant une enzyme ADN polymerase. Le segment de l'acide nucléique testé pour un génome donné est multiplié( amplifié) plusieurs fois, ce qui permet de l'identifier. Tout d'abord, une molécule d'ADN de bactéries ou de virus par chauffage divisé en deux chaînes, puis en présence des amorces d'ADN synthétisés( séquence de nucleotides spécifiques de l'ADN génomique défini) est de les lier avec des étirements complémentaires de l'ADN, synthétisé le second brin de l'acide nucléique après chaque amorce en présence d'une ADN polymérase thermostable. Deux molécules d'ADN sont obtenues. Le processus est répété plusieurs fois. Pour le diagnostic, une molécule d'ADN, c'est-à-dire une bactérie ou une particule virale, est suffisante. La réaction d'une étape supplémentaire - la synthèse d'ADN sur la molécule d'ARN en utilisant l'enzyme transcriptase inverse - a permis de tester des virus à ARN tels que le virus du VHC.La PCR est un processus en trois étapes, répété cycliquement: dénaturation, hybridation d'amorces, synthèse d'ADN( polymérisation).La quantité synthétisée d'ADN est identifiée par ELISA ou par électrophorèse.

La PCR peut être utilisé divers matériel biologique - du sérum ou du plasma sanguin, le grattage de l'urètre, une biopsie, du liquide pleural, du liquide céphalorachidien, etc. La première PCR a été utilisée pour le diagnostic des maladies infectieuses, telles que le VHB, le VHC, le VHB, une infection à CMV, une infection sexuellement transmissible infectieuse( gonorrhée, diynaya poubelle, le plasma myco, infection ureaplasmal), la tuberculose, le VIH et ainsi de suite.e.

avantage PCR dans le diagnostic des maladies infectieuses sur les autres méthodes d'études est la suivante: ■

agent infectieux peut être détectée dans un environnement biologique de l'organisme, y compris les matières obtenues par biopsie;

■ Diagnostic des maladies infectieuses aux premiers stades de la maladie;

■ évaluation quantitative des résultats des études( combien de virus ou de bactéries sont contenus dans le matériel étudié);

■ haute sensibilité de la méthode;par exemple, la sensibilité de la PCR pour détecter l'ADN viral du VHB dans le sang est de 0,001 pg / ml( environ 4h102 copies / ml), alors que la sensibilité d'un procédé d'hybridation d'ADN en utilisant des sondes ramifiés - 2,1 pg / ml( environ 7h105 copies / ml).