Analytisk variation

Den analytiske variation af den anvendte forskningsmetode har en stor indflydelse på resultaterne af laboratorieundersøgelser. De vigtigste kriterier for evaluering af undersøgelsesmetoden er nøjagtighed, reproducerbarhed, specificitet, følsomhed.

■ Nøjagtighed karakteriserer metodenes validitet ved bestemmelse af stoffets nøjagtige værdi( koncentration).For eksempel anses den systematiske forskel mellem resultaterne af bestemmelsen af ​​natrium i en prøve på mere end 3 mmol / l uacceptabel. På den anden side anses den mere signifikante forskel mellem koncentrationerne af bestemte hormoner bestemt ved ELISA med forskellige AT, acceptabel, da anvendelsen af ​​forskellige AT-lægemidler giver forskellige matrixeffekter. Af denne grund etableres forskellige intervaller af referenceværdier for individuelle immuno-enzymatiske metoder til bestemmelse af hormoner.

■ Metodens reproducerbarhed vurderes ved at måle koncentrationen af ​​et stof i den samme prøve flere gange på en enkelt dag og i en serie prøver. Næste dag laver de samme mål med samme prøve. Normalt er afvigelserne i målingerne underlagt gaussisk lov, hvilket angiver stabiliteten af ​​metoden. For hver række målinger beregnes gennemsnitsværdien( Xcp).Find derefter forskellen mellem værdien af ​​hver måling, og dette betyder og beregner standardafvigelsen( S) og variationskoefficienten( V).Bestem variationskoefficienten på andre dage, og hvis den ikke overstiger 5%, anses undersøgelsesmetoden for tilstrækkelig. For enzymer kan V nå 10%.Det er hvert laboratories ansvar at verificere reproducerbarheden af ​​metoderne, som estimeres ud fra standardafvigelsen( SD).For eksempel er reproducerbarhed ved bestemmelse af koncentrationen af ​​total cholesterol i blodserumet i et godt laboratorium sædvanligvis i gennemsnit +0,13 mmol / l. Det er kendt, at 95% konfidensinterval er + 2SD, hvilket i dette tilfælde svarer til 0,26 mmol / l. Således anses hvert resultat for at være rigtigt, hvis det ligger inden for disse grænser( +0,52 mmol / l).Således er koncentrationen af ​​totalt kolesterol i blodserumet 5,18 mmol / l, hvilket betyder at den sande værdi ligger mellem 4,92 og 5,44 mmol / l.

■ Specificitet - Muligheden for en metode til kun at måle den komponent, som den er beregnet til. For at vurdere specificiteten af ​​de anvendte analytiske urenheder, som, på grundlag af den kemiske struktur, er repræsentative medlemmer af disse grupper af stoffer, som fysiologisk

har praktisk betydning. I højere grad gælder dette for lægemidler, som kan forårsage kemisk indblanding under analysen. Lav specificitet og påvirkning af interferens fører til et fejlagtigt resultat( ikke forveksles med specificiteten af ​​metoden til patologi).

■ Metodeets analytiske følsomhed er den mindste mængde stof( den laveste koncentration), som kan detekteres ved denne metode. Dette begreb skal skelnes fra metodenes følsomhed med hensyn til påvisning af en bestemt patologi. Når man vælger forskningsmetoden, er det nødvendigt at være opmærksom på metodens analytiske følsomhed, da kvaliteten af ​​forskningsresultaterne afhænger af dette. F.eks bekendtgørelse af sundhedsministeriet i Den Russiske Føderation № 282 dateret 09.28.98 "om anvendelse af enzymimmunassay systemer til at opdage overflade Ag af hepatitis B virus( HBsAg), og antistoffer mod hepatitis C-virus( anti-HCV) i humant serum" må ikke bruge testensystem til at identificere HBsAg, følsomhed er større end 0,5 ng / ml og testsystemer til påvisning af anti-HCV uden i sin sammensætning proteiner kodet NS3 område HCV-RNA Brug af testsystemer til påvisning af HBsAg følsomhedover 0,5 ng / ml og ikke indeholdende protein i dets sammensætningi kodet af NS3-zonen af ​​RNA for hepatitis C-virus, fører til det forhold, at viral hepatitis B og C hos en række patienter ikke diagnosticeres.

analytisk variation, afhængig af de metoder og betingelser for deres gennemførelse, strækker sig ud over de normale laboratorieværdier, og dette begrænser muligheden af ​​laboratorieundersøgelser at skelne mellem sundhed og sygdom. Derfor bør laboratoriespecialisterne stræbe efter at reducere den analytiske variation. I tabel. De maksimalt tilladte grænser for den analytiske variation( spredning) af de analyserede komponenter er angivet.

tallene i tabel. Værdierne af den tilladte analytiske variation( V) betragtes som middelmæssige vejledende værdier. Disse variationer, støbt til leukocytter og erythrocytter er cellulære elementer indtaste Beregn manuelle metoder, under anvendelse af analytiske hæmatologianalysatorer for variationskoefficienten var 1-3% af leukocytter, erythrocytter - 1-2% blodplade - 2-4% [Elevitch FR etal., 1987;Koepke, J. A., 1993].

Bekræftelse af, at den analytiske variation af metoden kan have en signifikant effekt på resultaterne af undersøgelsen, er angivet i tabel.data af 95% konfidensinterval ved beregning af leukocytblodformlen opnået på basis af statistisk analyse.

Når evaluering af resultaterne af laboratorietest lægen skal tage hensyn til alle de mange forskellige faktorer, der påvirker resultaterne til at kende pålideligheden af ​​de analytiske laboratorieundersøgelser, der er, for at være sikker på rigtigheden af ​​oplysninger med dem på de relevante dele af biomateriale. Kendskab til graden af ​​variabilitet af resultaterne af undersøgelser er vigtig for sammenligning med biologisk variabilitet samt for sammenligning med klinisk signifikante forskydninger i laboratorieindikatorer. Disse kriterier fastlægges ved udvikling af metoder, indikerer i deres beskrivelse, og om nødvendigt skal laboratorielægen informere lægen om det.maksimale tabel

tilladelige grænser for analytisk variation( spredning) de forskellige komponenter( Compendium of fremgangsmåder til laboratorium diagnostisk g., 1984 6.1. CMLD)

kliniker på de tekniske niveauer, og biologisk evaluering af laboratorieresultater bør overveje følgende kendsgerninger.

■ En sammenligning af analyseresultatet med en referenceområde tilsvarende værdier angiver kun sandsynligheden for overholdelse eller manglende overholdelse af dette resultat er normal.

■ Der er fysiologiske forskelle i normale værdier og fysiologiske variationer fra dag til dag( biologisk variation).

■ Der er små tekniske forskelle i resultaterne af analyser opnået på forskellige dage( analytisk variation af metoden).

■ Referenceområder kan variere med forskellige laboratoriemetoder.

■ Ændringen i indholdet af testkomponenten kan være uspecifik og ikke forbundet med en primær metabolisk lidelse af denne komponent( interferens, hæmolyse, lipæmi, stofbrug osv.).Der

■ tilfældige variationer, hvis årsager ikke er klare, men bør overvejes ved fortolkning af resultaterne af gentagne analyser i øjeblikket;For eksempel er de daglige variationer i koncentrationen af ​​jern i blodet meget store og kan gøre det vanskeligt at identificere ændringsmønstre i denne komponent.

■ Ved undersøgelse af plasma- eller blodserum opnås information om ekstracellulære koncentrationer af testkomponenterne. Disse koncentrationer afhænger af mængden af ​​vand i det ekstracellulære rum i forhold til mængden af ​​den målte komponent og kan ikke altid afspejler niveauet af intracellulære analytter.